115 registros encontrados - programa Programa de Pós-Graduação em Biociências e Tecnologia de Produtos Bioativos
Ramírez Rueda, Román Yesid, 1976-
TESE - Inglês
Número de chamada: T/UNICAMP R145i
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2020.
Assunto: Resistência microbiana a medicamentos
Resumo: Atualmente, a eficácia das moléculas usadas como antimicrobianos está diminuindo, devido à geração de cepas resistentes à múltiplas drogas...
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Resumo
Resumo: Atualmente, a eficácia das moléculas usadas como antimicrobianos está diminuindo, devido à geração de cepas resistentes à múltiplas drogas (MDR). As infecções causadas por bactérias MDR geram um grande aumento da morbidade, mortalidade e dos custos gerados pelos cuidados médicos. Em relação aos fungos, Candida é categorizada como o principal gênero de fungos relacionado às micoses resistentes aos agentes antifúngicos, como azois, equinocandinas e anfotericina B. Em relação as infecções causadas por parasitas, a esquistossomose mansoni é uma doença negligenciada, com ampla distribuição geográfica classificada como problema de saúde pública em alguns países não desenvolvidos. Apesar da eficácia relatada do praziquantel como primeira escolha para o tratamento, há relatos de resistência a esse fármaco no Egito e redução de sua susceptibilidade em outros países. Nesse contexto, devido à alta prevalência e ampla distribuição de processos infecciosos causados por bactérias/fungos MDR e Schistosoma mansoni, além da limitação de medicamentos efetivos para o tratamento dessas doenças, é necessário pesquisar novos recursos terapêuticos. Uma das opções mais viáveis e promissoras é o estudo de produtos naturais como fontes de novas moléculas bioativas e/ou fitomedicamentos. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito antimicrobiano in vitro de produtos orgânicos voláteis (POVs) contra bactérias/fungos MDR e duas cepas diferentes de S. mansoni com suscetibilidade reduzida in vitro ao praziquantel. O efeito biológico de 30 POVs selecionados aleatoriamente do banco de amostras do Laboratório de Princípios Ativos Orgânicos, Biociências e Biotecnologia associado ao Departamento de Biologia Vegetal do Instituto de Biologia da Universidade Estadual de Campinas (DBV-IB-UNICAMP) para a etapa de triagem, foram avaliados frente à organismos resistentes a medicamentos. As atividades antibacteriana e antifúngica foram avaliadas pelo método de microdiluição em caldo, determinando-se as concentrações inibitórias mínimas (CIM). A atividade anti-quorum sensing (anti-QS) foi também avaliada em Chromobacterium violaceum e Pseudomonas aeruginosa. A atividade anti-helmíntica foi estimada pela mortalidade de S. mansoni adultos. Os ensaios foram feitos em triplicata e os resultados foram comparados com os controles apropriados. Os POVs mais promissores (melhor efeito antimicrobiano) foram submetidos à estudos químicos realizando fracionamento, isolamento e identificação dos compostos ou frações ativos/as de pelo menos dois deles. Finalmente, a toxicidade aguda in vivo das melhores amostras bioativas foi avaliada usando o protocolo de Caenorhabditis elegans. As baixas CIMs, atividade anti-QS, potencial esquistossomicida e toxicidade aguda exibida por alguns dos POVs, suas frações e/ou compostos ativas/os indicam que podem ser considerados uma fonte promissora de moléculas com efeito inibitório sobre os micro-organismos MDR testados. 23% dos POVs inibiram as bactérias MDR, 30% a C. albicans MDR, 50% inibiram a produção de violaceína, 36,6% e 33% inibiram swarming e pioverdina, respectivamente, 70% apresentaram 100% de mortalidade (72 horas - 100 µg/mL) para a cepa BH de S. mansoni e 19% apresentaram ? 80% de mortalidade nas mesmas condições para a cepa SE. Embora as análises químicas realizadas aqui forneçam pistas importantes sobre os princípios ativos dos produtos naturais estudados, são necessárias investigações mais aprofundadas visando conhecer exatamente as moléculas responsáveis pelas atividades antimicrobianas observadas
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP AL87a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2016.
Assunto: Nanopartículas poliméricas
Resumo: A infecção do trato urinário (ITU) é uma afecção muito comum, caracterizada pela presença de microrganismos no sistema urinário. Tais...
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Resumo
Resumo: A infecção do trato urinário (ITU) é uma afecção muito comum, caracterizada pela presença de microrganismos no sistema urinário. Tais patologias são responsáveis por grande parte dos processos infecciosos adquiridos na comunidade e nos ambientes hospitalares. Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosas e Klebsiella pneumoniae são descritas na literatura como as principais responsáveis pelas causas de ITU. O uso indiscriminado dos antibióticos ao longo do tempo, fizeram com que os microorganismos patogênicos criassem mecanismos adaptativos de resistência à varias drogas existentes, tornando-se alvo de preocupação dos órgãos públicos de saúde, principalmente no que se diz respeito à ambientes hospitalares. Este trabalho terá como objetivo propor novas alternativas de tratamento para pacientes com ITU baseados em partículas poliméricas associadas a agentes antimicrobianos da classe das quinolonas. Tais partículas foram caracterizadas através das técnicas de Dinamic Light Scattering (Espalhamento Dinâmico de Luz), Nanoparticle Tracking Analysis (Análise de Rastreamento de Nanopartículas) e por Potencial Zeta. O perfil de dissolução e liberação dos sistemas obtidos foi avaliado pela técnica de difusão vertical in vitro em células de Franz. A avaliação biológica dos compostos foi avaliada através da técnica de Mínima Concentração Inibitória, utilizando bactérias isoladas de pacientes com ITU e por avaliação da citotoxicidade pelo Ensaio de Viabilidade Celular Através da Redução do MTT
Mourão, Layany Carolyny da Silva, 1984-
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP M865a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2017.
Assunto: Química vegetal
Resumo: O uso de plantas para fins medicinais apresenta vantagens que tornam a sua utilização muito atrativa, principalmente em países em...
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Resumo
Resumo: O uso de plantas para fins medicinais apresenta vantagens que tornam a sua utilização muito atrativa, principalmente em países em desenvolvimento. O desenvolvimento de compostos com ação anti-helmíntica ou antimicrobiana representa uma necessidade urgente, devido a alta prevalência de doenças infecciosas novas e reemergentes além da crescente resistência dos patógenos aos fármacos atuais. Nosso estudo teve como objetivo determinar a composição química e avaliar as atividades anti-helmíntica, antibacteriana e antifúngica de extratos, frações e compostos isolados das folhas de Manilkara zapota (L.) P. Royen (sapoti) e de Mimusops commersonii (G. Don) Engl (abricó-da-praia). Extratos etanólicos e frações iniciais das folhas de ambas as espécies foram preparados separadamente por turbolização. A purificação dos extratos para obtenção dos compostos isolados foi realizada por (1) filtração em coluna de poliamida e extração em fase sólida e (2) por cromatografia Flash seguido de separação por cromatografia preparativa. Essas etapas foram monitoradas por cromatografia em camada delgada e perfis analíticos obtidos por cromatografia líquida de alta eficiência. As técnicas de cromatografia a gás acoplada a detector seletivo de massas, rotação óptica, determinação de massa de alta resolução, e ressonância magnética nuclear de 1H e 13C uni e bidimensionais foram empregadas para identificação e elucidação estrutural dos compostos. A atividade anti-helmíntica contra Strongyloides venezuelensis foi avaliada a partir da sobrevida (%) de parasitas adultos (fêmeas partenogenéticas) expostos diretamente aos extratos, frações e compostos isolados O teste de atividade antimicrobiana (MIC) foi realizado frente aos patógenos Staphylococcus aureus, Candida albicans e Trichophyton rubrum. O extrato etanólico, a fração de maior polaridade, a fração enriquecida em compostos fenólicos, miricitrina e ácido clorogênico, oriundos de folhas de M. zapota mostraram potente ação anti-helmíntica na concentração de 200 ?g/mL, enquanto a fração de menor polaridade apresentou ação potente antibacteriana. O extrato e as frações iniciais foram potentes frente à C. albicans (16 ?g/mL). O composto 2 foi potente frente ao S. aureus e T. rubrum (8 e 16 ?g/mL ) Dos derivados de M. commersonii, a fração rica em compostos fenólicos (F2) apresentou melhor ação anti-helmíntica. O extrato etanólico e as frações iniciais apresentaram atividade promissora frente à C. albicans e S. aureus. O composto 3¿ apresentou atividade antibacteriana potente e o composto 5¿ foi potencialmente ativo frente à T. rubrum e S. aureus. Este é o primeiro relato sobre a identificação dos compostos ácido clorogênico, miricetina-3- glicosídeo, mearnsitrina, germanicol e seu acetato em folhas de M. zapota e de um norisoprenoide e quatro diferentes ácidos protobassicos em folhas de M. commersonii
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP C139a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2017.
