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Resumo: O presente trabalho visou o estudo da produção, purificação e aplicação de b-1,3 glucanases, proteases e quitinases. A linhagem Cellulosimicrobium cellulans 191 foi utilizada para o estudo da produção de b-1,3 glucanases e quitinases e as linhagens B26 e C. cellulans 191 foram utilizadas para a produção de proteases, em meios de cultivo contendo diferentes indutores. Foram realizados planejamentos fatorias 23, e os fatores estudados foram: pH inicial, temperatura (oC) e agitação dos frascos. No planejamento experimental para a produção de b-1,3 glucanase foi verificado maior produção da enzima (0,64 U/mL) em meio de cultivo A composto por 2,0 g/L de (NH4)2SO4; 0,2 g/L de MgSO4.7H2O e 10 g/L de parede celular de levedura em tampão fosfato 0,2 M, pH 8,5, após 24 h de fermentação, a 33oC e 200 rpm. Nos planejamentos experimentais para a produção de protease pelas linhagens B26 e 191 foi verificado maior produção da enzima em meio de cultivo B composto por 2,0 g/L de (NH4)2SO4; 0,2 g/L de MgSO4.7H2O e 80 g/L de levedura seca utilizada como indutor em tampão fosfato 0,15 M, pH 6,5, após 30 h de fermentação a 20oC e 200 rpm, sendo obtido 5,01 U/mL e 4,25 U/mL, respectivamente. No planejamento experimental para a produção de quitinase foi verificado maior produção da enzima (7,06 U/mL) em meio de cultivo C composto por 4,0 g/L de extrato de levedura; 2,0 g/L de triptona; 4,0 g/L de MgSO4.7H2O; 1,2 g/L de KH2PO4; 2,8 g/L de K2HPO4 e 15 g/L de quitina neutralizada utilizada como indutor, com pH inicial de 5,5 após 72 h de fermentação a 25oC e 200 rpm. Todos os modelos obtidos foram preditivos e significativos a um nível de confiança de 95%. No estudo de produção das enzimas da linhagem C. cellulans 191 em fermentador de 5 L, a maior produção de b-1,3 glucanase, utilizando meio de cultivo A e 1,5 vvm e 3 vvm, foi respectivamente 0,32 U/mL e 0,72 U/mL, após 24 h de fermentação a 30oC. Na produção de protease em fermentador de 5 L, utilizando meio de cultivo B e 1,5 vvm foi obtido 1,87 U/mL e 2,34 U/mL, respectivamente, após 6 h e 30 h de fermentação a 30oC; enquanto que com 3 vvm, foi obtido 4,89 U/mL e 6,14 U/mL de protease após 6 h e 33 h de fermentação, a 30oC. Em fermentador de 5 L, a maior produção de quitinase em meio de cultivo C foi de 4,19 U/mL com 1,5 vvm após 168 h de fermentação e 4,38 U/mL de quitinase após 144 h de fermentação com 3 vvm, a 25oC. No estudo de produção de b-1,3 glucanases, proteases e quitinases da linhagem C. cellulans 191 em frascos agitados, em meios de cultivo A, B e C, foram produzidos respectivamente, 1,12 U/mL de b-1,3 glucanase; 4,2 U/mL de protease e 6,9 U/mL de quitinase. A b-1,3 glucanase (45 KDa) foi purificada 11,83 vezes com rendimento de 25% em resina de troca iônica DEAE-Sephadex A50. Na purificação das proteases em resina de troca iônica DEAE-Sephadex A50 foram obtidas três frações de proteases denominadas P1, P2 e P3. A fração P3 apresentou duas bandas de massas moleculares de 14 e 16 KDa em eletroforese SDS-PAGE. A quitinase (61 KDa) foi purificada cerca de 6,65 vezes com rendimento de 46,61% em resina de filtração em gel Sepharose CL4B200. A b-1,3 glucanase purificada apresentou atividade de lise de diversas leveduras e foi capaz de formar protoplastos da levedura Saccharomyces cerevisiae KL-88. O pré-tratamento das leveduras com protease P3 purificada não aumentou a lise das leveduras com a ß-1,3 glucanase. A quitinase purificada foi capaz de lisar células de algumas espécies de fungos em suspensão aquosa, mas não foi capaz de inibir, o crescimento dos fungos em placas de ágar batata dextrose. A preparação bruta de quitinase apresentou halo de inibição do crescimento de alguns fungos estudados. Os produtos formados pela reação da b-1,3 glucanase purificada sobre a laminarina e da protease purificada sobre a levedura seca apresentaram capacidade antioxidante

Resumo: O gênero "Cronobacter" compreende patógenos oportunistas associados as infecções graves em bebês, principalmente após o consumo de fórmulas infantis em pó contaminadas. Nos últimos anos, estudos sobre "Cronobacter" spp. em diversos alimentos vêm crescendo no mundo, e os alimentos de baixa atividade de água que trazem benefícios à saúde se destacam, devido ao aumento do seu consumo pela população, sendo assim, necessário o conhecimento da presença deste micro-organismo nesses alimentos. O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de "Cronobacter" spp. em alimentos de baixa atividade de água (granola, chia, linhaça, farinha de chia, farinha de linhaça e frutas secas), determinar o perfil de suscetibilidade a antibióticos e verificar o perfil de virulência dos isolados. O isolamento