Resumo: O gênero Crossodactylodes pertence à família Leptodactylidae e encontra-se atualmente alocado na subfamília Paratelmatobiinae, que inclui também os gêneros Paratelmatobius, Rupirana e Scythrophrys. No presente trabalho, análises citogenéticas comparativas mostraram que C. izecksohni (2n=30), Crossodactylodes sp. 3 (2n=32) e C. itambe (2n=36) variam em relação ao número diploide e seus cariótipos divergem daqueles das espécies de Paratelmatobius e Scythrophrys, as quais possuem cariótipos com 24 cromossomos. Os dados cromossômicos analisados à luz da hipótese filogenética permitiram inferir o aumento progressivo do número diploide ao longo da evolução do gênero Crossodactylodes. O mapeamento físico da sequência de DNA satélite PcP190 nos cariótipos de Crossodactylodes sp. 3 e C. itambe ofereceu evidências da ocorrência de um evento de fissão cêntrica. Blocos de heterocromatina constitutiva foram encontrados predominantemente em regiões centroméricas/pericentroméricas nas três espécies de Crossodactylodes analisadas. No entanto, em Crossodactylodes sp. 3 o braço curto do cromossomo 3 mostrou um grande bloco heterocromático, que se estendeu do centrômero até a NOR (região organizadora de nucléolo) e, adicionalmente, uma banda intersticial foi observada no braço curto do cromossomo 2. A coloração com o fluorocromo base-específico DAPI mostrou marcações brilhantes em todas as regiões reveladas pelo bandamento C nos cariótipos das três espécies. As NORs em C. izecksohni foram localizadas na região pericentromérica no braço curto dos cromossomos 14 e 15, enquanto em Crossodactylodes sp. 3, o par 3 apresentou uma NOR distal no braço curto e em C. itambe, o par 11 apresentou uma NOR na região pericentromérica no braço curto. Heteromorfismo de tamanho de NOR foi observado em C. itambe e em um dos exemplares dessa espécie apenas um dos cromossomos do par 11 é portador de NOR, enquanto seu homólogo exibiu extensa banda heterocromática CMA3-positiva e DAPI-negativa no braço curto. Em Crossodactylodes sp. 3 e C. itambe, a hibridação in situ de sondas teloméricas detectou sítios nas regiões terminais de todos os cromossomos. O avanço dos estudos citogenéticos em espécies do gênero Paratelmatobius permitiu o reconhecimento do número diploide (2n=24) em Pa. gaigeae. No cariótipo dessa espécie, uma constrição secundária foi observada no braço curto de ambos os homólogos do par 8, coincidentes com as NORs reveladas pelo método Ag-NOR. Bandas de heterocromatina constitutiva foram reveladas flanqueando a NOR e também em todas as regiões centroméricas. Além disso, o braço curto do par de cromossomos 6 mostrou-se totalmente heterocromático. Os novos dados citogenéticos de Pa. gaigeae permitiram inferir que o cromossomo 8 portador de NOR é homeólogo ao cromossomo 10 de Pa. poecilogaster, ao cromossomo 9 de Pa. segallai, ao cromossomo 7 de Pa. cardosoi e ao cromossomo 8 de Paratelmatobius sp. 2 e Paratelmatobius sp. 3. Além disso, foi possível inferir perda de heterocromatina associada a NOR na linhagem que deu origem a Pa. poecilogaster. Apesar do avanço no estudo citogenético da subfamília Paratelmatobiinae, ainda não é possível inferir homeologias cromossômicas entre os cariótipos de Crossodactylodes, Paratelmatobius e Scythrophrys Ver menos

Abstract: The genus Crossodactylodes belongs to the Leptodactylidae family and is currently part of the subfamily Paratelmatobiinae, which includes also the genera Paratelmatobius, Rupirana, and Scythrophrys. In the present paper, comparative cytogenetic analysis has shown that C. izecksohni (2n=30), Crossodactylodes sp. 3 (2n=32), and C. itambe (2n=36) vary regarding the diploid number and their karyotypes diverge from those of the Paratelmatobius and Scythrophrys species, which have karyotypes with 24 chromosomes. Chromosome data analyzed according to the interspecific phylogenetic relationships previously inferred for the sunfamily Paratelmatobiinae allowed to infer the progressive increase of the diploid number throughout the evolution of the genus Crossodactylodes. The physical mapping of the sequence of the satellite DNA PcP190 in the karyotypes of Crossodactylodes sp. 3 and C. itambe showed evidence of the occurrence of a centric fission event. Constitutive heterochromatin blocks were found predominantly in centromeric/pericentromeric regions in the three analyzed species of Crossodactylodes. However, on Crossodactylodes sp. 3 the short arm of the chromosome 3 showed a large heterochromatic block, which extended from the centromere to the NOR (nucleolus organizer region) and an interstitial band was observed in the short arm of chromosome 2. The base-specific fluorochrome DAPI showed bright markings in all regions revealed by C-banding on the karyotypes of the three species. The NORs in C. izecksohni were located in the pericentromeric region in the short arm of chromosomes 14 and 15. In Crossodactylodes sp. 3, chromosome pair 3 carries a distal NOR in the short arm, whereas in C. itambe, chromosome pair 11 showed a NOR pericentromerically in the short arm. NOR size heteromorphism was found in C. itambe and in one of the specimens of this species only one of the chromosomes of par 11 carried a NOR, while its homologue showed a large CMA3-positive and DAPI-negative heterochromatic band in the short arm. In Crossodactylodes sp. 3 and C. itambe, in situ hybridization of telomeric probes detected sites in the terminal regions of all chromosomes. The advance of cytogenetic studies in species of the genus Paratelmatobius allowed the recognition of the diploid number (2n=24) in Pa. gaigeae. In the karyotype of this species, a secondary constriction was observed in the short arm of both homologues of the pair 8, coinciding with the NORs revealed by the Ag-NOR method. Constitutive heterochromatin bands were revealed around the NOR and in all centromeric regions. In addition, the short arm of chromosome pair 6 proved to be totally heterochromic. The new cytogenetic data of Pa. gaigeae allowed inferring that the chromosome 8 which carries the NOR is homeologous to chromosome 10 of Pa. poecilogaster, chromosome 9 of Pa. segallai, chromosome 7 of Pa. cardosoi and chromosome 8 of Paratelmatobius sp. 2 and Paratelmatobius sp. 3. In addition, it was possible to infer loss of heterochromatin associated to NOR in the lineage that gave origin to Pa. poecilogaster. Despite the progress in the cytogenetic study of the subfamily Paratelmatobiinae, it is still not possible to infer chromosomal homeologies between the karyotypes of Crossodactylodes, Paratelmatobius and Scythrophrys Ver menos