Orientadores: Fabio Trindade Maranhão Costa, Letusa Albrecht

Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: A malária é um dos maiores problemas de saúde pública mundial. No Brasil, o principal agente etiológico é o protozoário Plasmodium vivax. A malária vivax é raramente letal, mas tem um grande impacto na qualidade de vida das populações em áreas endêmicas. Além disso, as medidas de controle e...

Resumo: A malária é um dos maiores problemas de saúde pública mundial. No Brasil, o principal agente etiológico é o protozoário Plasmodium vivax. A malária vivax é raramente letal, mas tem um grande impacto na qualidade de vida das populações em áreas endêmicas. Além disso, as medidas de controle e tratamento da doença não são totalmente eficazes, por isso a busca de métodos de controle alternativos, como uma vacina eficiente, é uma necessidade atual e urgente. Indivíduos naturalmente expostos à malária desenvolvem graus de imunidade. A compreensão da imunidade naturalmente adquirida e da memória imunológica são essenciais para o desenvolvimento de uma vacina. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi caracterizar as células B de memória e avaliar a resposta imune humoral naturalmente adquirida contra potenciais antígenos vacinais em indivíduos expostos à infecção por Plasmodium vivax residentes de regiões endêmicas brasileiras. O primeiro capítulo deste trabalho elucida aspectos da diversidade genética de um dos principais candidatos vacinais contra a malária vivax, o antígeno PvAMA1. Observou-se em isolados de P. vivax de uma região endêmica brasileira a presença de 19 haplótipos de PvAMA1. Dois destes haplótipos foram selecionados e expressos como proteínas recombinantes PvAMA1V5 e PvAMA1V16. A resposta de anticorpos IgG naturalmente adquirida contra elas foi quantificada em indivíduos de duas regiões endêmicas distintas. Foram observados anticorpos contra ambas as proteínas tanto em indivíduos com malária aguda quanto em indivíduos com histórico de malária vivax, o que mostra que existe longevidade na resposta imune humoral contra estes antígenos. O segundo capítulo tem enfoque na caracterização mais aprofundada da resposta de anticorpos IgG e IgM naturalmente adquiridos ao longo do tempo e do perfil de células B de memória. Para isso, indivíduos expostos à malária foram acompanhados durante 180 dias a fim de caracterizar a longevidade dos anticorpos frente aos antígenos PvAMA1V5 e PvAMA1V16. Ademais, foram selecionados por análises in silico utilizando a tecnologia da vacinologia reversa, quatro potenciais candidatos vacinais pouco estudados. Durante a infecção, os indivíduos tiveram resposta de anticorpos IgM contra PvAMA1V5 e PvAMA1V16, porém essa resposta foi temporária, visto que não foi observada 50 e 180 dias após infecção. No que diz respeito a resposta de anticorpos IgG, na fase aguda da infecção os indivíduos apresentaram anticorpos antígeno-específicos em graus variados tanto contra as variantes de PvAMA1 quanto contra as quatro proteínas selecionadas pelas análises in silico e as respostas persistiram ao longo do tempo na ausência de reinfecção. A caracterização dos subtipos de células B mostrou que houve alterações nas populações de células B naives, células B de memória atípicas e plasmócitos após infecção por malária vivax

Abstract: Malaria is one of the most important public health problems worldwide. In Brazil, the main etiological agent is the protozoan of the species Plasmodium vivax. Vivax malaria is rarely lethal, but it has a major impact on the quality of life of populations in endemic areas. In addition,...

Abstract: Malaria is one of the most important public health problems worldwide. In Brazil, the main etiological agent is the protozoan of the species Plasmodium vivax. Vivax malaria is rarely lethal, but it has a major impact on the quality of life of populations in endemic areas. In addition, disease control and treatment measures are not fully effective, thus the search for alternative control methods, such as an effective vaccine, is a current and urgent need. Individuals naturally exposed to Plasmodium vivax infection develop varying degrees of immunity. Understanding naturally acquired immunity and immunological memory are essential for the development of a vaccine. Thus, this study aimed to characterize memory B cells and evaluate the naturally acquired humoral immune response against potential vaccine antigens in individuals exposed to vivax malaria/ living in endemic regions of Brazil. The first chapter of this work elucidates aspects of the genetic diversity of one of the main malaria vivax vaccine candidates, the PvAMA1 antigen. It was observed in P. vivax isolates from a Brazilian endemic region 19 PvAMA1 haplotypes. Two of these haplotypes were selected and expressed as recombinant proteins PvAMA1V5 and PvAMA1V16 were expressed. The naturally acquired IgG antibody response against them was quantified in individuals from two different endemic regions. Antibodies against both proteins were observed both in individuals with acute malaria and in individuals with a history of vivax malaria, which shows that there is longevity in the humoral immune response against these antigens. The second chapter focuses on the more in-depth characterization of the naturally acquired IgG and IgM antibody response over time and the memory B cell profile. For this, individuals exposed to malaria were followed for 180 days to characterize the longevity of the antibodies against the PvAMA1V5 and PvAMA1V16 antigens. Furthermore, four potential vaccine candidates that have not been studied were selected by in silico analysis using reverse vaccinology technology. During infection, subjects had a strong IgM antibody response against PvAMA1V5 and PvAMA1V16, but this response was transient as it was not observed 50 and 180 days after infection. Regarding the IgG antibody response, in the acute phase of the infection, individuals presented specific antigen antibodies in varying degrees both against the PvAMA1 variants and against the four proteins selected by in silico analysis and the responses persisted over time in the absence of reinfection. The characterization of the B cell subtypes showed that there were changes in the populations of naive B cells, atypical memory B cells and plasma cells after malaria vivax infection