deste micro-organismo foi realizado segundo a metodologia da International Organization for Standardization (ISO 22964:2017) e a identificação de gênero foi realizada através da técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) para o gene ompA, e a identificação de espécies pela PCR para o gene rpoB e sequenciamento do gene fusA. A identificação dos genes de virulência ompX, cpa, hly e sodA foi realizada pela técnica de PCR e a susceptibilidade a 12 antibióticos avaliadas pela técnica de disco difusão. Dez isolados foram selecionados para realizar a tipagem de sequência multilocus (MLST) e determinar o tipo de sequência (ST) através de sequenciamento genético. Trinta e oito (36,2%) das 105 amostras analisadas estavam contaminadas por "Cronobacter" spp., (granola, chia, linhaça, farinha de chia e farinha de linhaça). A espécie mais prevalente foi C. sakazakii (60,3%), seguida de C. dublinensis (25,4%), C. turincensis (9,5%) e C. malonaticus (4,8%). Foram encontrados 19 alelos fusA, e entre eles 4 novos alelos (fusA 210, fusA 211, fusA 212, fusA 213). Todos os isolados (100%) foram positivos para os genes ompX e sodA, enquanto 38 (60,3%) foram positivos para o gene cpa, e 37 (58,7%) para o gene hly. Os isolados apresentaram diversos perfis de susceptibilidade aos antibióticos, onde 23,8% dos isolados foram sensíveis a todos antibióticos testados, 47,6% foram resistentes a gentamicina, 38,1% a ampicilina, 25,4% a cefotaxima, 22,2% a amicacina, 22,2% a ácido nalidíxico, 11,1% a meropenem, 6,3% a sulfazotrim, 4,8% a tetraciclina, 4,8% a cloranfenicol e 1,6% a imipenem. Além disso, 19 (30,2%) isolados foram multirresistentes, sendo a maioria cepas de C. sakazakii (68,4%), seguidos de C. dublinensis (26,3%) e C. turicensis (5,3%). Dos dez isolados avaliados pela técnica MLST, foram encontrados 7 STs diferentes (ST1, ST40, ST184, ST233, ST251, ST384 e ST618), sendo o mais prevalente o ST 1 (30%), seguido pelo ST 40 (20%). Três complexos clonais (CCs) foram encontrados, sendo eles CC 1 (4 isolados), CC 40 (2 isolados), e CC 142 (1 isolado), e para três isolados ainda não foram atribuídos CCs no banco de dados. A caracterização molecular demonstrou que C. sakazakii foi a espécie com maior potencial virulento. A presença de "Cronobacter" spp. em alimentos de baixa atividade de água benéficos à saúde evidencia a necessidade da contínua investigação desse patógeno em alimentos, principalmente naqueles alimentos com apelo nutritivo, para verificar os potenciais riscos à saúde do consumidor

Resumo: "Enterococcus" spp. ascenderam como causa de moléstias nosocomiais e sua ocorrência em alimentos tornou-se controversa. Estes enterococos, mormente "E. faecalis" e "E. faecium", detêm fatores de virulência e resistência a antimicrobianos eventualmente transmissíveis entre si ou a outras bactérias através de Elementos Genéticos Móveis (EGM). Portanto, objetivou-se descrever a ocorrência de fatores de virulência em E. faecalis, E. faecium e em "Enterococcus" spp. de amostras de ambiente e alimentos oriundas de uma indústria de laticínios. Ademais, buscou-se correlacionar isolados selecionados de "E. faecalis" encontrados em alimentos com isolados de amostras clínicas de urina, utilizando como critérios, além dos fatores de virulência, a resistência a antimicrobianos e análises multivariadas (SVM, PLS-DA, "Heatmap" e HCA) com dados obtidos em MALDI-TOF/MS. Genes de virulência e resistência à vancomicina foram detectados através de PCR e, a fim de determinar a sensibilidade antimicrobiana, utilizou-se o método de Disco-Difusão. Entre os 155 isolados de enterococos oriundos de indústria (ambiente e alimentos), somente em 22 (14,19%) verificou-se a ausência dos 10 fatores de virulência avaliados. Genes de virulência foram abundantemente detectados entre os isolados, mormente em "E. faecalis". Concernente ao estudo correlativo, constatou-se a mesma incidência a nível estatístico (? = 0,05) dos fatores de virulência em ambas as fontes de isolamento de "E. faecalis" (laticínios e urina), com ressalvas a efaA e cylB, mais associados aos últimos. Portanto, como os isolados de alimentos mostraram ocorrência de fatores de virulência similar, evidencia-se a iminência de se tornarem infectantes em cenário favorável. E. faecalis oriundos de laticínios revelaram maior sensibilidade aos antimicrobianos avaliados; contudo, 70% foram resistentes à tetraciclina e 40%, à eritromicina. Ademais, observou-se multirresistência somente entre os isolados de urina. Concernente às análises multivariadas realizadas com dados obtidos em MALDI-TOF/MS, o modelo PLS-DA mostrou uma leve divisão entre isolados de E. faecalis de acordo com a sua fonte de isolamento, mas não mostrou subdivisões, isto é, os isolados de leite cru não foram individualizados dos obtidos de queijos Minas frescal. O mesmo foi observado em HCA, onde entre os 8 clusters formados, 2 constituíram-se exclusivamente de isolados de alimentos. Relativamente ao "Heatmap", não se constatou a ocorrência de íons associados exclusivamente a uma das classes "E" (laticínios) ou "H" (urina). O modelo SVM classificou corretamente 100% dos isolados de "E. faecalis" de laticínios, mas somente 56,1% das uroculturas foram identificadas como tal

