Estudos estruturais da interação entre RAR e correpressores em condição normal e patológica [recurso eletrônico] : Structural studies of the interaction of normal and pathological RAR with corepressors
Tábata Renée Doratioto
TESE
Português
T/UNICAMP D726e
[Structural studies of the interaction of normal and pathological RAR with corepressors]
Campinas, SP : [s.n.], 2020.
1 recurso online (175 p.) : il., digital, arquivo PDF.
Orientadores: Ana Carolina Migliorini Figueira, Albane le Maire
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Resumo: O Receptor de Ácido Retinóico (RAR) é uma proteína pertencente à família dos receptores nucleares que atua na transcrição de genes relacionados ao crescimento e proliferação celular, homeostase e no metabolismo. Essa regulação da transcrição é mediada pela interação com seu ligante natural,...
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Resumo: O Receptor de Ácido Retinóico (RAR) é uma proteína pertencente à família dos receptores nucleares que atua na transcrição de genes relacionados ao crescimento e proliferação celular, homeostase e no metabolismo. Essa regulação da transcrição é mediada pela interação com seu ligante natural, o ácido retinóico. Na presença desse ligante, o RAR é capaz de recrutar moléculas coativadoras que interagem com outras proteínas da maquinaria de transcrição. Porém, na ausência do ligante, o RAR consegue reprimir a transcrição ao interagir com moléculas correpressoras, que são proteínas multidomínios capazes de recrutar enzimas que impedem a maquinaria de transcrição de atuar em determinado gene. Anomalias neste tipo de regulação podem relacionar o RAR e outros RNs a doenças, como é o caso da Leucemia Promielocítica Aguda (APL), uma condição patológica que resulta em uma alta proliferação de células promielóides anormais. Nesta condição, o RAR é expresso fusionado à Proteína da Leucemia Mielóide (PML) e se mantem inativo, sendo que a hipótese mais aceita é que esta fusão PML-RAR dificulta o desligamento de moléculas correpressoras, e por consequência, impede que haja a ativação de genes que diferenciem essas células promielóides. Esta tese buscou compreender detalhes moleculares do mecanismo de repressão nos quais essas proteínas estão envolvidas. Para isso foram realizados diversos ensaios que consistem primeiramente na (a) expressão das proteínas normais (selvagem) e de condição patológica (mutante PLM-RAR), (b) estudos de interação entre RAR/PML-RAR e correpressores, bem como sua interação nos complexos com RXR e DNA, (c) montagem dos complexos com correpressores, e (d) estudos estruturais dessas proteínas e complexos.Os resultados obtidos nesta pesquisa apontam para uma nova abordagem no entendimento de como a presença da proteína PML-RAR atua na APL. Ensaios de DLS e de estabilidade térmica apontam para a capacidade do PML-RAR de gerar grandes complexos organizados, com características beta-amiloides, como identificado em ensaios de ThT. Através destes resultados levantamos a hipótese de que o PML-RAR, ao formar estes grandes complexos, impede a ação do RAR nas vias de regulação gênica (interação com DNA e correguladores) e do PML nas suas funções nucleares, através do sequestro de proteínas normais/selvagens (RAR e PML)
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Abstract: The Retinoic Acid Receptor (RAR) is part of the nuclear receptors superfamily , and acts as transcription regulators of genes related to cell growth and proliferation, homeostasis and metabolism. This process is mediated by the interaction of RAR with its natural ligand, the retinoic acid....
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Abstract: The Retinoic Acid Receptor (RAR) is part of the nuclear receptors superfamily , and acts as transcription regulators of genes related to cell growth and proliferation, homeostasis and metabolism. This process is mediated by the interaction of RAR with its natural ligand, the retinoic acid. In the presence of its ligand, RAR is able to recruit coactivators that are capable of interacting with other proteins from the transcription machinery. However, in the absence of ligand, RAR can repress transcription by interacting with corepressors, which are multidomain proteins capable of recruiting enzymes that prevent transcription machinery to function in a particular gene. In this way many diseases are related to RAR and to nuclear receptors in general. This is the case of acute promyelocytic leukemia (APL), a pathological condition which presents a high promieloids abnormal cell proliferation . This occurs because the RAR is expressed fused to Protein Myelogenous Leukemia (PML), and behaves repressed. Until now, the most accepted explanation for this repression is that RAR-PML impairs the corepressors' dissociation and, consequently, prevents the activation of genes that are involved in these promieloid cells differentiation. In this sense, this study aimed to understand the molecular mechanism of repression in which RAR is involved. For this purpose, several tests which consist primarily on (a) expression of normal proteins (wild type) and in pathological conditions (PLM-RAR mutant) were performed together with (b) the study of the nuclear receptors and corepressores interactions , as well as, the interaction of these complexes with DNA, (c) the assembling of the NR-corepressores complexes , and (d) the structural studies of these complexes. The results obtained in this research point to a new approach in understanding how the presence of the PML-RAR protein acts in the APL. DLS and thermal stability assays point to the ability of PML-RAR to generate large organized complexes, with beta-amyloid characteristics, as identified in ThT assay. Through these results we raise the hypothesis that PML-RAR, when forming these large complexes, prevents the action of RAR in the pathways of gene regulation (interaction with DNA and co-regulators) and PML in its nuclear functions, through the sequestration of normal/wild proteins (RAR and PML)
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Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDF
Figueira, Ana Carolina Migliorini, 1980-
Orientador
Le Maire, Albane
Coorientador
Dias, Sandra Martha Gomes, 1975-
Avaliador
Santos, Guilherme Martins
Avaliador
Cordeiro, Artur Torres, 1976-
Avaliador
Rego, Eduardo Magalhães, 1965-
Avaliador
Estudos estruturais da interação entre RAR e correpressores em condição normal e patológica [recurso eletrônico] : Structural studies of the interaction of normal and pathological RAR with corepressors
Tábata Renée Doratioto
Estudos estruturais da interação entre RAR e correpressores em condição normal e patológica [recurso eletrônico] : Structural studies of the interaction of normal and pathological RAR with corepressors
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