Resumo: Os microrganismos estão se tornando cada vez mais tolerantes aos tratamentos convencionais, consequentemente aumentam-se os relatos de resistência. Inclusive das espécies de Candida, que apesar de estarem presentes na flora normal do organismo humano vêm causando diversos casos de infecções, sendo a levedura C. albicans uma das espécies de maior virulência. O uso de substâncias alternativas que auxiliem o tratamento contra esses microrganismos vem sendo mais exploradas. Em vista disso, as plantas medicinais que sempre foram utilizadas como forma de tratamento à diversas enfermidades, estão sendo cada vez mais estudadas. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a ação antifúngica e o efeito do extrato hidroalcoólico de Phyllanthus niruri (EH-Pn) contra 16 diferentes cepas de Candida spp., e o efeito nas etapas de formação do biofilme de Candida albicans ATCC MYA-2876, uma das cepas de maior virulência, também conhecida na literatura como Candida albicans SC5314 e a toxicidade do extrato em modelos in vitro e in vivo. A rasura da planta obtida foi processada até a obtenção do extrato hidroalcoólico de Phyllanthus niruri (EH-Pn) e analisado por Cromatografia gasosa com detector de espectrometria de massas (CG-EMS). A atividade microbiana de diferentes cepas de Candida foi determinada preliminarmente através do teste de difusão em ágar e posteriormente através da análise da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM). Os fatores de virulência, como a adesão à superfície, capacidade de formação de tubos germinativos, e de biofilme (2h e 24h) da cepa C. albicans (ATCC MYA-2876) foram avaliados com a presença do EH-Pn. Também foram realizadas por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET) para verificar a morfologia celular e de biofilme da cepa com a exposição ao EH-Pn. A toxicidade foi determinada através de ensaios com células de queratinócitos normais humanos (HaCaT) e com larvas de Galleria mellonela. Diversos compostos bioativos, como o éster etílico do ácido linoleico, éster etílico do ácido hexadecanóico, fitol e o beta-sitosterol, foram identificados no EH-Pn. O extrato apresentou atividade antifúngica contra todas as espécies de Candida analisadas. A adesão e formação de tubos germinativos de C. albicans (ATCC MYA-2876) foram significantemente reduzidas. O EH-Pn foi mais eficaz nos biofilmes em estágios iniciais do que em biofilmes com 24h de formação, observou-se alterações morfológicas externas e internas nas células fúngicas expostas ao EH-Pn. O tratamento com EH-Pn não demonstrou toxicidade para células HaCaT e com G. mellonella. O extrato hidroalcoólico de Phyllanthus niruri possui potencial como antifúngico Ver menos

Abstract: The microorganisms are becoming tolerant to some conventional treatments, consequently reports of resistance are increasing. Including the Candida species. Despite being present in the normal flora of the human organismo, it has been causing several cases of infections, the yeast C. albicans represents one of the most virulent species. The use of alternative substances that help treat microorganisms has been more explored. In view of this, medicinal plants that have always been used as a alternative to treatment for various diseases, are being increasingly studied. Therefote, this study aimed to evaluate the antifungal action of the hydroalcoholic extract of Phyllanthus niruri (HE-Pn) against 16 different strains of Candida spp., and the biofilm of Candida albicans ATCC MYA-2876, one of the most virulent strains, also known in literature as Candida albicans SC5314. The extract toxicity in vitro and in vivo models was also measured. The whole dried and crushed plant was boiled until obtaining the hydroalcoholic extract of Phyllanthus niruri (HE-Pn) and analyzed by CG-EMS. The microbial activity of different Candida strains was determined preliminarily through the Agar diffusion test and later through MIC and MFC analyses. Virulence factors, such as adhesion to the surface, germ-tube formation capacity, and biofilm (2h and 24h) of the strain C. albicans (ATCC MYA-2876) were evaluated with the presence of HE-Pn. Also, SEM was performed to evaluate the morphology while TEM was done to assess the strain cells' internal structures and biofilm morphology of the strain with exposure to EH-Pn. Toxicity was determined through assays with normal human keratinocyte cells (HaCaT) and with Galleria mellonela larvae. Several bioactive compounds, such as ethyl ester of linoleic acid, ethyl ester of hexadecanoic acid, phytol and beta-sitosterol, have been identified in the HE-Pn. The extract showed antifungal activity against all analyzed Candida species. The adhesion and formation of C. albicans germ tubes (ATCC MYA-2876) were significantly reduced. HE-Pn was more effective in the biofilms in early stages than in biofilms with 24 hours of formation. Morphological changes occurred in the external and internal parts of cells of this strain after exposed to HE-Pn. Treatment with HE-Pn did not demonstrate toxicity for HaCaT cells and with G. mellonella. Therefore, hydroalcoholic extract of Phyllanthus niruri has potential as an antifungal Ver menos