Resumo: Este trabalho focou na detecção das atividades de monoamina oxidase (MAO) e transaminase (TA) em fungos isolados da pele humana, aplicando a técnica de triagem de alto desempenho (HTS). No primeiro capítulo, a técnica de HTS foi utilizada em 39 fungos, utilizando uma sonda fluorogênica (7-(3-aminopropóxi)cumarina) sintetizada em nosso laboratório. A atividade enzimática detectada através de fluorescência permitiu selecionar 5 fungos (9M1 - Epicoccum sp., 23M1-IS4 - Scolecobasidium sp., 28M5 - Massarina sp., 37M-IS2 - Marasmius sp. e 43M1- NI) que apresentaram a partir de 30 % de atividades MAO e/ou TA. No segundo capítulo, os microrganismos pré-selecionados nos ensaios de HTS foram submetidos a ensaios de biocatálise utilizando um análogo racêmico de solenopsina como substrato. O fungo 37M-IS2 (Marasmius sp.) apresentou atividade MAO sobre a 2-metil-6-pentilpiperidina transformando-a em piperideína, com conversão de 38 % e levando a um excesso enantiomérico de 73 %, mostrando o potencial desse microrganismo na desracemização de 2-metil-6-alquilpiperidinas. Este resultado representa um grande avanço na descoberta de novas monoamina oxidases, uma vez que existem poucos relatos na literatura sobre novas MAOs além a de Aspergillus niger, que é a mais conhecida e estudada. O sequenciamento genético do fungo Marasmius sp., visando detectar o gene responsável pela atividade encontrada, será feito futuramente Ver menos

Abstract: This research aimed at the detection of monoamine oxidase (MAO) and transaminase (TA) activities in fungi isolated from human skin applying high-throughput screening (HTS) methodologies. In the first chapter, HTS was performed in 39 fungi using a fluorogenic probe (7-(3-aminopropoxy)coumarin) synthesized in our laboratory. The enzymatic activity detected by fluorescence allowed the selection of 5 fungi (9M1 - Epicoccum sp., 23M1-IS4 - Scolecobasidium sp., 28M5 - Massarina sp., 37M-IS2 - Marasmius sp. and 43M1- NI) that showed from 30 % of MAO and/or TA activities. In the second chapter, the preselected microorganisms with HTS technique were evaluated to resolve a racemic solenopsine analogue (2-methyl-6-pentylpiperidine). The 37M-IS2 fungus (Marasmius sp.) revealed MAO activity by transforming 2-methyl-6-pentylpiperidine into piperideíne in 38 % yield and 73 % of enantiomeric excess, showing the potential of this microorganism to deracemize 2-methyl-6-alkylpiperidines. This result represents a great advance in the discovery of new monoamine oxidases, as there are few reports on new MAOs besides that of Aspergillus niger which is the best known and studied. A genetic sequencing of the fungus Marasmius sp., aiming at detecting the gene responsible for this activity, will be achieved in the near future Ver menos