Assunto: Aspergillus
Resumo: Como forma de diminuir o uso de energias de origem fóssil e aumentar a utilização de energias renováveis, há um grande incentivo mundial...
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Resumo
Resumo: Como forma de diminuir o uso de energias de origem fóssil e aumentar a utilização de energias renováveis, há um grande incentivo mundial recente no desenvolvimento de biorrefinarias, o que envolve processos de conversão integrada de biomassa vegetal e equipamentos para produção de energia, combustíveis e produtos químicos renováveis. Nesta perspectiva o etanol de segunda geração obtido a partir da conversão de biomassa vegetal lignocelulósica em açúcares fermentáveis tem sido foco de muitas pesquisas atualmente a fim de viabilizar seu uso. No entanto, devido à natureza recalcitrante da biomassa lignocelulósica, o custo de processamento corrente na produção de biocombustíveis se torna um importante gargalo a ser superado. Uma das formas de superar este problema é melhorar a produção de enzimas necessárias na etapa de hidrólise enzimática da biomassa vegetal, um processo ainda hoje considerado muito caro. Os fungos filamentosos se destacam na produção e secreção de enzimas lignocelulolíticas de forma homóloga e heteróloga, entretanto pouco se sabe sobre a regulação dos mecanismos de secreção de proteínas nestes microrganismos. Pensando nisso, a utilização do fungo filamentoso modelo Aspergillus nidulans se torna um importante recurso de estudos por ser geneticamente bem caracterizado. Nosso objetivo neste trabalho foi realizar a análise comparativa dos mecanismos de secreção de diferentes proteínas heterólogas em A. nidulans a partir de dados de transcriptoma gerados pela técnica de RNA-seq (Next Generation RNA sequencing). Para monitorar o processo de secreção, adotamos 3 genes alvo: alfa-arabinofuranosidase GH51 (AbfA) e beta-glucosidase GH3 (BglC) de A. fumigatus, e mananase GH5 termofílica (1542) de Thermotoga petrophila. Estes genes foram transformados em A. nidulans, sendo que para AbfA atingiu-se altos níveis de secreção, diferente de BglC e 1542, onde os níveis de secreção foram mínimos. Com isso foram definidos perfis transcriptômicos dos genes relacionados a secreção de proteínas em A. nidulans, representando a resposta da super expressão de três genes heterólogos em diferentes tempos de indução. Em geral houveram processos biológicos super-regulados relacionados principalmente ao metabolismo, proteínas com função ligante, transporte e defesa celulares. Além disso, foram identificados 17 genes diferencialmente expressos envolvidos diretamente com a via de secreção de A. nidulans, representando importantes alvos para manipulação genética deste organismo. Este foi o primeiro estudo que descreve a resposta transcriptômica da secreção de proteínas heterólogas em A. nidulans, gerando uma nova perspectiva ao comparar três diferentes proteínas heterólogas com níveis crescentes de secreção
Lopez, Begoña Gimenez-Cassina, 1984-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP L881a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2014.
Assunto: Própolis vermelha
Resumo: A palavra própolis tem origem Grega: pro significa em defensa de, e polis significa comunidade. A própolis é usada pelas abelhas para...
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Resumo
Resumo: A palavra própolis tem origem Grega: pro significa em defensa de, e polis significa comunidade. A própolis é usada pelas abelhas para fortalecer as paredes da colmeia e para cobrir as paredes internas e por devido a sua atividade antimicrobiana. A composição química da própolis é variável segundo a biodiversidade e a origem geográfica. A própolis vermelha, encontrada no nordeste e norte do Brasil, apresenta promissoras atividades biológicas: atividade antimicrobiana, antiparasitária, antioxidante, citotóxica, antiinflamatória, analgésica, efeitos antiobesidade, contra psoríase e hepatoprotetores. A composição química da própolis vermelha, relatada na literatura, parece variar qualitativa e quantitativamente, inclusive entre amostras coletadas na mesma região. Isto pode ser devido a variações sazonais, a flora direitamente ao redor das colméias ou aos métodos de análise. A maioria das classes de substâncias já identificadas pode ser analisada adequadamente por espectrometria de massas com ionização por eletrospray e cromatografia líquida. Os constituintes de média e alta polaridade (como fenólicos, flavonóides e benzofenonas) são responsáveis por muitas das atividades biológicas reportadas à própolis vermelha. A cromatografia líquida de ultra-eficiência acoplada à espectrometria de massas (UHPLC-MS) é um método moderno, rápido e sensível. Permite avaliar os perfis químicos das amostras e determinar sua composição qualitativamente, comparando os espectros de massas (MS/MS) dos componentes das amostras com informações na literatura. Portanto UHPLC-MS é a ferramenta mais adequada para a avaliação da composição de matrizes complexas como a própolis. A comparação do perfil químico de diversas amostras de própolis vermelha brasileira e a avaliação de sua atividade antimicrobiana e antioxidante permitirá identificar substâncias que possam estar contribuindo para sua bioatividade, e levar á identificação de marcadores químicos para o controle de qualidade destas amostras, bem como possibilitará definir se há um ou vários tipos de própolis vermelha
BCCL (1)
Análise por UHPLC-MS de acetato de octreotida e seus produtos de degradação
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP R147a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2016.
Assunto: Acetato de octreotida
Resumo: O insumo farmacêutico ativo acetato de octreotida é um análogo octapeptídeo da somatostatina, apresentando efeitos farmacológicos similares...
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Resumo
Resumo: O insumo farmacêutico ativo acetato de octreotida é um análogo octapeptídeo da somatostatina, apresentando efeitos farmacológicos similares aos do hormônio natural, porém, com maior potência e duração de ação consideravelmente prolongada. O fármaco inibe a secreção do hormônio de crescimento e de outros hormônios e peptídeos produzidos pelo sistema endócrino gastroenteropancreático, sendo utilizado como princípio ativo de medicamentos indicados principalmente para o tratamento da acromegalia. O desenvolvimento de medicamentos com o acetato de octreotida é comercialmente interessante para a indústria farmacêutica brasileira, sendo que a matéria-prima deve apresentar adequado teor e quantidade de impurezas dentro dos limites aceitáveis. Como não há monografias oficiais para o fármaco nas principais farmacopeias de referência, um procedimento analítico para determinar o teor de octreotida na matéria-prima em solução foi desenvolvido usando cromatografia líquida de ultra-alta eficiência acoplada à espectrometria de massas (UHPLC-MS) com ionização por eletrospray em modo positivo. O método foi validado conforme parâmetros recomendados pela ANVISA, sendo considerado aprovado nos parâmetros de especificidade, linearidade, exatidão, precisão e precisão intermediária. O método analítico estabelecido também foi utilizado para avaliar o teor de octreotida e detectar a formação de produtos de degradação em estudos de degradação forçada do fármaco (avaliando-se os efeitos da temperatura, umidade, oxidação, exposição fotolítica, íons metálicos e diferentes valores de pH sobre a octreotida) e de estabilidade acelerada, os quais foram realizados com amostras do fármaco mantidas por 6 meses em câmaras com temperatura controlada (à 23 ºC, 5 ºC e -20 ºC). O principal composto de degradação da octreotida descrito pela literatura, [des-Thr-ol8]-Octreotide (TRR 1,13 e m/z 467,5), e a impureza de síntese/degradação [L-Phe1]-Octreotide (TRR 1,58 e m/z 510,5) foram identificados de maneira inequívoca nas amostras. Dessa maneira, concluiu-se que o procedimento proposto para a análise pode ser aplicado na rotina, pois apresentou adequada separação cromatográfica tanto para o pico da octreotida quanto para os picos das impurezas de degradação em tais estudos
Lopez, Begoña Gimenez-Cassina, 1984-
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP L881a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2017.
Assunto: Própolis vermelha
Resumo: A própolis vermelha é um produto apícola resinoso típico dos estados do nordeste do Brasil. A composição da própolis varia bastante segundo a...