Resumo: "Limosilactobacillus reuteri" é uma bactéria heterofermentativa, não patogênica que apresenta capacidade de produzir reuterina via fermentação anaeróbica do glicerol. Esse composto apresenta características antimicrobianas sendo relacionado à atividade probiótica da bactéria. Assim, e em particular considerando a crescente preocupação com a saúde humana, tanto a suplementação nutricional utilizando probióticos quanto novas estratégias de biopreservação de alimentos vêm sendo estudadas. Neste sentido, são inúmeros os estudos envolvendo soluções filmogênicas à base de polissacarídeos como suporte para entregar e proteger células microbianas, ou ainda para produção de filmes e revestimentos comestíveis para alimentos, visando prevenir ou reduzir a contaminação por micro-organismos. Neste contexto, essa tese possui vasta literatura sobre L. reuteri, reuterina, probióticos, encapsulamento de micro-organismos, aprisionamento em revestimentos comestíveis, além de técnicas e materiais utilizados para essas finalidades. Ademais, utilizando cepas de L. reuteri (DSM 20016 e 17938) a produção de reuterina "in situ" em solução filmogênica à base de alginato e glicerol foi otimizada, atingindo concentrações de até 68,39 mmol/L. Em seguida, partindo das condições ótimas pré-estabelecidas, foram produzidas novas soluções filmogênicas contendo em sua composição materiais mucilaginosos pouco ou ainda não explorados para essa finalidade (psyllium, konjac, mutamba, cassia tora ou tamarindo). Essas soluções foram utilizadas para encapsular por extrusão células de L. reuteri e a reuterina produzida in situ. O uso dos materiais mucilaginosos associados ao alginato produziu partículas que melhoraram a eficiência de encapsulamento tanto para células de L. reuteri quanto para reuterina, atingindo taxas de 97,4 e 45 %, respectivamente. Além disso, foi aprimorada a sobrevivência de células de L. reuteri durante armazenamento refrigerado (4 ± 2 °C), especialmente em armazenamento prolongado de 20, 30 e 60 dias, e em condições gástrica e entérica simuladas (76.6 %). Devido seus possíveis efeitos antimicrobianos e utilização em tecnologias de conservação de alimentos, foi investigado o efeito inibitório de L. reuteri e da reuterina contra micro-organismos patogênicos e deteriorantes de origem alimentar. Desta forma, além dos ensaios antimicrobianos utilizando sobrenadantes de L. reuteri, foram produzidos e utilizados para mesma finalidade filmes comestíveis a partir de solução mucilaginosa à base de alginato e goma de konjac, contendo células de L. reuteri e nos quais a produção de reuterina foi induzida. Tanto os sobrenadantes como os filmes comestíveis demonstraram efeitos antimicrobianos contra "Bacillus cereus", "Clostridium perfringens", "Pseudomonas aeruginosa", além dos fungos "Fusarium oxysporum", "Colletotrichum gloeosporioides", "Alternaria alternata" e "Penicillium digitatum". Diante ao exposto, essa tese traz informações sobre novas soluções mucilaginosas como material de suporte para compostos biológicos e/ou químicos, possibilitando suas aplicações na entrega de micro-organismos ou no desenvolvimento de revestimentos comestíveis. Além disso, os efeitos antimicrobianos do L. reuteri e da reuterina podem ampliar o potencial de aplicação em alimentos

Resumo: As cianobactérias são os únicos organismos procariontes capazes de realizar a fotossíntese oxigênica. Dessa forma, elas convertem a energia luminosa em energia química, utilizando a água como fonte de elétrons e o dióxido de carbono como fonte de carbono para produzir oxigênio, biomassa e diversos metabólitos secundários, tais como proteínas, polissacarídeos, lipídeos, pigmentos e vitaminas. Esses compostos são reconhecidos pelo seu potencial biotecnológico em uma variedade de aplicações, que incluem agricultura, aquacultura, biorremediação, produção de energias renováveis, biomateriais, nutracêuticos, biomedicina e desenvolvimento de tecnologias aeroespaciais. Nesse sentido, o estudo das cianobactérias como biofábricas de compostos bioativos constitui uma área de pesquisa promissora e ainda pouco explorada. Com base em essa perspectiva, o objetivo deste projeto foi investigar a cianobactéria Phormidium autumnale