Resumo: O sistema de interferon (IFN) é filogeneticamente antigo e desempenha papel essencial na resposta contra vírus, uma vez que ele é capaz de controlar a maioria das infecções virais, mesmo na ausência da imunidade adaptativa. Os fatores celulares que medeiam essa defesa são produtos de genes estimulados por Interferon (ISGs). Embora centenas de ISGs tenham sido identificados desde sua descoberta há mais de 25 anos, ainda não sabemos quais genes são essenciais para o controle de arbovírus emergentes brasileiros, como o vírus Oropouche (OROV). OROV é prevalente em toda região Amazônica, associado com quadros clínicos debilitantes, que podem variar desde quadros febris-exantemáticos até quadros graves, com acometimento neurológico. Assim, a compreensão das complexas interações entre OROV e seus hospedeiros serão cruciais para determinação dos fatores patogenéticos associados com o desenvolvimento de doenças graves, assim como para o desenvolvimento de estratégias de controle. Desse modo, analisamos o papel de 12 ISGs (IFIT1, IFITM1, IFIT2, IFITM2, IFIT3, IFITM3, IFIT5, ADAR, IRF1, LY6E, ISG20 e BST2) no controle da infecção por OROV a nível celular. Para isso, Citometria de Fluxo (FACS) foi aplicada para quantificar a taxa de infecção por OROV em células geneticamente modificadas que superexpressavam esses 12 ISGs. Para tanto, células de linhagem humana (HT1080) foram transduzidas com uma minibiblioteca de vetores lentivirais expressando ISGs e infectadas com OROV. Os dados demonstraram que alguns ISGs podem ser essenciais no controle do OROV, visto que a superexpressão desses genes diminuiu significantemente a taxa de infecção por esse vírus. Particularmente, LY6E apresentou resultados mais promissores, pois a inibição da infecção por OROV foi acompanhada do aumento significativo da expressão desse gene após transdução com o vetor lentiviral. Desta forma, esse estudo fornece a primeira evidência do papel de LY6E na restrição da replicação de OROV. Estudos mais aprofundados são necessários para entender o papel do produto desse gene e do polimorfismo inerente a ele no controle ou desenvolvimento de doença por esse importante arbovírus emergente brasileiro Ver menos

Abstract: The interferon (IFN) system is phylogenetically ancient and plays an essential role in response against viruses as it is able to control most viral infections, even in the absence of adaptive immunity. The cellular factors that mediate this defense are Interferon-stimulated gene products (ISGs). Although hundreds of ISGs have been identified since their discovery over 25 years ago, it is still unknown which of these genes are essential in controlling Brazilian emerging arboviruses such as Oropouche virus (OROV). OROV is prevalent throughout the Amazon region and it is associated with debilitating clinical conditions which may range from its febrile exanthematic form to more severe conditions such as neurological impairment. Thus, understanding the complex interactions between OROV and its hosts will be crucial for determining pathogenetic factors associated with the development of serious diseases, as well as for the development of control strategies. Therefore, we analyzed the role of 12 ISGs (IFIT1, IFITM1, IFIT2, IFITM2, IFIT3, IFITM3, IFIT5, ADAR, IRF1, LY6E, ISG20 and BST2) in controlling OROV infection at the cellular level. To this end, the Flow Cytometry (FACS) technique was applied to quantify OROV infection rates in genetically modified cells overexpressing each of these 12 ISGs. Human lineage cells (HT1080) were then transduced with a mini library of lentiviral vectors expressing ISGs and infected with OROV. The results showed that some ISGs may be essential in controlling OROV infection, since overexpression of one of these genes significantly decreased infection by the virus. Particularly, LY6E showed more promising results, as inhibition of OROV infection was accompanied by significant increase in expression of this gene after transduction with the lentiviral vector. Hence, this study provides the first evidence on the role of LY6E in restricting OROV replication. Further studies are needed to better understand the role of the product of this gene and its inherent polymorphism on controlling the progression of disease resulted from this important emerging Brazilian arbovirus Ver menos