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Resumo
Resumo: A própolis vermelha é um produto apícola resinoso típico dos estados do nordeste do Brasil. A composição da própolis varia bastante segundo a sua origem botânica e geográfica, e também segundo o tipo de abelha envolvida no processo de coleta. A própolis vermelha de Alagoas possui indicação de origem geográfica, embora esta resina colorida também é produzida em outras regiões do nordeste do Brasil, e possui promissoras atividades biológicas como antimicrobiana, antioxidante e citotóxica entre outras. Desta forma, foi realizado um desenho experimental com o intuito de se identificar potenciais compostos bioativos. Posteriormente foi feito o desenvolvimento do método de isolamento por cromatografia contracorrente (CCC) e o scale-up do método, obtendo-se assim frações e compostos isolados. A purificação das frações foi feita por HPLC preparativa e a identificação foi feita por espectrometria de massas de alta resolução (QTOF). Por outro lado, existem vários fatores que podem afetar a sua composição, é necessário que exista uma padronização da sua composição devido ao uso popular da própolis. Para tanto, foi desenvolvido e validado um método analítico para identificar e quantificar nove compostos presentes na própolis vermelha (formononetina, pinocembrina, liquiritigenina, isoliquiritigenina, daidzeina, biochanina A, C38H50O6, C17H18O4 e C32H27O7) sendo usados também os compostos isolados desta resina. A identificação e quantificação destas substâncias foi feita em vinte e uma amostras de própolis vermelha de Alagoas, Bahia, Paraiba e Sergipe, junto com duas amostras de Dalbergia ecastophyllym (a sua origem vegetal) de Paraiba e Brasilia, assim como dez amostras de Sergipe coletadas ao longo do ano para verificar a variabilidade da composição da própolis vermelha. A atividade antioxidante e antimicrobiana dos compostos isolados foi avaliada, assim como a ação sinérgica destes compostos. Neste trabalho foi possível desenvolver um método de isolamento por CCC, foram isolados três compostos (C38H50O6, C17H18O4 e C32H27O7). Foi desenvolvido e validado um método analítico aplicado a amostras de própolis vermelhas de diferentes estados do nordeste do Brasil, sendo observada uma variabilidade da composição nas amostras da mesma região assim como amostras de regiões diferentes. Também foi avaliada a variabilidade sazonal das amostras de Sergipe, sendo que o mês de março foi o que menor teor dos compostos avaliados apresentou. Finalmente, foi demostrado que todos os compostos testados são bioativos (formononetina, pinocembrina, liquiritigenina, isoliquiritigenina, daidzeina, biochanina A, C38H50O6, 7-o-metilvestitol e retusapurpurin A), e foi observada uma ação sinérgica deles na atividade antimicrobiana e antioxidante
Pasquali, Camila Cristina, 1989-
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP P264a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2017.
Assunto: Glutaminase
Resumo: Com base na detecção de atividade e inibição enzimática tecido-específica por produtos de catálise, Hans Krebs demonstrou pioneiramente a...
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Resumo
Resumo: Com base na detecção de atividade e inibição enzimática tecido-específica por produtos de catálise, Hans Krebs demonstrou pioneiramente a existência de múltiplas glutaminases em mamíferos. Atualmente, são conhecidos dois genes humanos que codificam para pelo menos quatro isoformas de glutaminases. Neste trabalho, nós investigamos a origem e evolução de glutaminases. Com base na construção filogenética, propusemos que a arquitetura multidomínios de glutaminases é uma característica herdada de ancestrais bacterianos. Também propusemos um modelo evolutivo no qual o surgimento da isoforma mais ativa, glutaminase C (GAC), foi um evento tardio de retrotransposição, ocorrido em Chondrichthyes. As repetições de anquirina (ANK) foram adquiridas no início do processo evolutivo. Para obter informações a respeito do enovelamento do domínio ANK, resolvemos a estrutura cristalográfica da porção C-terminal de kidney-type glutaminase (KGA). Além disso, resolvemos a estrutura cristalina de KGA completa, contendo os três domínios N-terminal, catalítico e C-terminal. Estas estruturas explicam a capacidade reduzida desta isoforma em formar filamentos supra-tetraméricos cataliticamente ativos previamente observados em GAC. Considerando a presença de motivos de interação proteína-proteína, como ANK e Nuclear Receptor (NR) boxes, investigamos a interação de KGA com outras proteínas. O Receptor Ativado por Proliferadores de Peroxissomo gama (PPAR?) já havia sido identificado em nosso grupo como parceiro de KGA por duplo-híbrido em levedura. Neste trabalho, determinamos que o domínio de ligação aos ligantes de PPAR? e os domínios N-terminal e catalítico de KGA são suficientes para a interação. KGA apresentou afinidade relativamente baixa com o receptor, com constantes de dissociação aparentes da ordem de micromolar, indicativo de interação fraca e transiente. A superexpressão de KGA resultou em aumento na atividade transcricional de PPAR?, tanto em célula não tumoral (HEK-293T) quanto tumoral (MDA-MB-436). Coletivamente, estes resultados contribuem para o entendimento das diferenças entre as múltiplas glutaminases de mamíferos, podendo auxiliar no desenho de inibidores isoforma-específicos para o tratamento do câncer e de outras doenças
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP R354a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2018.
Assunto: Descoberta de drogas
Resumo: A tuberculose ainda é classificada entre as três doenças infecciosas mais alarmantes, devido ao seu elevado índice de mortalidade, longo...
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Resumo
Resumo: A tuberculose ainda é classificada entre as três doenças infecciosas mais alarmantes, devido ao seu elevado índice de mortalidade, longo período de tratamento, prevalência de cepas resistentes aos medicamentos em uso e a associação com o HIV. Iniciativas integradas do setor privado e público são fundamentais para o desenvolvimento de novas terapias que amenizem os efeitos adversos relacionados com o tratamento atual da tuberculose. Para isso, uma estratégia é o desenvolvimento de inibidores contra enzimas do agente infeccioso que, mesmo conservadas em humanos, apresentam peculiaridades que possam ser exploradas na busca por especificidade. A via de síntese de folatos apresenta esses tipos de enzimas, e fármacos que inibem algumas delas são utilizados há décadas para o tratamento de infecções diversas, não havendo inibidores eficazes para esta via no tratamento da tuberculose. Neste trabalho, foi aplicada a técnica de desenho de fármacos baseado em fragmentos (FBDD) para a identificação de moléculas simples com possibilidade de serem modificadas quimicamente para a geração de inibidores contra a enzima dihidrofolato redutase da via de folatos em Mycobacterium tuberculosis (MtDHFR). Assim, esses fragmentos foram submetidos a uma série de técnicas biofísicas e cristalográficas que foram capazes de caracterizar a interação destes com a enzima. Essa caracterização baseou-se na identificação de grupos químicos presente nos fragmentos relevantes para a interação, na quantificação de afinidades e no comportamento energético das interações, no modo de ligação com a identificação de regiões específicas do sítio ativo onde essas interações aconteciam e no planejamento racional baseado em estrutura das possibilidades de exploração química de novas regiões do sítio ativo. Com isso, foram atingidas as etapas características de FBDD, isto é, fase de triagem e identificação de hits, fase de caracterização das interações realizadas por essas moléculas e fase de otimização química, que visa à obtenção de compostos líderes, com potencial a se tornarem novos fármacos. Este trabalho também permitiu a realização da fase iterativa de otimização que, em ação conjunta com especialistas da área de Química Medicinal, possibilitou a identificação, por catálogo SAR, de novos compostos análogos aos fragmentos caracterizados inicialmente. Esses compostos tiveram um ganho considerável de afinidade com a enzima e foram considerados como pontos de partida para a obtenção de novos compostos líderes
Esteves, Cibele Zanardi, 1985-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP Es85a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2014.
Assunto: Biologia molecular
Resumo: Neisseria meningitidis, bactéria aeróbica Gram negativa, causa infecções meningocócicas que podem resultar em doenças severas incluindo...