como fonte de exopolissacarídeos (EPS) e ficobiliproteínas (PBP), implementando estratégias inovadoras para sua produção e extração, com o intuito de avaliar seu potencial prebiótico. O projeto foi conduzido em três fases principais. A primeira fase focou na elucidação do efeito da adição de D-lactose, soro de leite ou permeado de soro de leite na cultura (mixotrófica) de P. autumnale, como uma estratégia para aumentar a produção desses metabólitos; a segunda fase esteve relacionada à avaliação do efeito do escalonamento das culturas cultivadas em D-lactose como fonte de carbono orgânico sobre as cinéticas de produção de biomassa, EPS e PBP; e, finalmente, a terceira fase envolveu o estudo do potencial prebiótico desses compostos por meio da avaliação da digestibilidade in vitro e da promoção do crescimento das cepas probióticas Lactobacillus acidophilus (LAC 04) e Bifidobacterium bifidum (BB-G90). Assim, os resultados demonstraram que a adição de fontes externas de carbono orgânico em culturas mixotróficas de P. autumnale favoreceu significativamente a produção global de biomassa, sendo que a produção de EPS foi maior nas culturas com D-lactose, enquanto uma produção de PBP, principalmente da c-ficocianina, foi obtida nas culturas com soro de leite. Também foi evidenciado que a adição de determinados sais, como os de cobre, pode comprometer o metabolismo dessa cianobactéria, especialmente quando presentes em concentrações elevadas. Portanto, é necessário avaliar a dosagem específica a ser usada em culturas de P. autumnale como estratégia de biorremediação e produção sustentável de compostos bioativos. Por outro lado, foi determinado que os EPS produzidos por esse microrganismo, quando cultivado em sistemas contendo D-lactose, expostos à luz e escalonados a volumes maiores, apresentam uma composição química específica que depende das condições ambientais e do tipo de EPS avaliado, seja polissacarídeo liberado ao meio (RPS) ou capsular (CPS). Finalmente, a capacidade prebiótica dos EPS foi verificada, pois eles apresentaram alta resistência à degradação nas diferentes fases do processo digestivo e, adicionalmente, promoveram o crescimento das cepas probióticas. Deste modo, os EPS produzidos por P. autumnale sob crescimento mixotrófico com suplementação de D-lactose, mostraram-se promissores para uso como potenciais componentes de parede em cápsulas simbióticas

Resumo: No Brasil, a legislação vigente para a fabricação de queijos artesanais é a Instrução Normativa n° 30, de 07 de agosto de 2013, do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. A produção artesanal de queijos no Brasil constitui uma atividade pouco documentada, porém a prática queijeira se difundiu nas fazendas e pequenas propriedades rurais por todo o território nacional, gerando produtos variados e apreciados pelos consumidores. Apesar de sua importância na cultura e alimentação brasileira, inexistem estudos para elucidar a ecologia microbiana dos queijos artesanais brasileiros através de ferramentas avançadas como a metagenômica. O conhecimento da microbiota e suas interações nos queijos artesanais brasileiros precisam ser elucidados, visando o fortalecimento dos padrões de qualidade e segurança característicos destes produtos. Sendo assim, o principal objetivo deste trabalho foi caracterizar a diversidade microbiana de diferentes tipos de queijos artesanais produzidos no Brasil, envolvendo 578 amostras. A microbiota de 11 tipos de queijos provenientes de cinco regiões geográficas foi investigada pelo sequenciamento do gene 16S rRNA. Além disso, foram coletadas amostras do ambiente de processamento de queijos artesanais (matérias-primas, produto final e esponjas superficiais) em três fazendas da região da Serra da Canastra, Brasil, totalizando 24 amostras, para a investigação da ecologia microbiana e analisadas pelo método independente de cultivo, através do sequenciamento do amplicon. Os resultados mostraram que as bactérias ácido lácticas foram prevalentes em todos os tipos de queijos, embora Enterobacteriaceae e Staphylococcus tenham ocorrido em queijos das regiões Norte, Nordeste e Central do Brasil. Os gêneros Streptococcus, Leuconostoc, Lactococcus e Lactobacillus foram encontrados, combinados diferentemente em termos de abundância relativa de acordo com o tipo de produto e a região produtora. Em cultura starter natural e em amostras de queijo curado, houve o predomínio de bactérias lácticas (Lactobacillus, Streptococcus, Lactococcus e Leuconostoc), importantes para conferir as características desejadas ao produto final. Por outro lado, possíveis contaminantes como Pseudomonas, Staphylococcus, Pasteurella, Enterobacter, Klebsiella e Acinetobacter, foram encontrados em amostras de leite cru, piso e pano de dessoragem. Esses resultados são importantes porque fornecem um mapeamento microbiológico dos queijos brasileiros, destacando o impacto da origem geográfica e o modo de produção na diversidade microbiana. Além disso, a caracterização destes queijos contribui para o estabelecimento de ações que garantam a qualidade e segurança microbiológica destes produtos

