Resumo: Seguindo os avanços da genômica e da proteômica, novos campos das "ômicas" estão emergindo. A metabolômica complementa naturalmente os estudos na área de genômica e proteômica, no entanto a grande diversidade físico-química do metaboloma conduz a uma subdivisão dos metabólitos. Assim, a lipidômica está atualmente emergindo como uma disciplina na interface da bioquímica de lipídeos, tecnologia e medicina. Esta expansão do campo da lipidômica pode ser atribuída a avanços na tecnologia analítica, em particular, no desenvolvimentos de novas técnicas de espectrometria de massas para a caracterização e quantificação das diversas espécies de lipídeos presentes em um lipidoma. O objetivo desta tese foi a busca por biomarcadores que representem o estado de doença e que possam auxiliar no desenvolvimento de novos métodos diagnósticos baseados em espectrometria de massas. Desta forma, foram estudadas duas doenças: colestase neonatal e fibrose cística analisando-se amostras de papel filtro com sangue seco e pele e saliva, respectivamente. As amostras foram coletadas de forma simples e não invasiva e foram preparadas de maneira rápida para serem injetadas diretamente em espectrômetro de massas, sem etapas de separação. A espectrometria de massas de alta resolução associada a validação estatísticas dos marcadores encontrados através de análise discriminante por mínimos quadrados parciais ofereceu aos métodos desenvolvidos alta sensibilidade e especificidade possibilitando uma potencial implementação na rotina de diagnóstico de colestase neonatal e fibrose cística Ver menos

Abstract: Following the advances of genomics and protection, new fields of "omics" are emerging. The metabolomics complement naturally the studies in the area of genomics and proteomics, however a great physicochemical diversity of the metabolism leads to a subdivision of the metabolites. Thus, lipidomics is present emerging as a discipline at the interface of biochemistry of lipids, technology and medicine. This expansion of the lipid field can be attributed to advances in analytical technology, in particular, there is no development of new mass spectrometry techniques for a characterization and quantification of the various lipid species present in a lipidoma. The objective of this research was a search for biomarkers that represent the disease state and that does not help any development of new diagnostic methods based on mass spectrometry. In this way, two diseases were studied: neonatal cholestasis and cystic fibrosis, analyzing dryed blood spots and skin imprinting and saliva, respectively. Samples collection was simple and non- invasive and were prepared quickly to be directly infused in mass spectrometer, without separation steps. High resolution mass spectrometry associated with statistical validation of the markers on the partial least squares discriminant analysis offered to the developed methods high sensitivity and specificity allowing a potential implementation in the routine of diagnosis of neonatal cholesterol and cystic fibrosis Ver menos