Resumo: Macrófagos são encontrados no estroma e epitélio prostático. Eles acumulam-se após a castração e estão associados, ao menos em parte, com a remoção de corpos apoptóticos das células epiteliais. Resultados anteriores mostraram que macrófagos M1 também se acumulam na próstata no terceiro dia após a castração. Neste trabalho, procuramos identificar se estes macrófagos se originam de monócitos circulantes. Além disto, procuramos caracterizar se células LNCaP produzem fatores solúveis capazes de levar à modulação do fenótipo de células Raw264.7, reproduzindo in vitro observações feitas in vivo. Os resultados mostraram que células CCR2-positivas acumulam-se na próstata após castração. Eles também mostraram que o meio condicionado por células LNCaP cultivadas na ausência de andrógenos induzem o fenótipo M1, caracterizado pela expressão de iNOS. Estas células apresentam mobilidade aumentada. O mesmo fenômeno acontece em co-culturas entre os dois tipos celulares, o que leva não somente à polarização M1, mas também ao aumento do número de células apoptóticas identificadas por caspase-9 ativada e pela reação de TUNEL. IL-15 ou IL-18 não levaram as células Raw264.7 à polarização M1. No conjunto, os resultados demonstram que uma subpopulação de macrófagos são capazes de induzir a morte de células epiteliais prostáticas após se diferenciarem em células M1, por sua vez causada fatores solúveis produzidos pelas células epiteliais na ausência de andrógenos Ver menos

Abstract: Macrofages are found in both stroma and epithelium of the prostate gland. These cells accumulate after castration and are associated with the removal of epithelial cell corpses. Previous results from the laboratory showed that M1-polarized macrophages also accumulate in the prostate in the third day after castration. In this work, we seeked at characterizing if these macrophages originate from circulating monocytes. Additionally, we used LNCaP and Raw264.7 cells in an attempt to reproduce part of the in vivo observations. The results showed that CCR2-positive cells acumulate in the prostate after castration. They also demonstrate that the conditioned medium obtained by cultivation of LNCaP cells in the absence of androgens induce the polarization of Raw264.7 cells into the M1-phenotype, as characterized by iNOS expression. These cells showed increased motibility in migration experiments. The same phenomenon happens in co-cultures of the two cell types, which led not only to the differentiation of the M1 phenotype, but also to an increase in the number of double-positive caspase-9/TUNEL cells. Neither IL-15 nor IL-18 were capable to differentiate Raw 264.7 cells into the M1 phenotype. Altogether, the results demonstrate that a macrophage subpopulation induces the apoptosis of epithelial cells after differentiation into the M1 phenotype, which is promoted by soluble factors produced by the epithelial cells in the absence of androgens Ver menos