Resumo: Própolis contém substâncias resinosas coletadas pelas abelhas (Apis mellifera) de várias plantas. Ela é usada pelas abelhas para selar buracos e proteger a colméia. Própolis é usada na medicina popular desde 300 anos antes de Cristo. Numerosas propriedades biológicas têm sido encontradas nas própolis, incluindo anti-microbiana, citotoxidade, anti-herpes, anti-tumor, anti-HIV, e efeitos supressivos da toxicidade da dioxina. Anteriormente as própolis brasileira haviam sido classificadas em 12 grupos, baseado nas características físico-químicas. Foi também analisada as origens botânicas das principais própolis, como do grupo 3 que foi identificada sendo resina do botão floral de Populus (Salicaceae), do grupo 6 e 12 foi identificada sendo resina de folhas jovens de Hyptis divaricata (Lamiaceae) e Baccharis dracunculifolia (Asteracea), respectivamente. Própolis normalmente é uma resina amarela escura ou amarronzada. Recentemente, nós encontramos uma própolis vermelha em colméias localizadas ao longo do mar e costas de rios no nordeste brasileiro que foi classificada então como própolis do grupo 13. Foi observado que as abelhas coletavam o exudato vermelho da superfície de Dalbergia ecastophyllum (L) Taub. (Leguminosae). Através de análises químicas e histológicas foi comprovado a existência de um novo grupo de própolis de origem botânica Dalbergia ecastophyllum com alta atividade anti-microbiana e anti-radical livre

Resumo: O trabalho centrou-se no estudo de absorvedores de radiação ultravioleta (UV) utilizados em garrafas de polietilenotereftalato (PET) destinadas ao acondicionamento de óleos vegetais. Duas metodologias de análise, uma utilizando a Cromatografia por Exclusão-CLAE l/UV e outra a CG/EM2, foram desenvolvidas. ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital

Resumo: O objetivo, deste trabalho, foi estudar o possível efeito protetor da vitamina E sobre a oxidação lipídica no sangue e no fígado de ratos Wistar, alimentados conforme dietas AIN93-G e suplementados por gavagem com ácidos graxos poliinsaturados ômega-3. Para o primeiro ensaio biológico, foram utilizados 60 ratos machos albinos, recém-desmamados, distribuídos aleatoriamente em 6 grupos experimentais, no qual foram divididos, de acordo com a quantidade de suplemento e marca, com e sem vitamina E: GRUPO 1 - Controle -Suplementação com 2 g/dia de óleo de soja; GRUPO 2 - Suplementação com 2 g/dia de ácidos graxos ômega-3 da marca A com vitamina E (120 mg/dia); GRUPO 3 - Suplementação com 2 g/dia de ácidos graxos ômega-3 da marca B, sem vitamina E; GRUPO 4 - Suplementação com 1 g/dia de ácidos graxos ômega-3 da marca A, com vitamina E (60 mg/dia); GRUPO 5 - Suplementação com 1 g/dia de ácidos graxos ômega-3 da marca B, sem vitamina E; GRUPO 6 - -Suplementação com 2 g/dia de ácidos graxos ômega-3 da marca B, sem vitamina E, por um período de 30 dias e, posteriormente, durante 15 dias, suplementação com vitamina E (marca C - 400 mg de acetato de DL-?--tocoferol). Nesse grupo, não houve sacrificio de animais no Tempo 1. Foram realizadas análises em três tempos: T0 - valor de referência após 3 dias em adaptação com dieta basal (sacrificados 12 animais, n=12); T1, com 30 dias de suplementação (sacrificados 4 animais por grupo, n=8), e T2, aos 45 dias de suplementação (sacrificados 4 animais por grupo, n=4). Para o segundo ensaio biológico, foram utilizados 80 ratos machos albinos, da linhagem Wistar, recém--desmamados. Inicialmente os 80 animais foram pesados e submetidos a um período de aclimatação ao ambiente, em gaiolas de crescimento individuais, durante 8 dias, em dieta não purificada de fórmula fechada Nuvital® para ganho de peso; em seguida, foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos experimentais, com 16 animais por grupo; os mesmos permaneceram por 4 dias em adaptação recebendo dieta basal e, ao final desse período, era feito o alinhamento do peso, retirando 4 animais por grupo, que foram sacrificados para análise lipídica do sangue e fígado; essa análise foi considerada "valor de referência" e denominada "Tempo 0". Permaneceram 64 animais (16 animais por grupo) dos quais, após 30 dias de experimento foram retirados 8 animais por grupo, para análise de sangue e fígado, denominado "Tempo 1", e, após 15 dias, foi feita mais uma análise, denominada "Tempo 2", nos