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Resumo
Resumo: Neisseria meningitidis, bactéria aeróbica Gram negativa, causa infecções meningocócicas que podem resultar em doenças severas incluindo meningite meningocócica, sepsis e morte. Uma vez que a administração precoce de antibióticos está relacionada às baixas taxas de morbidade e mortalidade, é de crucial importância iniciar o tratamento o mais rápido possível. A administração de antibióticos aos pacientes com suspeita de infecções meningocócicas antes da coleta de material biológico tem sido uma prática comum que pode prejudicar o diagnóstico microbiológico por cultura bacteriana. A abordagem nos últimos anos tem sido o desenvolvimento de técnicas alternativas que possam ser utilizadas para se obter o diagnóstico etiológico. Técnicas de biologia molecular, como a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) tem sido desenvolvidas para melhorar a sensibilidade e especificidade da detecção de microorganismo e aliadas a Nanotecnologia podem ser úteis para desenvolvimento de métodos alternativos de diagnóstico. Foi padronizada PCR para N. meningitidis ATCC 23247 Sorogrupo B com a utilização de primers do gene synD, através de gradiente de MgCl2. Também foi determinado o Limite de Detecção (LD) de DNA da PCR. Então a reação foi adjuvada com nanopartículas de sílica mesoposa SAB-15 e SBA-16. Não houve aumento do LD de DNA nas concentrações de nanopartículas testadas. Também foi realizado estudo entre a interação do DNA e SBA-15 e SBA-16 através de Gel Retardo e Dicroísmo Circular. Resultados sugerem interação fraca entre DNA e estas nanopartículas. Desta forma conclui-se que nanopartículas SBA-15 e SBA-16 não possuem interação com DNA a ponto de melhorar seu LD, não sendo úteis, nas concentrações testadas, para o desenvolvimento de métodos diagnósticos mais sensíveis
BCCL (1)
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP N312a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2020.
Assunto: Proteômica
Resumo: A leishmaniose é uma doença parasitária que apresenta várias formas clínicas (cutânea, mucocutânea e visceral) dependendo da espécie do...
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Resumo
Resumo: A leishmaniose é uma doença parasitária que apresenta várias formas clínicas (cutânea, mucocutânea e visceral) dependendo da espécie do protozoário "Leishmania" que causa a infecção e da resposta imune do hospedeiro. "Leishmania spp." necessitam da célula do hospedeiro para completar seu ciclo biológico, principalmente de fagócitos mononucleares. A forma como a interação Leishmania-célula hospedeira acontece é pouco esclarecida, porém, essencial para o desenvolvimento de medidas de controle da infecção como o tratamento e a vacinação. O presente trabalho utiliza das aplicações de imageamento, proteômica e lipidômica por espectrometria de massas (MS) para a análise da alteração de proteínas e lipídeos em hospedeiro após a infeção por "Leishmania amazonensis" e "L. major", agentes etiológicos da forma cutânea da doença e, "L. infantum"¸ agente etiológico da forma visceral. Primeiramente, foi realizada a aplicação da técnica de imageamento por MS para o estudo da distribuição espacial de proteínas em lesões de camundongos após diferentes tempos de infecção com "L. amazonensis" e "L.major". Nossos resultados revelaram o potencial da aplicação de imageamento por MS como ferramenta de diagnóstico e de descoberta de candidatos a biomarcadores para leishmaniose cutânea. Em seguida, foram realizadas as análises de proteômica por MS com o intuito de identificar e quantificar a alteração de proteínas em macrófagos e, em lesões cutâneas de camundongos após infecção por "Leishmania spp". Por fim, a lipidômica por MS foi aplicada para analisar alterações de lipídeos em macrófagos infectados por "L. amazonensis" ou "L. infantum" que possam estar envolvidos no processo de visceralização da doença. Em resumo, a quantificação relativa da alteração de proteínas e lipídeos em hospedeiro após a infecção por "Leishmania spp". revelou candidatos a seres investigados como alvos terapêuticos e biomarcadores em potencial assim como auxiliares para o entendimento sobre os mecanismos fisiopatológicos da leishmaniose
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP P649i
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2014.
Assunto: Atenção farmacêutica
Resumo: O Carcinoma espinocelular de cabeça e pescoço (CECP) é um dos cânceres mais comuns em todo o mundo, sendo classificado como a oitava causa de...
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Resumo
Resumo: O Carcinoma espinocelular de cabeça e pescoço (CECP) é um dos cânceres mais comuns em todo o mundo, sendo classificado como a oitava causa de morte por câncer. As taxas de incidência do CECP estão aumentando em todo o mundo, no Brasil o câncer de cavidade oral ocupa o quinto lugar geral entre a população masculina. O tabagismo, o alcoolismo e a infecção pelo vírus Human papilomavirus (HPV) são importantes fatores de risco para o desenvolvimento do CECP. O protocolo de tratamento para este tipo de câncer é a associação de radioterapia e quimioterapia com cisplatina. Indivíduos tratados com cisplatina são suscetíveis a nefrotoxicidade, vômito grave, neurotoxicidade, ototoxicidade, gastrotoxicidade, mielossupressão e reações alérgicas, bem como no tratamento radioterápico estão sujeitos à mucosite. Em tratamentos tão agressivos como este, o profissional farmacêutico pode contribuir significativamente para a adesão do paciente ao tratamento através da atenção farmacêutica e da farmácia clínica, atuando para a garantia da segurança e da qualidade do tratamento. O objetivo do estudo foi estudar os problemas farmacoterapêuticos (PFTs) e realizar intervenções farmacêuticas (IFs) junto aos indivíduos com câncer de cabeça e pescoço, em tratamento com cisplatina, no Ambulatório de Oncologia Clínica do HC/UNICAMP. O estudo foi prospectivo, longitudinal, intervencionista, amostra consecutiva, com duração de 18 meses. Foram incluídos no estudo os indivíduos maiores de 18 anos, que assinaram o termo de consentimento livre e esclarecido, com diagnóstico de CECP, que receberam como conduta terapêutica radioterapia e quimioterapia à base de cisplatina concomitantemente. O acompanhamento farmacoterapêutico foi realizado por meio de levantamento dos PFTs e das IFs, até o final do tratamento quimioterápico baseado no Método Pharmacotherapy Workup. Foram avaliadas a adesão aos medicamentos antieméticos utilizados para o tratamento antineoplásico através do questionário de adesão Morisky & Grenn e a qualidade de vida dos pacientes com o questionário de avaliação de qualidade de vida da Universidade de Washington (UW-QoL). Foram incluídos 95 indivíduos, destes, 65 foram excluídos e 33 pacientes mantiveram-se até o final do estudo. A maioria dos indivíduos são homens brancos, com média de idade de 54,2 anos, casados, afastados do trabalho por causa do tumor, tabagistas moderados e etilistas acentuados. A maior parte dos pacientes apresentou câncer de faringe, estadiamento de T4N2M0, estádio IV. O uso de sonda e traqueostomia aumentou durante o tratamento. Foram encontrados 0,8 PFTs potenciais/indivíduo, 8,5 PFTs reais/indivíduo, 35,8 IFs de prevenção/paciente e 2,4 IFs de resolução/paciente. A maioria dos indivíduos teve alta adesão na avaliação de uso dos antieméticos. Na avaliação de qualidade de vida muitos domínios foram diminuindo ao longo do tratamento, tais como humor e paladar. O perfil encontrado condiz com a literatura, ressaltando que este estudo foi pioneiro na quantificação de PFTs e IFs relacionados a este grupo de pacientes. Este estudo sugere que a atenção farmacêutica na forma de acompanhamento farmacoterapêutico traz benefícios significativos para a saúde dos indivíduos com CECP
BCCL (1)
TESE - Inglês
Número de chamada: T/UNICAMP C837a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2019.
Assunto: Ciclodextrinas
Resumo: Os anestésicos locais (AL) são imprescindíveis na prática médica, porém eles não permitem bloqueio seletivo das fibras nociceptivas e falham...
