Resumo: O baixo grau de eficácia das atuais terapias contra as lesões prostáticas proliferativas pode estar relacionado à modulação dos receptores de hormônios esteroides, aos mecanismos de reparo tecidual, à angiogênese e às espécies reativas de oxigênio. A natureza multifacetada do processo de angiogênese em neoplasias malignas sugere que a combinação de fármacos antiangiogênicos com agentes que modulem espécies pró e antioxidantes pode ser mais eficaz do que as terapias envolvendo um único agente. Neste cenário, destaca-se o PMAPA, um imunomodulator que abre uma nova perspectiva para o combate de alguns tipos de cânceres, incluindo o prostático. Neste trabalho, caracterizamos e comparamos os efeitos morfológicos e moleculares da terapia antiangiogênica com TNP470 associada ao imunomodulador PMAPA no tratamento de lesões prostáticas e buscamos estabelecer possíveis mecanismos de ação dessas terapias envolvendo fatores indutores e reparadores de lesão celular, receptores de hormônios sexuais esteroides, angiogênese e enzimas antioxidantes. Dos 25 ratos machos da linhagem Fischer 344 utilizados, 5 foram considerados controles e 20 receberam 15 mg/Kg de MNU na cápsula do lobo ventral prostático para indução das lesões prostáticas. Dos 20 animais, 5 receberam TNP470 (15mg/kg), subcutâneo, 3 vezes por semana durante 30 dias, 5 receberam PMAPA (5mg/kg) pela mesma via e período, 5 receberam TNP470 e PMAPA e outros 5 receberam salina. Após o tratamento, amostras do lobo ventral prostático de todos os animais foram coletadas, pesadas e normalizadas pelo peso corporal de cada animal e submetidas à análise histopatológica, à imunohistoquímica e ao Western Blotting. Nossos resultados demonstraram que nosso método de indução química de lesões prostáticas foi eficaz na promoção de lesões pré-malignas (PIN e PIA) e malignas (adenocarcinoma de graus baixo, intermediário e alto) em animais da linhagem Fischer 344, tornando-o um modelo adequado para ensaios de eficácia e toxicidade de novas perspectivas terapêuticas contra o câncer de próstata. Os fármacos PMAPA e TNP470 atuaram de modos diferentes em lesões pré-neoplásicas e neoplásicas e interferiram nas vias de reparo tecidual, do estresse oxidativo e da angiogênese e também nos níveis dos receptores hormonais. O PMAPA demonstrou significante atividade antitumoral contra o adenocarcinoma de grau intermediário e de alto grau e também foi eficaz contra a atrofia inflamatória proliferativa (PIA). A associação do PMAPA com o TNP470 foi a melhor abordagem terapêutica contra a PIN e contra a PIA, porém foi menos eficiente contra o adenocarcinoma prostático do que a terapia apenas com PMAPA Ver menos

Abstract: The low level of effectiveness of current therapies against proliferative prostatic lesions may be related to the modulation of steroid hormone receptors, tissue repair mechanisms, angiogenesis and reactive oxygen species formation. The multifaceted process of angiogenesis in malignant tumors suggests that the combination of drugs with antiangiogenic agents modulating pro and antioxidants species is more effective than single agent therapies. In this scenario, we highlight PMAPA, an immunomodulator which opens a new perspective to fight some types of cancers, including prostate cancer (PC). In the present study, we characterized and compared the morphological and molecular effects of antiangiogenic therapy combined with PMAPA immunotherapy in the treatment of prostatic lesions and seek to establish possible mechanisms of action of these therapies involving molecular factors of cell injury, sex hormone steroid receptors, angiogenesis and antioxidant enzymes. 25 male rats Fischer 344 were used. For induction of prostatic lesions, 20 animals received daily subcutaneous dose of 100mg/kg of testosterone cypionate and were anesthetized for instillation of 15 mg/kg of MNU in the prostate capsule of the ventral lobe, one every 15 days, totaling 2 doses. After the last dose of MNU, animals received subcutaneous injections of 5 mg/kg of testosterone cypionate every other day for 120 days. Other 5 animals were considered control. After induction, the animals were divided into 5 groups: control group: received subcutaneous injections of 5 ml/kg of 0.9% saline solution three times a week for 30 days; MNU group received subcutaneous injections of 5 ml/kg of 0.9% saline solution three times a week for 30 days; MNU+TNP470 group: received subcutaneous injections of 15 mg/kg of TNP470 three times a week for 30 days; MNU+PMAPA group: received subcutaneous injections of 5 mg/kg of PMAPA three times a week for 30 days and MNU+TNP470+PMAPA group: both treated with TNP470 and PMAPA. After 150 days, samples of prostate ventral lobe of all animals were collected, weighed and normalized by body weight of each animal and submitted to histopathology, immunohistochemistry and Western Blotting. Our results demonstrated that our chemical induction method of prostatic lesions was effective in the promotion of premalignant (PIN and PIA) and malignant (adenocarcinoma) lesions in Fischer 344 strain, making it a suitable model for trials of efficacy and toxicity of new therapeutic perspectives against PC. PMAPA and TNP470¿s effects were different on premalignant and malignant lesions and affected steroid hormone receptors levels and tissue repair, oxidative stress and angiogenesis pathways. PMAPA demonstrated significant antitumor activity against intermediate grade and high-grade adenocarcinomas and was also effective against proliferative inflammatory atrophy (PIA). The association of PMAPA with TNP470 was the best therapeutic approach against PIN and PIA, but was less effective against prostate adenocarcinoma than PMAPA alone Ver menos