animais restantes por grupo, para as avaliações dos perfis lipídicos sérico e hepático, dos lípides totais, ácidos graxos poliinsaturados ômega-3 e dosagem de vitamina E, como também a ação antioxidante da vitamina E. Os animais foram suplementados por gavagem, durante 45 dias consecutivos, por via oral. Os grupos experimentais, em estudo, foram divididos de acordo com a quantidade de suplemento com e sem vitamina E: GRUPO 1 - Controle - suplementação com 2 g/dia de óleo de soja; GRUPO 2 - Suplementação com 2 g/dia de ácidos graxos ômega-3 da marca A, com vitamina E (120 mg/dia); GRUPO 3 - Suplementação com 2 g/dia de ácidos graxos ômega-3 da marca B, sem vitamina E; GRUPO 4 - -Suplementação com 2 g/dia de ácidos graxos ômega-3 da marca B, sem vitamina E, por um período de 30 dias e posteriormente durante 15 dias, suplementação com vitamina E (marca C - 400 mg de acetato de DL-?- tocoferol). Nesse grupo, não houve sacrifício de animais no Tempo 1. No que diz respeito ao efeito antioxidante da vitamina E, nos teores de índice de peróxido (IP) e substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), observou- se que, nos grupos experimentais que receberam suplementação de AGPI ?-3 sem vitamina E, os teores de índice de peróxido e também os teores de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico apresentaram valores muito superiores do que nos grupos experimentais que receberam suplementos de AGPI (?-3 com vitamina E. Assim, verificou-se que a vitamina E mostrou uma proteção efetiva contra a oxidação lipídica, em ratos Wistar, suplementados com produtos à base de ácidos graxos poliinsaturados (AGPI) ômega-3 (? - 3). Observou-se que não houve diferença significativa (p>0,05), nas médias no consumo de dieta (g) e do ganho de peso (g), entre os grupos em estudo, mostrando que as suplementações à base de ácidos graxos poliinsaturados ?-3, com e sem vitamina E, não interferiram nessas variáveis; que o tempo de suplementação com ácidos graxos poliinsaturados ômega-3 não foi capaz de melhorar o perfil lipídico sérico dos ratos, observando-se apenas uma redução dos teores de LDL-colesterol sérico dos ratos. A suplementação com ácidos graxos poliinsaturados ômega-3 não reduziu os teores hepáticos do colesterol total e triacilgliceróis dos ratos. Com relação à variação dos teores no sangue e no figado dos ácidos graxos saturados, monoinsaturados e poliinsaturados, observou-se que, ao longo da suplementação de 45 dias com AGPI ?-3, houve um aumento nos teores de ácidos graxos saturados palmítico, esteárico e dos insaturados, ácido oléico, ?-linolênico e DHA. A adição da vitamina E não interferiu nos teores encontrados. Tendo em vista os resultados encontrados, fica a recomendação de que, ao fazer uso de suplementação com ácidos graxos poliinsaturados ômega-3, sob forma concentrada em cápsulas gelatinosas, a mesma deve estar associada com vitamina E, para evitar os riscos de oxidação ao nível celular e, com isso, causar efeitos danosos a saúde

Resumo: As disfunções metabólicas causadas pelo desequilíbrio da microbiota intestinal estão sendo associadas ao consumo de alimentos industrializados. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar espécies de bactérias probióticas e a ação "in vitro" de aditivos alimentares usados como conservadores e edulcorantes, bem como possíveis substitutos destes aditivos, como cascas de frutas e óleos essenciais. A ação sobre o crescimento das bactérias foi investigada através de teste turbidimétrico, pela concentração inibitória mínima (MIC) e concentração bactericida mínima (MBC). Em seguida, as culturas probióticas foram expostas aos compostos com maior ação antimicrobiana e submetidas a cultivo em meio com inulina para investigação da produção de ácidos graxos de cadeia curta (acetato, propionato e butirato), que foram analisados em cromatografia líquida. Os resultados obtidos mostraram que os conservadores sorbato de potássio (25 mg/mL), benzoato de sódio (5 mg/mL), bissulfito de sódio (0,7 mg/mL) e 1,5 mg/mL dos óleos essenciais de canela (Cinnamomum zeilanicum), cravo (Eugenia caryophyllata), orégano (Origanum vulgare) e capim-limão (Cymbopogon citratus) apresentaram maior ação antimicrobiana sobre as espécies estudadas. Lacticaseibacillus rhamnosus foi avaliada quanto à atividade metabólica por citometria de fluxo, o que demonstrou que o sorbato de potássio causou injúria e morte em 35% da população e redução da produção de ácidos graxos de cadeia curta. A sacarina, um dos edulcorantes avaliados, apresentou ação antimicrobiana na concentração de 5 mg/mL, e reduziu a produção de ácidos graxos de cadeia curta pelas espécies Lactococcus lactis, Lactobacillus acidophilus e L. rhamnosus. O óleo essencial de