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Resumo
Resumo: Os anestésicos locais (AL) são imprescindíveis na prática médica, porém eles não permitem bloqueio seletivo das fibras nociceptivas e falham em anestesiar tecidos inflamados. A capsaicina (CAP) é um composto pouco hidrossolúvel utilizado como analgésico. Há relatos na literatura de que a injeção de AL seguida de CAP leva a diminuição do bloqueio motor, em animais. Os AL e CAP são também utilizados individualmente, em formulações tópicas, para tratamento da dor crônica. Esta tese relata pela primeira vez o efeito analgésico de uma associação medicamentosa entre AL e CAP em tecido inflamado e, também, descreve o desenvolvimento de uma formulação tópica dos mesmos. Na parte 1 da tese, a CAP foi complexada com HP-ß-ciclodextrina, aumentando sua solubilidade aquosa em 20 vezes. Esse complexo foi liofilizado com ciclo otimizado e caracterizado por Calorimetria Diferencial de varredura, Difração de Raios-X e microscopia eletrônica de varredura. Essas técnicas forneceram evidências da complexação entre a ciclodextrina e CAP, enquanto a Ressonância Magnética Nuclear (RMN) comprovou a formação de complexo de inclusão. O liofilizado (ressuspenso em solução contendo o AL mepivacaina) foi administrado em camundongos, resultando em diminuição do bloqueio motor do nervo ciático e, em outro teste, aumento significativo da anestesia em tecido inflamado. A parte 2 da tese relata o desenvolvimento de uma nova formulação contendo exclusivamente CAP e o AL lidocaína (LDC). A mistura equimolar dos fármacos produziu um sistema líquido à temperatura ambiente, com padrão amorfo relatado por Difração de Raios-X. A espectroscopia de infra-vermelho indicou interação intermolecular entre os compostos, confirmada por medidas de RMN. Esta técnica indicou formação de ponte de hidrogênio intermolecular, entre os grupos carbonila (CAP) e amida (LDC), o que explica a redução da temperatura de fusão dos componentes, para abaixo de 25 °C, caracterizando uma mistura eutética profunda. A mistura [LDC]1[CAP]1 revelou-se altamente estável e aumentou a lipofilicidade dos fármacos, característica que pode ser útil para maior permeação dos mesmos na pele. Ambas partes desta tese geraram resultados promissores para futura aplicação clínica da associação medicamentosa entre AL e CAP. Na Parte 1, foi obtida uma formulação parenteral que possibilitou atingir efeito desejável de anestesia, apesar da condição de inflamação. Na Parte 2, o estudo de pré-formulação revelou uma nova alternativa de medicação tópica para o tratamento da dor neuropática
Pereira, Carla Costa e Silva Scarpa, 1981-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP P414a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2016.
Assunto: Cubebina
Resumo: A Piper cubeba é uma especiaria bastante consumida na Europa que possui diversas moléculas bioativas, dentre elas uma lignana chamada...
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Resumo
Resumo: A Piper cubeba é uma especiaria bastante consumida na Europa que possui diversas moléculas bioativas, dentre elas uma lignana chamada cubebina. A cubebina possui várias atividades biológicas conhecidas, como atividade analgésica e antiinflamatória, atividade tripanocida, anti leishmania e atividade antitumoral. O objetivo principal deste estudo foi avaliar a atividade "in vitro" da cubebina em diferentes linhagens tumorais humanas e avaliar a sua atividade "in vivo" em um modelo de neoplasia experimental transplantável, o tumor de Ehrlich. A cubebina, isolada a partir do extrato etanólico bruto de Piper cubeba, foi devidamente caracterizada por análises de infravermelho, RMN, espectrometria de massas, DSC, TGA, análise elementar e solvente residual. Posteriormente, o doseamento da cubebina no extrato foi realizado por UPLC/MS, chegando à concentração de 10%. A atividade antitumoral da cubebina foi avaliada "in vitro" em 8 diferentes linhagens tumorais humanas e observou-se que a cubebina produziu inibição do crescimento. A cubebina apresentou GI50 ? 30 µg/mL para as linhagens U251 (glioma, SNC), 786-0 (rim), PC-3 (próstata), HT-29 (colorretal). Para a linhagem K562 (leucemia), a cubebina apresentou GI50 ? a 4,0 µg/mL. Para as demais linhagens, MCF-7 (mama) e NCI-H460 a cubebina pode ser considerada inativa, pois GI50 > 250 µg/mL. Analisando o índice de seletividade para a cubebina pode-se observar uma alta seletividade da cubebina para a linhagem K562 (leucemia). A cubebina foi avaliada em um modelo de neoplasia experimental transplantável, o tumor sólido de Ehrlich. O tratamento com cubebina foi realizado nas doses de 12,5; 25 e 50 mg/Kg por via oral. A cubebina não demonstrou nenhuma toxicidade. Em relação ao tumor, não foi observada diferença estatística significativa entre o controle negativo e o positivo utilizados no estudo, o que impossibilita uma avaliação fidedigna do resultado. A diferença significativa entre os grupos foi avaliada por ANOVA seguido de teste post hoc de Tukey usando o software GraphPad Prism 5.0. Valores de P<0,05 foram considerados significativos. Assim, o estudo visa contribuir com o melhoramento da qualidade de vida de pacientes portadores de câncer, através do desenvolvimento de fármacos eficazes com potência clínica elevada e efeitos colaterais reduzidos
Melo, Lucilia Vilela de, 1984-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP M491a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2013.
Assunto: Mikania laevigata
Resumo: No Brasil, as espécies Mikania glomerata e Mikania laevigata, conhecidas popularmente como guaco, são muito utilizadas na forma de xarope...
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Resumo: No Brasil, as espécies Mikania glomerata e Mikania laevigata, conhecidas popularmente como guaco, são muito utilizadas na forma de xarope devido ao seu efeito broncodilatador. A comercialização de medicamentos fitoterápicos no Brasil é regida por diversas legislações que primam pela qualidade destes, porém a qualidade da matéria-prima pode interferir de forma fundamental na segurança e eficácia do medicamento. Diante disso, este trabalho realizou um estudo de estabilidade do extrato hidroalcoólico das espécies citadas, conforme preconiza o "Guia para a realização de estudos de estabilidade de medicamentos" publicado pela ANVISA na RE 01, de 29 de julho de 2005. Folhas das duas espécies de Mikania foram secas em estufa a 40 °C e em liofilizador, foram preparados extratos hidroalcoólicos por maceração, que foram submetidos a estudo de estabilidade acelerado por 6 meses, e estudo de estabilidade de longa duração por 12 meses. As amostras ficaram armazenadas em diferentes temperaturas (22°C, 30°C e 40°C), com e sem incidência de luz, e a cada 3 meses foram analisadas por UHPLC-MS, para acompanhar seu perfil químico, quantificar a cumarina e ácido clorogênico. Em todas as condições do estudo, observou-se uma redução do teor do marcador químico desta espécie, a cumarina, maior que 5 %, sendo assim, não é possível atribuir o prazo de validade de 2 anos para extratos hidroalcoólicos desta espécie
BCCL (1)
Sousa, Ilza Maria de Oliveira, 1963-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP So85a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2013.
Assunto: Arrabidaea chica
Resumo: Arrabidaea chica (Humb. & Bonpl.) Verlot, popularmente conhecida como crajiru, espécie presente na lista de plantas medicinais de interesse ao...
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Resumo: Arrabidaea chica (Humb. & Bonpl.) Verlot, popularmente conhecida como crajiru, espécie presente na lista de plantas medicinais de interesse ao SUS (Renisus) para o uso popular em enfermidades da pele. Estudos desenvolvidos no CPQBA-Unicamp comprovaram que o extrato bruto de A. chica possui ação cicatrizante induzindo a proliferação de fibroblastos in vitro, estimulando a síntese de colágeno in vivo e in vitro. Este estudo estabeleceu parâmetros para permitir a produção de um medicamento à base de A. chica em escala semi piloto, além de determinar condições adequadas de armazenamento, secagem e embalagem do produto final. Entre os compostos sensíveis à luz e à temperatura destaca-se a carajurina, que é responsável pela cor vermelha do extrato. A fim de aumentar a tempo de prateleira do produto microencapsulado por spray drying, utilizaram-se três materiais de parede: goma arábica (GA), goma de cajueiro (CG), e a mistura de goma arábica / maltodextrina (GM) na proporção de 1/1. Os diferentes materiais de parede apresentaram rendimentos de 82; 79 e 89,9% e teor de carajurina de 1,92%, 1 62% e 1,99%, respectivamente. Atividade antioxidante medida pelo método ORAC apresentou valores 1066,9, 1363,8 e 1026,2 uM TE / g. Os estudos de estabilidade foram realizados com extrato livre e microencapsulado armazenados em diferentes embalagens e condições. O produto armazenado a 40 ° C e 75% UR embalado em frascos de polietileno de alta densidade e saches cor de alumínio revestido de plástico diminuiu o teor de carajiruna em 10% em 20 dias de avaliação, enquanto que a embalagem de vidro foi mais estável nessas condições, diminuindo10% do conteúdo de carajiruna após 29 dias de teste. A maior meia-vida do produto microencapsulado foi de 160 dias, armazenado em saches e mantidos a 10 ° C. Todas as formulações semissólidas, avaliadas em modelos experimentais de cicatrização in vivo, foram capazes de reduzir entre 70 a 80% da área cutânea ulcerada em 10 dias de tratamento, contra 37% de redução do grupo controle no mesmo período. A estimulação da produção de colágeno para a formulação gel de Natrosol® contendo o extrato bruto livre foi de 0,093 ?g.mL-1, quando comparada com outras formulações de controle (0,019 ?g.mL-1) e bases (0,028 ?g.mL-1)
BCCL (1)
Cassago, Carolina Aparecida de Guzzi, 1976-
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP C27a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2016.
