Orientador: Marcelo Lancellotti

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: Neisseria meningitidis, bactéria aeróbica Gram negativa, causa infecções meningocócicas que podem resultar em doenças severas incluindo meningite meningocócica, sepsis e morte. Uma vez que a administração precoce de antibióticos está relacionada às baixas taxas de morbidade e mortalidade, é...

Resumo: Neisseria meningitidis, bactéria aeróbica Gram negativa, causa infecções meningocócicas que podem resultar em doenças severas incluindo meningite meningocócica, sepsis e morte. Uma vez que a administração precoce de antibióticos está relacionada às baixas taxas de morbidade e mortalidade, é de crucial importância iniciar o tratamento o mais rápido possível. A administração de antibióticos aos pacientes com suspeita de infecções meningocócicas antes da coleta de material biológico tem sido uma prática comum que pode prejudicar o diagnóstico microbiológico por cultura bacteriana. A abordagem nos últimos anos tem sido o desenvolvimento de técnicas alternativas que possam ser utilizadas para se obter o diagnóstico etiológico. Técnicas de biologia molecular, como a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) tem sido desenvolvidas para melhorar a sensibilidade e especificidade da detecção de microorganismo e aliadas a Nanotecnologia podem ser úteis para desenvolvimento de métodos alternativos de diagnóstico. Foi padronizada PCR para N. meningitidis ATCC 23247 Sorogrupo B com a utilização de primers do gene synD, através de gradiente de MgCl2. Também foi determinado o Limite de Detecção (LD) de DNA da PCR. Então a reação foi adjuvada com nanopartículas de sílica mesoposa SAB-15 e SBA-16. Não houve aumento do LD de DNA nas concentrações de nanopartículas testadas. Também foi realizado estudo entre a interação do DNA e SBA-15 e SBA-16 através de Gel Retardo e Dicroísmo Circular. Resultados sugerem interação fraca entre DNA e estas nanopartículas. Desta forma conclui-se que nanopartículas SBA-15 e SBA-16 não possuem interação com DNA a ponto de melhorar seu LD, não sendo úteis, nas concentrações testadas, para o desenvolvimento de métodos diagnósticos mais sensíveis

Abstract: Neisseria meningitidis , Gram-negative aerobic bacteria , which cause meningococcal disease can result in severe diseases including meningococcal meningitis , sepsis and death. Since the early administration of antibiotics is related to lower rates of morbidity and mortality, it is crucial...

Abstract: Neisseria meningitidis , Gram-negative aerobic bacteria , which cause meningococcal disease can result in severe diseases including meningococcal meningitis , sepsis and death. Since the early administration of antibiotics is related to lower rates of morbidity and mortality, it is crucial to start treatment as soon as possible . The administration of antibiotics to patients with suspected meningococcal disease before the collection of biological material has been a common practice that can harm the microbiological diagnosis of bacterial culture . The approach in recent years has been the development of alternative techniques that might be used to obtain the etiologic diagnosis. Molecular biology techniques such as the Polymerase Chain Reaction (PCR ) has been developed to improve the sensitivity and specificity of detection of a microorganism and allied Nanotechnology may be useful for development of alternative methods of diagnosis. PCR was standardized for N. ATCC 23247 meningitidis Serogroup B using primers gene SynD, through MgCl2 gradient . Also determined was the limit of detection (LD) of PCR DNA . Then the reaction was adjuvanted with silica nanoparticles mesoposa SAB- 15 and SBA - 16 . There was no increase in LD DNA concentrations of nanoparticles tested. Also it was studied the interaction between DNA and SBA - 15 and SBA - 16 by Gel Retardation and Circular Dichroism . Results suggest weak interaction between DNA and these nanoparticles . Thus it is concluded that nanoparticles SBA-15 and SBA-16 does not have interaction with DNA improve their point of LD and is not useful in concentrations, for the development of more sensitive diagnostic methods