Caracterização parcial do luteovirus associado ao amarelecimento foliar da cana-de-açucar e aspectos fisiopatologicos na planta hospedeira
Marcos C. Gonçalves
DISSERTAÇÃO
Português
T/UNICAMP G586c
Campinas, SP : [s.n.], 1998.
84f.
Orientador: Jorge Vega
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Resumo: A síndrome do amarelecimento foliar da cana-de-açúcar constitui hoje uma preocupação mundial para a produtividade da cultura. Contudo, controvérsias ainda são levantadas sobre a sua origem e principalmente sobre a natureza do agente causal da moléstia. Visando contribuir para o...
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Resumo: A síndrome do amarelecimento foliar da cana-de-açúcar constitui hoje uma preocupação mundial para a produtividade da cultura. Contudo, controvérsias ainda são levantadas sobre a sua origem e principalmente sobre a natureza do agente causal da moléstia. Visando contribuir para o estabelecimento da etiologia da doença, o presente trabalho apresenta a purificação do luteovirus identificado em plantas com sintomas e a tentativa de produção de um anti-soro policlonal para o estabelecimento de um método seguro de diagnóstico. As alterações na fisiologia da planta provocadas pelo patógeno, refletindo ou não em sintomas visíveis, foram estudadas por monitoramento da eficiência fotossintética e dos conteúdos de pigmentos fotossintetizantes e carboidratos fotoassimilados. O método de purificação avaliado ofereceu uma boa eficiência, sendo obtidas razões A260/A280=1, 8 e concentrações de 100µg/ml de partículas virais de formato isométrico de ca. 25nm. Os anti-soros policlonais produzidos, porém, não foram úteis para detecção serológica do vírus, sendo constatada uma forte reação cruzada com plantas sadias em testes PTA-ELISA, DASI-ELISA e "Tissue-Blotting". Foram encontradas reduções nos teores de pigmentos fotossintetizantes e na razão Cla/Clb, indicando alterações na estrutura e função dos cloroplastos em plantas infectadas. Ocorreu diminuição da atividade fotossintética, em termos da taxa de troca líquida de CO2, principalmente sob altos níveis de radiação fotossinteticamente ativa. As plantas infectadas também apresentaram fotoinibição e alterações em algumas etapas do transporte eletrônico no PSII durante o preenchimento do "pool" de PQ. Houve acúmulo de açúcares nas folhas de plantas infectadas, provavelmente devido à presença do vírus nas células do floema foliar. O açúcar de maior acúmulo foi a sacarose, devido à interferência no seu carregamento e/ou transporte no floema. Essas alterações nas relações fonte dreno aliadas à queda na eficiência fotossintética foram interpretadas como os principais responsáveis pela quebra de produção da cultura
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Abstract: PARTIAL CHARACTERIZATION OF SUGARCANE LEAF YELLOWING ASSOCIATED LUTEOVIRUS AND PHYSIOPATHOLOGICAL ASPECTS OF THE HOST PLANT. The sugarcane yeIIow Ieaf disease has become a serlous problem in most sugarcane growing countries. In recent studies, Iuteovirus-like particIes present in the...
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Abstract: PARTIAL CHARACTERIZATION OF SUGARCANE LEAF YELLOWING ASSOCIATED LUTEOVIRUS AND PHYSIOPATHOLOGICAL ASPECTS OF THE HOST PLANT. The sugarcane yeIIow Ieaf disease has become a serlous problem in most sugarcane growing countries. In recent studies, Iuteovirus-like particIes present in the phIoem companion cells have been found in symptomatic paints (VEGA et al., 1997). This work was intended to obtain adequate amounts of purified particIes to immunize animaIs against the virus, aIong with additional studies for its characterization. Polyclonal antisera were obtained by injecting rabbits and chickens with purified virus. Physiological aspects of the infected plants were also studied by monitoring photosynthetic processes using chIorophyll fIuorescence and gas exchange analysis, changes in photosynthetic pigment levels and carbohydrate determinations in the Ieaves. The best purifications were obtained using a final centrifugation for 3 hours at 35000 rpm in density gradients of 5 and 10% sucrose, 5,10,15 and 20% CS2SO4 in a 10% sucrose solution. Concentration of particles were around 100µg/ml and the 260/280 ratio of 1,8. Absorbance spectra at UV, after fractionating, presented curves characteristic of polyhedral particles with peaks at 260nm. Electron microscopy of fractions with higher A260 showed a great number of isometric isometric particles of ca. 25nm. Antisera obtained did not offer a good tool for diagnosis, since cross-reaction against healthy plants were frequently found in PTA-ELISA, DASI-ELISA and Tissue-Blotting. Levels of chlorophylls a and b, and carotenoids were reduced in infected plants as well as the ratio chla/chlb. It seems likely that these alterations are partially responsible for the reductions found in net rates of gas exchanges, by the photoinhibition and modifications on redox state of primary and secondary electron acceptors of photosystem II, QA and QB, during the filling up of the plastoquinone pool , (PQ) . Accumulations of carbohydrates, especially sucrose, were found in the leaves. The presence of the virus in phloem cells is thought to impair the loading and/or transport of sugars in the phloem, inducing their accumulations in the leaves
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Caracterização parcial do luteovirus associado ao amarelecimento foliar da cana-de-açucar e aspectos fisiopatologicos na planta hospedeira
Marcos C. Gonçalves
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