Assunto: Glutaminase
Resumo: Os processos celulares são largamente mediados pela interação entre proteínas. Além disso, interações da mesma proteína com diferentes...
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Resumo
Resumo: Os processos celulares são largamente mediados pela interação entre proteínas. Além disso, interações da mesma proteína com diferentes parceiros podem levar a respostas de natureza distinta na célula, muitas vezes envolvendo processos antes não previstos para a mesma. A enzima glutaminase é responsável pela conversão de glutamina em glutamato reabastecendo o ciclo do ácido tricarboxílico (TCA) e dando suporte ao seu funcionamento e geração de metabólitos essenciais para a síntese de macromoléculas, tendo particular importância para diversos tipos tumorais. O gene GLS codifica para as isoformas kidney-type glutaminase (KGA) e glutaminase C (GAC). Embora compartilhem do mesmo domínio catalítico, a isoforma KGA possui outros domínios distintos contendo sequências consenso do tipo LXXLL (L = Leucina e X = qualquer aminoácido), também chamada de Nuclear Receptor box (NR box), tipicamente presentes em correguladores de fatores de transcrição do tipo receptores nucleares. Duplo híbrido em levedura revelou o receptor nuclear Peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPAR?) como potencial parceiro de interação da KGA. Neste trabalho, também por duplo híbrido, definiu-se que a interação ocorre entre o domínio N-terminal de KGA, que contém o NR box 1 (10LXXLL14) e, os domínios de ligação ao DNA e de ligação ao ligante (DBD/LBD) de PPAR?. Nossos dados mostram que a maior presença de PPAR? no citoplasma está relacionada com o menor estado proliferativo das linhagens de câncer de próstata. Além disso, estudos de imunofluorescência em células de câncer de mama e próstata mostraram que KGA e PPAR localizam-se na mitocôndria, resultado confirmado por fracionamentos celulares seguidos de immunoblotting. Por fim, estudos de q-PCR array mostraram que o aumento da expressão de KGA levou ao aumento da expressão de 4 genes e a diminuição da expressão de 1 gene alvo de PPAR?. Estes genes estão diretamente envolvidos ao consumo de fontes alternativas de energia ou diminuição de estresse oxidativos. Neste sentido a parceria entre KGA e PPAR? pode estar ligada a melhor capacidade de sobrevivência das células tumorais em condições de privação de nutrientes
Zafred, Rafael Rosolen Teixeira, 1987-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP Z13a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2014.
Assunto: Astronium fraxinifolium
Resumo: Astronium fraxinifolium Schott., conhecido popularmente como "Gonçalo Alves", é uma espécie vegetal característica de regiões tropicais e tem...
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Resumo: Astronium fraxinifolium Schott., conhecido popularmente como "Gonçalo Alves", é uma espécie vegetal característica de regiões tropicais e tem sua distribuição no Cerrado Brasileiro, possui o caule e as folhas ricos em substâncias tânicas. Relatados populares indicam a utilização de A. fraxinifolium no tratamento de diarreias, disenterias, anti-séptico, anti-microbiano, antihemorrágico, cicatrizante, anti-inflamatório e antiulcerogênico. Devido o uso popular e a insuficiência de dados na literatura, este trabalho teve por objetivo avaliar as potenciais atividades farmacológicas desta espécie em modelos experimentais in vitro (atividade antiproliferativa em cultura de células) e in vivo (toxicidade aguda, modelos de nocicepção, inflamação e tumor sólido murino) O material vegetal (cascas do caule e folhas) obtido das coletas foram secos e triturados, o pó obtido foi utilizado para obtenção dos extratos por maceração mecânica e sistema Soxhlet. Estes foram avaliados conforme seu rendimento e demonstraram a presença de taninos hidrolisáveis, como compostos majoritários, e flavonoides. No teste realizado em cultura de células tumorais e não tumorais de diferentes origens os extratos apresentaram, em sua maioria, uma ação citostática na maior concentração testada (250µg/mL). Por outro lado, nos testes relacionados com atividade antinociceptiva extrato bruto das folhas demonstrou atividade nas doses de 100 e 200mg/Kg no modelo da formalina em ambas as fases. Nos modelos inflamatórios (úlcera induzida por indometacina, edema de pata induzido por carragenina e edema de orelha induzido por óleo de cróton) as doses de 100 e 200mg/Kg, no modelo de edema de pata induzido por carragenina, e as doses de 150 e 300mg/Kg, no modelo de edema de orelha induzido por óleo de cróton, demonstraram atividade anti-inflamatória. Considerando que aproximadamente 25% dos tumores estão relacionados com inflamações crônicas, o extrato das folhas de A. fraxinifolium foi avaliado no modelo experimental do tumor sólido de Ehrlich no flanco, demonstrando inibição do crescimento tumoral na dose de 100mg/Kg. Sendo assim, os resultados experimentais sugerem que a espécie A. fraxinifolium possui atividade antiinflamatória dos componentes do extrato bruto, corroborando com sua utilização popular. Além de promover inibição do crescimento tumoral indicando que os componentes do extrato podem atuar em outros processos além do inflamatório. Porém, outros estudos necessitam ser realizados para identificar a classe de compostos que promoveram as atividades farmacológicas da espécie
BCCL (1)
Videira, Natália Bernardi, 1992-
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP V668a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2018.
Assunto: PPAR beta
Resumo: Os Receptores Ativadores da Proliferacao de Peroxissomos (PPAR) sao fatores de transcricao modulados por ligantes e pertencentes a...
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Resumo: Os Receptores Ativadores da Proliferacao de Peroxissomos (PPAR) sao fatores de transcricao modulados por ligantes e pertencentes a superfamilia dos receptores nucleares. O isotipo PPAR¿À/¿Â esta envolvido em processos metabolicos como metabolismo energetico, adipogenese e metabolismo de lipidios, sendo um alvo interessante para o desenvolvimento de farmacos para doencas metabolicas. Alem disso, esse receptor e o isotipo mais expresso em pele e esta envolvido em diversos processos nesse orgao, como manutencao da barreira epidermal, sintese de lipidios, diferenciacao epidermal e cicatrizacao, o que o torna um alvo para o desenvolvimento de farmacos ou dermocosmeticos que possam atuar em processos de regeneracao de pele. O objetivo geral deste trabalho foi prospectar compostos que possam atuar como ligantes ativadores do PPAR¿À/¿Â e investigar os efeitos da modulacao deste receptor por ligantes em celulas epiteliais. Foi desenvolvido um protocolo de triagem de agonistas para este receptor, composto por um ensaio de transativacao celular seguido por dois ensaios de caracterizacao biofisica da interacao ligante:proteina - ensaio de termoestabilidade e ensaio de supressao da fluorescencia da sonda 8-anilino-1-naftalenosulfonico. O protocolo desenvolvido apresenta melhorias em relacao aos ensaios de transativacao celular comumente utilizados para triagem de ligantes de PPARs: (i) semi-automatizacao; (ii) analise da citotoxicidade aparente; (iii) uso de metodologias biofisicas para confirmacao da interacao direta entre ligante:proteina; (iv) e afericao da afinidade entre os hits e o receptor por meio do calculo da constante de dissociacao. Apos padronizacao, este racional foi utilizado para triar 121 compostos isolados enviados por colaboradores, 560 extratos de plantas brasileiras da biblioteca Phytobios, 719 compostos da biblioteca drug-like NIH-NCC e 80 derivados semi-sinteticos de produtos naturais da biblioteca TimTec NDL-3,000 pre-selecionados por virtual screening. Ao final do pipeline de busca de agonistas, o Extrato 2 da biblioteca Phytobios e sua fracao Extrato 2-18 foram selecionados como hits de PPAR¿À/¿Â, pois apresentaram componentes que ativam e estabilizam a estrutura terciaria do receptor, com constantes de dissociacao de 0,011 } 0,007 mg/mL e 0,016 } 0,007 mg/mL, respectivamente. Alem do protocolo de triagem, foram padronizados metodos de migracao, proliferacao e diferenciacao de queratinocitos humanos (HaCaT) para caracterizacao da modulacao do PPAR¿À/¿Â por ligantes em processos de regeneracao de pele. Nestes ensaios, os agonistas comerciais GW0742, GW501516 e L-165,041 aumentaram a taxa de migracao 2D de queratinocitos humanos (HaCaT), e os agonistas GW501516 e L-165,041 diminuiram a proliferacao deste tipo celular. Em relacao a diferenciacao de HaCaT, os agonistas GW0742 e L-165,041 nao alteraram a expressao genica dos marcadores de diferenciacao celular queratina 14, queratina 1 e involucrina. Avaliando os niveis de expressao de mRNA de componentes da matriz extracelular da pele (colageno, fibronectina e colagenases), nao foram observadas alteracoes no padrao de expressao desses alvos apos a ativacao do PPAR¿À/¿Â em celulas HaCaT, ou apos a supressao da expressao do receptor em camundongos knockouts com estimulo de reparo de feridas cutaneas. Em resumo, neste trabalho foi desenvolvido um pipeline de selecao de agonistas para o PPAR¿À/¿Â que ativem e a estabilizem a estrutura do receptor, alem de possibilitar o calculo da constante de dissociacao entre as amostras testadas e a proteina. Por fim, foram acoplados ensaios a este pipeline para posterior caracterizacao dos agonistas de PPA
Avaliação do efeito do alcaloide índigo em modelos experimentais de colite
Almeida, Ana Cristina Alves de, 1982-
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP AL64a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2015.
