Orientador: Edgard Graner

Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba

Resumo: O carcinoma espinocelular (CEC) oral representa mais de 90% das neoplasias malignas que acometem a cavidade oral e tem como principal determinante de prognóstico a presença de metástases em linfonodos da cadeia cervical, o que diminui a taxa de sobrevida em cerca de 50%. Em casos de...

Resumo: O carcinoma espinocelular (CEC) oral representa mais de 90% das neoplasias malignas que acometem a cavidade oral e tem como principal determinante de prognóstico a presença de metástases em linfonodos da cadeia cervical, o que diminui a taxa de sobrevida em cerca de 50%. Em casos de recorrência ou de metástases à distância uma abordagem quimioterápica é realizada, no qual os taxanos representam um dos principais compostos utilizados em diversos protocolos. Vários tumores malignos humanos apresentam um fenótipo lipogênico, dentre os quais se inclui o CEC oral. Nestes, a elevada expressão e atividade da enzima ácido graxo sintase (FASN) aumenta a biossíntese de ácidos graxos e permite, dentre outras coisas, uma rápida proliferação das células neoplásicas. Por esta razão, FASN vem sendo apontada como uma oncoproteína metabólica e potencial alvo molecular no tratamento oncológico. No presente trabalho, avaliamos os efeitos da combinação do inibidor de FASN orlistat (ORL) com o quimioterápico paclitaxel (PTX) sobre a linhagem celular metastática de CEC oral LN-1 e sobre o crescimento tumoral e disseminação metastática in vivo, utilizando um modelo ortotópico de CEC de língua. Iniciamos também a padronização de um novo modelo de enxertos xenográficos derivados de pacientes (PDTX). Para os estudos in vitro, as células LN-1 foram tratadas com as drogas isoladas e associadas, em suas respectivas IC50, e avaliadas com relação à viabilidade celular, taxas de apoptose e de necrose, progressão do ciclo celular, migração e expressão dos marcadores de transição epitélio-mesenquimal (EMT). A viabilidade celular foi reduzida de forma dose-dependente com ambas as drogas, houve sinergismo entre ORL e PTX, com aumento das taxas de apoptose e acúmulo das células na fase G2 do ciclo celular, além de redução do potencial migratório e reversão, pelo menos em parte, do fenótipo de EMT. In vivo, verificou-se, com a mesma combinação, uma drástica redução tanto do volume dos tumores primários (99,6%) como da disseminação para os linfonodos cervicais (80,8%). No modelo PDTX, observamos que quase todos os xenoenxertos obtidos mantiveram as características histopatológicas dos tecidos doadores. Em conjunto, estes resultados sugerem que a inibição de FASN associada ao tratamento quimioterápico com paclitaxel apresenta forte efeito antitumoral para os CECs orais e pode servir de base para futuros estudos clínicos com inibidores de FASN. Por fim, o modelo PDTX, caso tenha sua reprodutibilidade comprovada, pode ser útil para a compreensão da biologia dos CECs orais e eventualmente prever a resposta dos pacientes mediante diferentes agentes quimioterápicos

Abstract: Oral squamous cell carcinoma (OSCC) accounts for more than 90% of the malignant neoplasias affecting the oral cavity and its main prognostic factor is the presence of metastasis in cervical lymph nodes, which may decrease the survival rate by approximately 50%. For recurrent or metastatic...

Abstract: Oral squamous cell carcinoma (OSCC) accounts for more than 90% of the malignant neoplasias affecting the oral cavity and its main prognostic factor is the presence of metastasis in cervical lymph nodes, which may decrease the survival rate by approximately 50%. For recurrent or metastatic OSCC, a chemotherapeutic approach is performed and taxanes are included in several protocols. Several human malignant tumors, including OSCC, have a lipogenic phenotype with high expression and activity of fatty acid synthase (FASN) and increased production of palmitate, which sustains the rapid proliferation of neoplastic cells. For this reason, FASN has been pointed as a metabolic oncoprotein and potential molecular target for cancer treatment. In the present study, we evaluated the effects of the combination of orlistat (ORL), an inhibitor of FASN activity, and the chemotherapic agent paclitaxel (PTX) on the metastatic cell line SSC-9 LN-1 and on tumor growth and metastatic dissemination in an orthotopic model of tongue SCC. We also initiated here the establishment of a new patient-derived tumor xenograft model for OSCC (PDTX). For the in vitro studies, LN-1 cells were treated with both drugs isolated or associated at their respective IC50, and the viability, apoptosis, necrosis, cell cycle progression, migration, and production of epithelial-mesenchymal transition markers (EMT) evaluated. Cell viability was reduced in a dose-dependent manner by both drugs and the synergism between ORL and PTX determined increased rates of apoptosis and cell cycle arrest in G2. In addition, ORL and PTX reduced cell migration and partially reversed EMT in LN-1 cells. In vivo, ORL plus PTX promoted a drastic reduction in the volume of primary orthotopic tongue SCC (99,6%) and their metastatic spread to cervical lymph nodes (80,8%). In the PDTX model, it was possible to observe that almost all xenografts preserved the histopathological characteristics of the donor tumor tissues. Taken together, these results here presented suggest that the FASN inhibitiors associated with paclitaxel have strong antitumor effect on OSCC and may serve as a basis for future clinical studies. Finally, the PDTX model, if reproducible in additional studies, may be useful for the understanding OSCC biology and possibly for the prediction of patient response to different chemotherapics

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