canela apresentou o menor valor de MIC, de 0,31 mg/mL, para Bifidobacterium longum. Este óleo essencial causou injúria em 27% das células de L. rhamnosus e diminuição da produção de ácidos graxos de cadeia curta em L. rhamnosus, Lactobacillus acidophilus e Lactococcus lactis. Em relação aos extratos, a casca de melancia (Citrullus lanatus) agiu sobre L. acidophilus, L. rhamnosus e B. longum com inibições, avaliada pelo teste turbidimétrico, de 13, 10 e 24%, e na produção de ácido acético de 62, 90 e 17%, respectivamente. Assim, este extrato foi selecionado para identificação de sua composição química. Por fim, o óleo essencial de cravo apresentou maior concentração de compostos fenólicos, com 902,6 mg Equivalente Ácido Gálico (EAG)/ g amostra. A análise química do extrato etanólico da casca de melancia mostrou a presença de 19 compostos fenólicos dentre 49 moléculas principais encontradas, sendo a concentração deste componente de 11,7 mg EAG/g de amostra

Resumo: o objetivo do presente trabalho foi avaliar a atividade esporicida do peróxido de hidrogênio sobre bolores isolados de laminado para a confecção de embalagens destinadas ao envase asséptico de polpa de tomate. ¿Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital

Resumo: O açúcar não centrifugado (ANC), também chamado de rapadura no Brasil ou panela na Colômbia, é tradicionalmente consumido como doce e/ou adoçante nas regiões que cultivam cana de açúcar e comercializado em forma de bloco ou granulado. Além do tratamento térmico (120-132 °C) como uma das etapas de produção, o caldo extraído da cana contém açúcares redutores e aminoácidos na composição, os quais favorecem a reação de Maillard resultando na formação de acrilamida, um composto potencialmente carcinogênico e genotóxico. Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar os níveis de acrilamida em amostras de ANC comercializadas em diferentes países da América Latina, incluindo Brasil, Colômbia, Equador, México, Bolívia e Peru. Para isso, um método analítico baseado no preparo de amostra QuEChERS e cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas sequencial (LC-MS/MS) foi validado, o qual apresentou limite de detecção (LOD) e limite de quantificação (LOQ) de 10 e 20 ?g kg-1, respectivamente, recuperações entre 84,3 e 107,5%, além de coeficientes de variação abaixo de 15%, sob condições de repetibilidade e reprodutibilidade. As 76 amostras de ANC analisadas apresentaram níveis de acrilamida que variaram entre <20 e 1414 ?g kg-1. As concentrações mais altas foram encontradas nas amostras do Peru, Equador e Colômbia com médias de 636 ± 418, 446 ± 337 e 401 ± 278 ?g kg-1, respectivamente. As amostras comercializadas em forma granulada apresentaram uma média maior de conteúdo de acrilamida (517 ± 313 ?g kg-1) quando comparadas com as de bloco (294 ± 262 ?g kg-1). Além disso, as amostras da Colômbia classificadas como orgânicas apresentaram valores maiores (721 ± 217 ?g kg-1) quando comparadas com as convencionais (363 ± 261 ?g kg-1). As diferenças no nível de acrilamida nas amostras podem ser atribuídas a diversos fatores, como o tempo e temperatura utilizados no processo de elaboração, a composição inicial da cana de açúcar e o tipo de aglutinante empregado. A ingestão de acrilamida no Brasil para grandes consumidores de ANC, como o Estado do Ceará, foi estimada em 0,02 ?g kg-1 de peso corpóreo (pc) dia-1, enquanto que na Colômbia, crianças entre 1 e 4 anos da região Central apresentaram ingestão de 3,52 ?g kg-1 pc dia-1 no percentil 95. Embora este contaminante não deva representar uma preocupação em relação à neurotoxicidade, os valores da margem de exposição para efeitos neoplásicos são baixos e sugerem atenção

Resumo: Uma importante descoberta de pesquisadores suecos em abril de 2002 mostrou que acrilamida, uma substância provavelmente carcinogênica a seres humanos, pode ser formada em determinados alimentos que são submetidos a tratamento térmico em altas temperaturas. No presente estudo, 111 amostras de diferentes categorias de alimentos foram coletadas em supermercados, lojas de ¿fast-foods¿ e restaurantes da cidade de Campinas-SP, entre os meses de setembro de 2004 e abril de 2006, e analisadas para verificar a presença de acrilamida. As amostras foram selecionadas em função dos resultados divulgados por outros países e incluíram, além de produtos à base de batata, trigo e café, alimentos tipicamente brasileiros à base de mandioca e milho, processados em altas temperaturas. Os níveis de acrilamida foram determinados por cromatografia líquida de alta eficiência e espectrometria de massas em série (LC-MS/MS), conforme método previamente desenvolvido. Como a aplicação deste método em matrizes de cacau não apresentou