Assunto: Indigo
Resumo: A Doença Inflamatória Intestinal (DII), que compreende a Doença de Crohn (DC) e a Retocolite Ulcerativa (RCU), é marcada por resposta...
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Resumo
Resumo: A Doença Inflamatória Intestinal (DII), que compreende a Doença de Crohn (DC) e a Retocolite Ulcerativa (RCU), é marcada por resposta inflamatória exacerbada a componentes da microbiota, com danos à mucosa do cólon. O tratamento de DII envolve drogas ineficazes para a remissão de todos os parâmetros da doença, com vários efeitos colaterais e custo elevado, o que motiva a busca de novos agentes terapêuticos. Sendo os produtos naturais uma importante fonte para desenvolvimento de medicamentos, buscou-se, nesse trabalho, avaliar o efeito do alcaloide índigo em modelos experimentais de colite. Inicialmente, foi avaliado o tratamento oral com índigo em colite aguda induzida por ácido trinitrobenzeno sulfônico (TNBS) em ratos HanUnib: WH (Wistar), um modelo experimental de DC. O tratamento com índigo resultou em redução da lesão macroscópica, medida através de escore, na dose de 3 mg/kg, e da área de lesão ulcerativa (doses 0,1; 3; 10 e 30 mg/kg). Apenas a administração da maior dose (30 mg/kg) evitou o aumento da razão peso/comprimento do cólon e não houve diminuição da diarreia e aderência do cólon, após tratamento com o alcaloide. Danos histológicos foram minimizados no cólon de animais tratados com índigo (3, 6 e 12 mg/kg). Como a lesão macroscópica por TNBS é bastante severa, a dose de 3 mg/kg, que reduziu tanto o índice (escore) quanto a área de lesão, foi selecionada para as análises posteriores. Nos ratos tratados com índigo (3 mg/kg), houve aumento na atividade da superóxido dismutase (SOD) e redução da atividade da glutationa peroxidase (GPx), redução dos níveis de peroxidação lipídica (LPO) e, parcialmente, de glutationa (GSH), sem alteração significativa na atividade da glutationa redutase (GR) e catalase (CAT). O tratamento com índigo (3 mg/kg) evitou aumento da expressão de ciclooxigenase 2 (COX-2), e não mostrou efeito significativo na expressão de fator nuclear de transcrição ?B (NF-?B) e na concentração de citocina anti-inflamatória interleucina 10 (IL-10). O segundo modelo experimental empregado neste trabalho foi a indução de colite aguda por dextrana sal sódico (DSS), em camundongos Unib: SW (Swiss), que apresenta similaridades com a RCU. A administração de índigo (3 mg/kg) não levou à redução significativa do índice de atividade da doença (DAI), o qual engloba alteração de peso corporal, presença de diarreia e sangue nas fezes; entretanto, foi eficaz em evitar o aumento da razão peso/comprimento do cólon. Em análise histológica, notou-se menor gravidade dos danos causados pelo DSS (aumento da parede do cólon, com infiltração celular na mucosa e submucosa, desorganização do epitélio). No cólon de animais tratados com índigo, observou-se aumento na atividade da SOD, não acompanhada de mudanças nos níveis de GSH e atividade da GPx, GR e CAT. O alcaloide inibiu aumento na concentração cólica da citocina IL-6, mas não da interleucina IL-1?. Em modelo experimental de colite crônica, com recidiva, associada a câncer de cólon por azoximetano e DSS (AOM/DSS) em camundongos Unib: SW (Swiss) machos, a administração de índigo reduziu a mortalidade, minimizou a perda de massa corporal dos animais e evitou o aumento da razão peso/comprimento do cólon. A substância teste, entretanto, não foi capaz de reduzir o DAI, nesse experimento, por não minimizar a perda de consistência e o aparecimento de sangue nas fezes. No modelo de colite crônica por AOM/DSS (9 semanas), animais sadios tratados com salina fisiológica (veículo) ou índigo (3 mg/kg) foram monitorados para análise de sinais de toxicidade do alcaloide, a partir dos parâmetros: mortalidade, evolução de peso corporal, consumo de ração, peso e avaliação macroscópica dos órgãos coração, pulmões, rins e fígado. Não foram encontrados indícios de toxicidade nos parâmetros avaliados, mas devido à mortalidade de 17 % dos camundongos tratados com índigo, foi realizado teste de toxicidade aguda de dose única. Após 14 dias da administração oral e intraperitoneal de índigo (1000 mg/kg), em camundongos Unib:SW (Swiss) machos e fêmeas, não foram observadas alterações na evolução de peso corporal, consumo de água e ração, peso de órgãos vitais, comportamento e sobrevivência dos animais. Em suma, o alcaloide índigo apresentou efeito anti-inflamatório em modelos de colite por TNBS, DSS e AOM/DSS. A redução do estresse oxidativo deve ter papel central na redução das lesões causadas pelo TNBS, enquanto que na colite por DSS, a regulação da IL-6 parece ser determinante para redução dos danos. Apesar de não minimizar todos os parâmetros de danos causados pela colite, o tratamento com índigo possibilitou que os animais ficassem, em geral, menos debilitados (evidenciado pelo maior peso e consumo de ração) que os animais não tratados
BCCL (1)
Mora Polanco, Indira Yuley, 1989-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP M79b
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2018.
Assunto: Endófitos
Resumo: As bactérias endofíticas são microrganismos associados a plantas e apresentam a habilidade de promover crescimento, aumentar a atividade...
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Resumo
Resumo: As bactérias endofíticas são microrganismos associados a plantas e apresentam a habilidade de promover crescimento, aumentar a atividade fotossintética e proteger contra o ataque de patógenos ao hospedeiro. Aliás, os endófitos também podem produzir metabolitos secundários bioativos ou modular sua síntese no hospedeiro. Este trabalho de pesquisa teve como objetivo investigar as características fenotípicas e genéticas além do potencial antimicrobiano e antioxidante da bactéria endofítica MG-1 isolada das folhas de Mikania glomerata Spreng. (Asteraceae) a partir do estudo químico/biológico do extrato bruto deste microrganismo e avaliar seu efeito na modulação de metabólitos secundários bioativos na cultura de células da planta mediante análise por UHPLC-ESI-MS. A identificação genética realizada mediante a análise do gene RNA ribossomal 16S confirmou a Methylobacterium como o gênero ao qual pertence o endófito. Os extratos em acetato de etila obtido de cultura em meio liquido ISP2 e TSB apresentaram atividade antimicrobiana in vitro frente a Staphylococcus aureus e Bacillus subtilis a uma concentração de 5 mg/mL. Por outro lado, verificou-se que o extrato em acetato de etila dos calos e da suspensão celular de Mikania glomerata associados a Methylobacterium sp. apresentavam valores de ORAC mais elevados em comparação aos controles. Na associação, os valores de ORAC foram de 4484,24 ?mol TE/g de extrato do calo, e de 1384,97 ?mol TE/g de extrato da suspensão, enquanto o ORAC dos controles foram de 955,42 ?mol TE/g de extrato no calo controle e 390,55 ?mol TE/g no extrato da suspensão. Conforme as analises por UHPLC-ESI-MS, foi possível detectar um incremento na concentração de cumarina e ácido clorogênico nos extratos em acetato de etila do calo associado ao endófito em comparação ao calo controle, o que, associado ao aumento na capacidade antioxidante pelo ensaio ORAC-FL, sugere que o endófito exerce um efeito na produção de metabolitos secundários bioativos in vitro na cultura de células vegetais de M. glomerata em meio semi-sólido, nas condições avaliadas. A continuidade das investigações químicas e biológicas se faz necessária para confirmar os resultados obtidos e avaliar melhor o potencial biotecnológico deste microrganismo endofítico
Hernández Tasco, Alvaro José, 1991-
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP H43b
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2020.
