Resumo: O uso abusivo de substâncias psicoativas (SPA) acompanha o homem desde o início dos tempos e, a partir da segunda metade do século XX, passou a aumentar substancialmente. A taxa de óbitos causados pelo abuso de drogas e medicamentos continua a aumentar, justificando a necessidade do desenvolvimento de estratégias analíticas que permitam a identificação de SPA em amostras biológicas, principalmente diante do grande número de novas substâncias psicoativas que vem surgindo nos últimos anos. Sendo assim, há necessidade de desenvolvimento de métodos sensíveis, porém abrangentes, que utilizem reduzido volume de solventes orgânicos. Neste trabalho, foi possível realizar uma análise crítica e avaliar a viabilidade do uso de técnicas emergentes de preparo de amostras nas análises toxicológicas realizadas em sangue postmortem, através do desenvolvimento de 3 métodos analíticos. Os métodos desenvolvidos utilizaram baixo volume de amostras, menor volume de solventes extratores (e de menor toxicidade) e de preparo mais simples do que o métodos frequentemente utilizados em laboratórios de toxicologia forense. Métodos quantitativos foram desenvolvidos e validados para determinação 49 SPA de interesse forense, utilizando a cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas sequencial como técnica instrumental. No trabalho I, foi desenvolvido e validado um método quantitativo para a análise de fentanil e seus análogos, através de extração por precipitação de proteínas, com linearidade avaliada de 1 a 500 ng/mL. Os valores obtidos para imprecisão e inexatidão foram melhores que 13,8% e -10,9%, respectivamente. Nos trabalhos II e III, uma miniaturização da técnica de QuEChERS foi aplicada no preparo de amostras para a análise de 37 SPA e 4 produtos de biotransformação. No segundo trabalho, o método desenvolvido envolveu a análise de 16 antidepressivos, 7 antipsicóticos e 3 produtos de biotransformação, sendo observada linearidade de 1 a 500 ng/mL, além de valores de imprecisão e inexatidão de 19,0% e 19,7%, respectivamente. No trabalho III, um método para análises de 11 benzodiazepínicos, 1 produto de biotransformação e 1 sedativo-hipnótico em sangue postmortem foi desenvolvido e validado, com linearidade de 10 a 2000 ng/mL, imprecisão e inexatidão de 18,2% e 17,4%, respectivamente. Não foram observados interferentes exógenos, endógenos ou contaminação cruzada (carryover) em nenhuma das validações. As vantagens observadas para o método miniaturizado são o pequeno volume de amostra (100 µL), preparo simples e eficaz, além de melhores valores para o parâmetro de recuperação. Todos os métodos foram aplicados em amostras reais cedidas pelo Núcleo de Toxicologia Forense do Instituto Médico Legal, Superintendência da Polícia Técnico-científica de São Paulo (NTF/IML/SPTC-SP) ou Instituto de Análises e Pesquisas Forenses de Sergipe (IAPF-SE), demonstrando a eficiência do protocolo Ver menos

Abstract: The abusive use of psychoactive substances (PAS) has been with man since the beginning of time and, from the second half of the 20th century, began to increase rapidly. The death rate caused by pharmaceutical and drug abuse continues to rise, justifying the need for development of analytical strategies which allows the identification of PAS in biological samples, especially given the large number of new psychoactive substances that have been emerging in recent years. Therefore, there is a need for development of sensitive but comprehensive methods that use a reduced volume of organic solvents. In this work, through the development of 3 analytical methods, it was possible to perform a critical analysis and assess the feasibility of using emerging techniques of sample preparation for toxicological analyzes in postmortem blood. Quantitative methods were developed and validated for the determination of 49 PSA of forensic interest, using liquid chromatography-tandem mass spectrometry as instrumental technique. Work I, a method was developed and validated for quantitative analysis of fentanil and its analogues, by protein precipitation extraction, with linearity evaluated from 1 to 500 ng/mL. Value observed for imprecision and bias were better than 13.8% and -10.9%, respectively. Works II and III, a miniaturization of QuEChERS technique was applied to sample preparation for the analysis of 37 PSA and 4 metabolites. In the second work, the developed method involved the analysis of 16 antidepressants, 7 antipsychotics and 3 metabolites, being observed a linearity from 1 to 500 ng/mL, in addition to imprecision and inaccuracy values of 19.0% and 19.7%, respectively. In work III, a method for the analysis of 11 benzodiazepines, 1 metabolite and 1 hypnotic/sedative in postmortem blood was developed and validated, with linearity from 10 to 2000 ng/mL, imprecision and bias of 18.2% and 17.4%, respectively. No exogenous, endogenous or cross-contamination (carryover) interferents were observed in any of the validations. The advantages observed for the miniaturized method were low sample volume (100 µL), simple and effective preparation, in addition to better values of recovery parameter. All methods were applied on authentic samples provided by the Forensic Toxicology Laboratory of the Institute of Legal Medicine, São Paulo State Police (NTF/IML/SPTC-SP) or the Institute of Forensic Analysis and Research of Sergipe (IAPF-SE), demonstrating the efficiency of the protocol Ver menos