Caracterização fenotipica e virulência de mutantes de Salmonella enterica no modelo de Caenorhabditis elegans [recurso eletrônico] = Phenotypic characterization and virulence of Salmonella enterica mutants in the Caenorhabditis elegans model
Yessica Paola Jaimes Florez
DISSERTAÇÃO
Inglês
T/UNICAMP J199c
[Phenotypic characterization and virulence of Salmonella enterica mutants in the Caenorhabditis elegans model]
Campinas, SP : [s.n.], 2020.
1 recurso online (70 p.) : il., digital, arquivo PDF.
Orientador: Marcelo Brocchi
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Resumo: Salmonella enterica está entre as principais bactérias causadoras de doenças transmitidas por alimentos. Os sintomas podem variar e vão desde intoxicação alimentar até infecção sistêmica. Embora seja um dos microrganismos modelo mais estudados, seus mecanismos de patogenicidade não estão...
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Resumo: Salmonella enterica está entre as principais bactérias causadoras de doenças transmitidas por alimentos. Os sintomas podem variar e vão desde intoxicação alimentar até infecção sistêmica. Embora seja um dos microrganismos modelo mais estudados, seus mecanismos de patogenicidade não estão totalmente elucidados, assim como os mecanismos de regulação gênica, importantes para o sucesso de S. enterica como patógenos. Atualmente, as proteínas de ligação ao RNA têm sido foco de estudos pelo seu papel como reguladores globais pós-transcricionais mediante a associação a pequenos RNAs (sRNAs). A proteína Hfq tem sido amplamente estudada pela sua importância na patogenicidade de S. enterica. No entanto, ainda existem alguns sRNA pouco estudados. Recentemente, foi descrito que a proteína ProQ também atua como um regulador pós-transcricional global em S. enterica, mas o seu papel e os mecanismos moleculares envolvidos não estão totalmente conhecidos. É crescente o uso de Caenorhabditis elegans como modelo para avaliar a patogenicidade bacteriana. No entanto, estudos são ainda necessários para melhor caracterizar as vantagens e desvantagens deste modelo para caracterizar mutantes e/ou linhagens bacterianas quanto ao potencial de patogenicidade. Com base no exposto, o objetivo geral deste projeto foi avaliar a virulência de diferentes mutantes de S. enterica para proteínas regulatórias no modelo de C. elegans. Para isso, foram selecionados mutantes para proteínas associadas ao nucleoide (NAPs) previamente construídos (?ihfA, ?stpA, ?ybaB) e mutantes para proteínas ligantes de RNA (?hfq e ?proQ), estes últimos construídos usando o sistema ? red e caracterizados por testes in vitro. Os resultados obtidos mostraram sensibilidade a condições de estresse, exceto o duplo mutante, o qual foi resistente ao choque térmico. Os mutantes ?proQ, ?hfq?proQ, ?proQ, e ?ifhA apresentaram atenuação da virulencia no modelo de C. elegans, enquanto os mutantes ?stpA e ?ybaB, não. O modelo de C. elegans exibiu resultados similares aos obtidos em modelo murino, demonstrando ser um modelo útil para o estabelecimento de uma plataforma inicial para avaliação da virulência bacteriana, ao menos para os mutantes aqui estudados
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Abstract: Salmonella enterica is part of the main bacteria that cause foodborne diseases, the symptoms can vary and range from intoxication to systemic infection. Although it is one of the most studied model microorganisms, the pathogenicity mechanisms are not fully elucidated, as well as the...
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Abstract: Salmonella enterica is part of the main bacteria that cause foodborne diseases, the symptoms can vary and range from intoxication to systemic infection. Although it is one of the most studied model microorganisms, the pathogenicity mechanisms are not fully elucidated, as well as the regulatory circuits, important for the success of S. enterica as pathogen. It is increasing the interest on RNA-binding proteins (RBP) due to their roles as global post-transcriptional regulators through association with small RNAs (sRNAs). The Hfq protein has been widely studied for its importance in the pathogenicity of S. enterica. However, there are still some sRNAs that have not been associated with specific binding proteins. Recently, it has been reported that the ProQ protein also acts as a global post-transcriptional regulator in S. enterica, but the molecular mechanisms are not yet fully elucidated. Few studies with animal models were performed in order to roles of this (RBP) in pathogenesis. The use of Caenorhabditis elegans as a model to evaluate bacterial pathogenicity is increasing. However, further studies are still necessary to better characterize the advantages and pitfalls of this model to characterize bacterial mutants and/or strains regarding pathogenicity potential. Based on the above, the general objective of this project was to evaluate the virulence of different S. enterica mutants for regulatory proteins in the C. elegans model. Therefore, S. enterica mutants for nucleoid-associated proteins (NAPs) previously constructed in our lab. such as ?ihfA, ?stpA, ?ybaB, and mutants for RBP, ?hfq and ?proQ, constructed by the ? red system were selected for this study. The last mutants were further characterized by tests in vitro. The results obtained showed that Hfq and ProQ mutants exhibited susceptibility to stresses conditions except for the double mutant which was resistant to thermal shock. Finally, the ?proQ, ?hfq?proQ, ?proQ, and ?ifhA mutants showed attenuation of virulence in the C. elegans model, although the ?stpA and ?ybaB mutants did not. The C. elegans model demonstrated similar results obtained with the murine model, thus validating the use of this model as an initial platform for assessing virulence at least for the mutants studied here
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Caracterização fenotipica e virulência de mutantes de Salmonella enterica no modelo de Caenorhabditis elegans [recurso eletrônico] = Phenotypic characterization and virulence of Salmonella enterica mutants in the Caenorhabditis elegans model
Yessica Paola Jaimes Florez
Caracterização fenotipica e virulência de mutantes de Salmonella enterica no modelo de Caenorhabditis elegans [recurso eletrônico] = Phenotypic characterization and virulence of Salmonella enterica mutants in the Caenorhabditis elegans model
Yessica Paola Jaimes Florez