Resumo: "Streptococcus sanguinis" é uma espécie comensal abundante na microbiota bucal capaz de iniciar a colonização dos dentes, mas frequentemente associada a infecções cardiovasculares oportunistas. Esta espécie utiliza o sistema de dois componentes (SDC) VicRK para regular genes envolvidos na produção de peróxido de hidrogênio, homeostase da parede celular e formação de biofilmes. Um dos genes alvo de VicRK ainda com função desconhecida, ssa_0094, é fortemente induzido por este SDC na cepa SK36. O objetivo deste estudo foi investigar a contribuição de ssa_0094 para a biogênese da parede celular, formação de biofilme e outros fenótipos associados à persistência de S. sanguinis em sítios bucais e extra-bucais. Para isso, uma cepa mutante isogênica de ssa_0094, foi obtida a partir da cepa S. sanguinis SK36 (SK0094), as cepas foram analisadas quanto ao padrão de crescimento planctônico e em biofilmes, à morfologia da parede celular, hidrofobicidade de superfície e perfil de autólise, agregação celular mediada por sacarose, produção de H2O2 e de eDNA, assim como quanto à persistência ex vivo em sangue humano. Os dados obtidos sugerem que, nas condições experimentais utilizadas, ssa_0094 tem modesta influência na formação de biofilmes e na estrutura da parede celular, embora possa contribuir para o aumento na produção de eDNA de forma independente da produção de H2O2. Por outro lado, ssa_0094 parece influenciar a hidrofobicidade sob força iônica compatível com o plasma, além de ser requerido para a persistência em sangue humano. Estes resultados sugerem que ssa_0094 pode ser importante para a sobrevivência de S. sanguinis em sítios extra-orais, ressaltando a necessidade de estudos mais detalhados sobre o papel deste gene na persistência desta espécie no sistema cardiovascular Ver menos

Abstract: "Streptococcus sanguinis" is an abundant commensal species in the human oral microbiota capable of initiating the colonization of teeth, but frequently associated with opportunistic infections of the cardiovascular system. This species relies on the two-component system (TCS) VicRK to regulate genes involved in hydrogen peroxide production, cell wall homeostasis and biofilm formation. One of the VicRK target genes with still unknown function, ssa_0094, is strongly induced by this SDC in the SK36 strain. The aim of this study was to investigate the contribution of ssa_0094 to cell wall morphology, biofilm formation and other phenotypes associated with S. sanguinis persistence in oral and extra-oral site. To this end, an isogenic mutant of ssa_0094 was obtained from SK36 (SK0094) and subjected to phenotypic screening in comparisons with SK36 under different culture conditions. Profiles of planktonic and biofilm growth, cell wall morphology, surface hydrophobicity and autolysis, sucrose-mediated cell aggregation, production of H2O2 and eDNA as well as ex vivo persistence in human blood were assessed. A mutant complemented with an episomal copy of ssa_0094 was used as a control. The data obtained suggest that, under the experimental conditions used, ssa_0094 has a modest influence on biofilm formation and cell wall structure, although it may contribute to increased eDNA production independently of H2O2 production. On the other hand, ssa_0094 appears to influence on the surface hydrophobicity under plasma-compatible ionic strengths and are required for S. sanguinis persistence in human blood. These results suggest that ssa_0094 may be important for the survival of S. sanguinis in extra-oral sites, highlighting the need for additional studies to explore the roles of this gene in S. sanguinis persistence in the cardiovascular system. Ver menos