Resumo: A retocolite ulcerativa (RCU) é uma das formas mais comuns das doenças inflamatórias intestinais (DII), e é caracterizada por períodos de remissão e atividade da doença, acompanhada de diarreia, dor abdominal, perda de peso e desnutrição. A RCU é uma doença de origem multifatorial que acomete indivíduos geneticamente susceptíveis, nos quais uma resposta imunológica inadequada resulta de complexas interações ambientais, microbianas e do sistema imune inato e adaptativo, levando à produção de citocinas pró-inflamatórias. Esta superprodução de citocinas prejudica o processamento estrutural proteico, deixando o lúmen do retículo endoplasmático (RE) repleto de proteínas mal formadas. O acúmulo de proteínas mal formadas no RE é chamado de estresse do retículo endoplasmático (ERE). A resposta ao acúmulo de proteínas mal formadas (unfolded protein response - UPR), iniciada pela ativação das vias IRE1/Xbp-1, PERK/eIF2? e ATF6, e foi previamente associada à inflamação intestinal em modelos experimentais, estudos de associação gênômica (GWAS). Além de promover a degradação de proteínas e apoptose, a ativação do ERE também induz a transcrição de genes pró-inflamatórios. Dessa forma, o objetivo desse projeto foi investigar e caracterizar a ocorrência da ativação do ERE em mucosa intestinal de pacientes com RCU. Nossos resultados mostram que, através de técnicas de hibridização in situ e de imunohistoquímica, o ERE está ativado em pacientes com RCU por meio das vias PERK/eIF2? e IRE1/Xbp-1, mas não via ATF6. A análise transcricional confirmou a ativação de PERK/eIF2?, bem como o aumento da expressão de genes relacionados a UPR. Também foi observado que os genes pró-apoptóticos e de autofagia (Bax e ATG6L1, respectivamente), bem como os de citocinas pró-inflamatórias estavam modulados em pacientes com RCU. Além disso, foi observado que o ERE é ativado não apenas nas células epiteliais intestinais, mas também nas células da lâmina própria da mucosa colônica de pacientes com RCU. Como conclusão, tivemos que as vias de ERE e UPR estão ativadas na mucosa do cólon de pacientes com RCU. O aumento dos marcadores de apoptose e autofagia em pacientes com RCU reforçam ainda mais que o ERE está ativado, uma vez que são mecanismos dependentes, ativados para contrabalançar o dano ao tecido. Esses achados fornecem novos paradigmas sobre os mecanismos moleculares que mantêm o processo inflamatório na RCU Ver menos

Abstract: Ulcerative colitis (UC) is one of the most common forms of inflammatory bowel disease (IBD), and is characterized by periods of remission and disease activity, accompanied by diarrhea, abdominal pain, weight loss and malnutrition. UC is a disease of multifactorial origin that affects genetically susceptible individuals, in which an inadequate immune response results from complex environmental, microbial and innate and adaptive immune system interactions, leading to the production of pro-inflammatory cytokines. This overproduction of cytokines impairs structural protein processing, leaving the lumen of the endoplasmic reticulum (ER) full of malformed proteins. The accumulation of malformed proteins in the ER is called endoplasmic reticulum stress (ERE). The response to the accumulation of malformed proteins (unfolded protein response - UPR), initiated by the activation of the IRE1/Xbp-1, PERK/eIF2? and ATF6 pathways, and was previously associated with intestinal inflammation in experimental models, gene association studies (GWAS). In addition to promoting protein degradation and apoptosis, ERE activation also induces transcription of pro-inflammatory genes. Thus, the aim of this project was to investigate and characterize the occurrence of ERE activation in the intestinal mucosa of UC patients. Our results showed that, through in situ hybridization and immunohistochemistry techniques, ERE is activated in UC patients through the PERK/eIF2? and IRE1/Xbp-1 pathways, but not via ATF6. Transcription analysis confirmed the activation of PERK/eIF2?, as well as the increased expression of UPR-related genes. We observed that pro-apoptotic and autophagy genes (Bax and ATG6L1, respectively), as well as pro-inflammatory cytokines were modulated in patients with UCR. Furthermore, ERE is activated not only in intestinal epithelial cells, but also in cells of the lamina propria of the colonic mucosa of UC patients. In conclusion, we found that the ERE and UPR pathways are activated in the UC colonic mucosa. Increased markers of apoptosis and autophagy further reinforce that ERE is activated, as they are dependent mechanisms activated to counteract tissue damage in UC. These findings may provide new paradigms on the molecular mechanisms that maintain the inflammatory process in UC Ver menos