Resumo: A cicatrização é um processo complexo no qual orquestram-se vários tipos celulares assim como proteínas estruturais. O Fibrinogênio (F1), proteína principal da matriz provisória na ferida, é responsável por ocluir a área lesionada, dando início ao processo cicatricial. A Fibronectina (FN) é uma proteína que se liga ao F1 e assim, estabiliza-se a matriz na área da ferida. Uma vez estabilizada, ocorrem processos de migração celular ao leito da lesão como também ligação do F1 ao colágeno da pele ilesa circundante. No entanto, a maioria dos estudos descrevem que a ligação do F1 a FN acontece apenas em situações patológicas como infecções ou doenças inflamatórias, embora, um estudo recente descreveu a purificação do complexo de F1 ligado FN a partir de plasma humano de indivíduos saudáveis. Este trabalho trata-se de estudo in vitro e in vivo, no qual foi avaliada a velocidade de cicatrização, morfologia da ferida, modulação de genes envolvidos no processo de cicatrização, proliferação e migração celular em animais, tratados diariamente por via tópica com o Fibrinogenio (F1) e Fibronectina (FN). Também avaliamos o uso das matrizes de F1 e FN em modelos in vitro de cicatrização. As feridas foram foto documentadas sistematicamente e as amostras foram extraídas nos dias 2, 6 e 11 após a excisão. Estas amostras foram analisadas por meio de PCR em tempo real, imunofluorescência, microscopia óptica e de luz polarizada. Nossos resultados mostraram que o complexo ???F1: pFN acelera significativamente o proceso cicatricial, formação de tecido de granulação, e estimula a reepitelização em feridas na pele de camundongos. Além disso, o uso da mistura de F1 e FN em feridas feitas em pele humana equivalente também estimulou o proceso cicatrizial. Para análise estatística, os grupos foram comparados utilizando test t student para dois grupos e 2-way ANOVA com o teste Bonferroni para três grupos ou mais. O nível de significância adotado foi de p<0,05. Os dados foram expressos como médias, erro-padrão, sendo indicado o número de experimentos independentes Ver menos

Abstract: The healing process is a complex multi-steps process in which several cell types and structural proteins are orchestrated. Fibrinogen (F1), the main protein of the provisional matrix in the wound, is responsible for occluding the injured area, initiating the healing process. Fibronectin (FN) is a protein that binds to F1 and thus stabilizes the matrix in the injured area. Once stabilized, macrophage aggregation processes, cell migration to the wound bed, as well as binding of F1 to the collagen of the surrounding unhealthy skin occur. However, most studies describe that F1 binding to FN occurs only in pathological situations such as infections or inflammatory diseases. A recent study described the purification of the F1-bound FN complex from human plasma from healthy individuals. This work is an experimental study in animals and in vitro, in which the healing speed, wound morphology, modulation of genes involved in the healing process, proliferation and cell migration in animals with acute wound model, will be evaluated by a daily topically application of Fibrin and Fibrinogen. We will also evaluate the use of F1 and FN matrices for in vitro healing models. The wounds will be systematically documented, and the samples will be extracted on days 2, 6 and 11 after excision. Our results showed that the complex ???F1: pFN significantly accelerates the healing process, formation of granulation tissue, how to potentiate reepithelization in mice skin wounds and in human equivalent 3D skin wounds. These samples will be analyzed using real-time PCR, optical microscopy, and polarized light. For statistical analysis, the groups were compared using test t student when comparing two groups and 2-way ANOVA with the Bonferroni test when comparing three groups or more. The level of significance adopted will be p <0.05. The data will be expressed as means, standard error, indicating the number of independent experiments Ver menos