Assunto: Plantas
Resumo: As plantas são consideradas nichos ecológicos que possuem diferentes ambientes com diversas associações como a rizosfera (próximo às raízes),...
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Resumo
Resumo: As plantas são consideradas nichos ecológicos que possuem diferentes ambientes com diversas associações como a rizosfera (próximo às raízes), filosfera (sobre os tecidos vegetais) e endosfera (no interior da planta) e cada parte possui sua própria comunidade de microrganismos com suas diferentes funções. A endosfera funciona em associação com outros organismos onde pode ocorrer intercâmbio metabólico com benefícios mútuos. Plantas da familia Gesneriaceae Rich. & Juss. ex DC. são uma interessante fonte de metabólitos secundários com diversidade em termos químicos e com relatos de extratos e de algumas moléculas bioativas (atividade antioxidante, antimicrobiana anti-inflamatória, analgésica e antiproliferativa para linhagens de células tumorais). No entanto, poucas espécies de Sinningia Nees (Gesneriaceae) foram estudadas em termos químicos e não é conhecida a diversidade de microrganismos endofíticos a elas associada, bem como o impacto de endófitos na biossíntese de substâncias bioativas. Assim, neste trabalho buscou-se estudar, em planta in natura e cultivada in vitro, a diversidade microbiana, o potencial metabólico e a avaliação das atividades antimicrobiana e antioxidante de extratos metanólicos de bactérias e fungos endofíticos associados às lâminas foliares de Sinningia magnifica (Otto & A. Dietr.) Wiehler, Sinningia schiffneri Fritsch e Sinningia speciosa (Lodd.) Hiern, grupo Fyfiana (Gesneriaceae). Para isto foram utilizados dierentes tipos de metodologias num estudo multidisciplinar, onde se buscou avaliar a diversidade microbiana no mesmo período de 3 anos, e para os endófitos cultiváveis e isolados, realizou-se análises para se determinar comunidades de bactérias e fungos endofíticos associados às lâminas foliares destas três espécies de Sinningia. Além disso, foram obtidos extratos metanólicos das plantas in natura, de plantas cultivadas in vitro e de culturas mistas sintéticas (co-culturas) entre plantas in vitro e microrganismos endofíticos isolados de cada espécie vegetal e também de co-culturas entre microrganismos endofíticos, avaliando-se o impacto no perfil cromatográfico, na biossíntese de metabólitos secundários e na bioatividade, empregando-se análises químicas por UHPLC-ESI-MS/MS, com uso de substâncias-padrão previamente isoladas de espécies de Sinningia, e análises quimiométricas multivariadas PCA e PLS-DA. Foram avaliados o potencial antioxidante (ensaio ORAC-FL) e antimicrobiano (microdiluição) dos extratos das plantas (in natura e obtida in vitro), dos microrganismos endofiticos cultiváveis isolados e das co-culturas planta in vitro-endófitos. Os resultados de diversidade microbiana indicaram que as comunidades endofíticas presentes nas espécies de Sinningia puderam ser agrupadas em bactérias pertencentes aos filos Actinobacteria, Bacteroidetes, Firmicutes e Proteobacteria, e em fungos associados aos filos Ascomycota, Basidiomycota e Chytridiomycota. Quanto aos microrganismos endofíticos cultiváveis isolados os resultados mostraram que as bactérias pertencem aos gêneros Curtobacterium, Methylobacterium, Pantoea, Stenotrophomonas e Xanthomonas, e os fungos aos gêneros Cladosporium, Curvularia, Geosmithia e Lecanicillium. Foram detectados nos extratos metanólicos analisados por UHPLC-ESI-MS a halleridona, a 8-hidroxi-dunniona, a 6-metoxi-7-hidroxi-2-metilantraquinona e o calceolariosideo B, com o teor destas substâncias variando pela interação planta-endófito. Os extratos metanólicos das plantas in natura e in vitro, dos microrganismos endofiticos cultiváveis, das co-culturas planta in vitro-endofito e das co-culturas entre microrganismos endiofiticos obtidos de cada planta, mostraram diferentes respostas em termos de bioatividade, sendo verificados extratos que apresentaram atividade antimicrobiana, antioxidante e pro-oxidante e outros que não foram ativos. Pode-se concluir que as bactérias e fungos endofíticos associados às lâminas foliares de cada uma das três espécies de Sinningia estudadas são capazes de modular o metabolismo vegetal, em termos de constituintes químicos e de bioatividade, dependendo das combinações obtidas das culturas mistas sintéticas planta-endófito, mostrando a diversidade de microrganismos endofíticos associados à lâmina foliar de S. magnifica, S. schiffneri e S. speciosa e o impacto dos endófitos na biossíntese de substâncias bioativas quando associados à endosfera vegetal
Tundisi, Louise Lacalendola, 1992-
DISSERTAÇÃO - Multilíngua
Número de chamada: T/UNICAMP T834b
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2017.
Assunto: Biotecnologia
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Resumo
Resumo: A L-asparaginase (L-ASNase) é um biofármaco utilizado principalmente no tratamento da leucemia linfoide aguda (LLA) que atinge principalmente crianças de 3 a 5 anos e adolescentes, aumentando sua sobrevida de 20% para 90%. A obtenção de um biofármaco envolve uma série de processos que vão desde sua produção a sua purificação. A purificação de um biofármaco, como a L-ASNase, geralmente consiste em várias etapas que representam até 80% dos custos totais de produção, e se faz necessário para que haja uma diminuição dos seus efeitos colaterais quando aplicado. Por ser uma etapa de extrema importância, este trabalho teve como objetivo principal extrair e purificar a L-ASNase por processos alternativos, utilizando a precipitação com etanol e sistemas de duas fases aquosas. Para isso, foi realizada a caracterização da L-ASNase de Aspergillus oryzae e a avaliação dos fatores que afetam sua recuperação e purificação em sistema aquoso de duas fases. Ambas as etapas estão descritas nos capítulos II e III do presente trabalho. Os resultados obtidos mostram que os processos alternativos podem levar a uma produção com um menor número de etapas e menos onerosa de um medicamento extremamente importante no tratamento de LLA. Com mudanças nas propriedades do sistema, é possível modificar a partição da molécula podendo atingir alto grau de purificação
Busca de novos ligantes para o PPARy utilizando uma abordagem biofísica e celular
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP B764b
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2016.
Assunto: PPAR gama
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Resumo
Resumo: O diabetes tipo 2 atinge pelo menos 15% da população mundial e 6% da população brasileira, sendo caracterizado como parte do conjunto de patologias de efeitos associados, característicos da Síndrome Metabólica. O PPAR? regula a transcrição de genes relacionados ao metabolismo de lipídeos, controle de inflamação e produção de insulina, sendo um dos alvos diretos desta síndrome. Após observações de que a sensibilização à insulina é desencadeada não pela ativação direta do PPAR?, mas pelo impedimento da fosforilação de um de seus resíduos, a Ser273, postulou-se que um bom modulador deste receptor seria uma molécula que apresentasse baixa ativação do receptor e impedisse a fosforilação da Ser273. Atualmente, este receptor é modulado por fármacos como a rosiglitazona e a pioglitazona, que estão disponíveis no mercado, mas que têm seu uso questionado, devido aos seus efeitos colaterais. Neste trabalho buscamos, através da utilização de um conjunto de metodologias, novos compostos que modulem de forma seletiva o receptor nuclear PPAR?, proporcionando sensibilização à insulina, auxiliando no tratamento de diabetes tipo 2. Para tanto, padronizamos um conjunto de metodologias que fossem capazes de definir os efeitos desejados na busca de novos moduladores de PPAR?, através de ensaios de estabilidade estrutural, ensaios celulares, testes de ativação/repressão dos receptores e ensaios de afinidade a ligantes. Mais ainda, tentamos elucidar as mudanças estruturais provocadas pelos melhores compostos encontrados, por estudos de biologia estrutural. Com isso, encontramos alguns compostos promissores para o planejamento racional de fármacos no combate à diabetes, os quais, atualmente, constituem uma das classes mais procurada para a prática médica