resultados satisfatórios, o mesmo foi modificado através da inclusão de uma etapa de precipitação de proteínas e de alterações no procedimento de limpeza, o que resultou em melhor desempenho nesta matriz. As concentrações de acrilamida determinadas nas amostras analisadas confirmam que produtos à base de batata, tais como batatas fritas e batatas chips, biscoitos e café são os alimentos que apresentam os maiores níveis de acrilamida. Em etapa posterior, a ingestão potencial diária deste contaminante foi estimada combinando-se os dados analíticos de ocorrência de acrilamida obtidos no presente estudo com dados de consumo dos alimentos analisados, disponíveis para a população em geral e para uma população de adolescentes da cidade de Piracicaba-SP. Os valores médios de ingestão estimados para ambas as populações (0,14 e 0,12 µg/kg de peso corpóreo/dia, respectivamente) são inferiores aos valores relatados para populações de países da América do Norte e Europa (0,3 a 2 µg/kg de peso corpóreo/dia), o que pode ser parcialmente atribuído ao fato de que as estimativas de ingestão nestes países levaram em conta a contribuição de um maior número de alimentos. Dessa forma, é importante que mais amostras e grupos de alimentos sejam investigados para que, futuramente, possa ser calculada a contribuição da dieta total como fonte de acrilamida para a população brasileira e avaliados os possíveis riscos à saúde relacionados à exposição a este contaminante

Resumo: O objetivo desse estudo foi avaliar a migração de compostos das mamadeiras, por meio da cromatografia líquida, gasosa e da espectroscopia, acopladas a espectrometria de massas de alta e baixa resolução. Foram avaliadas 196 amostras de mamadeiras fabricadas com polipropileno (n = 127), Tritan® (n = 49) e silicone (n = 20). O trabalho está dividido em quatro capítulos. O primeiro trata da caracterização das mamadeiras, da avaliação da migração específica de ftalatos por GC-MS utilizando fórmula infantil e simulante de leite (etanol 50%), bem como da avaliação da migração de metais por ICP-OES em simulante de alimentos ácidos (ácido acético 3%). A migração de metais não foi detectada. Por outro lado, em todas as amostras foi detectada a migração de dibutil ftalato (DBP). Na amostra de silicone a migração de DBP foi superior aos valores preconizados pela ANVISA. Di-isobutil ftalato, um plastificante não regulamentado para uso em mamadeiras, também foi detectado em altas concentrações nas amostras de silicone. A avaliação de risco para ftalatos demonstrou que há um potencial de efeito adverso associado ao uso das mamadeiras de silicone. O segundo capítulo trata da migração de aminas aromáticas das mamadeiras por LC-MS/MS, bem como da migração de metais a partir dos bicos, avaliada por ICP-MS e N-nitrosaminas, determinada por GC-MS. Não foi detectada a migração de aminas aromáticas e N-nitrosaminas. Por outro lado, zinco e bário, foram quantificados em 91% das amostras analisadas. Chumbo foi detectado em 16% dos bicos avaliados. Os metais migraram abaixo dos limites de migração específica preconizados pela ANVISA. No terceiro capítulo foi realizada a avaliação de compostos não voláteis, não intencionalmente adicionadas, utilizando UPLC-Q-TOF-MS. Em mamadeiras de polipropileno e Tritan® foram identificadas somente substâncias adicionadas intencionalmente (aditivos e auxiliares de processamento). Em todas as mamadeiras de polipropileno foi detectada a migração de N,N'-bis(2-hidroxietil)alquil(C8-C18)amina. Além disso, foram identificados derivados de glicerol, erucamida e NX 8000, um clarificante a base de nonitol. Todos os compostos migraram abaixo dos limites de migração específica preconizados pela ANVISA. Por outro lado, nas mamadeiras de silicone, foram identificados 17 compostos não intencionalmente adicionados. A maioria dos compostos eram derivados de acrilatos e propileno glicol. N-acetil valina também foi identificado nessas amostras. Os compostos foram quantificados e uma vez que não são contemplados nas listas positivas da ANVISA, a abordagem do limiar de preocupação toxicológica (Threshold of Toxicological Concern - TTC) foi utilizada para avaliar o risco de exposição associada a migração destas substâncias das mamadeiras de silicone. Mais uma vez, foi constatado que há um potencial de efeito adverso associado ao uso das mamadeiras de silicone. Por fim, no último foram avaliadas substâncias voláteis utilizando micro extração em fase sólida (solid phase micro-extration - SPME) e cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas e à olfatometria (SPME-GC-O-MS). Quarenta e cinco compostos foram identificados, dos quais 84% eram provenientes das mamadeiras de silicone. Aldeídos foram os principais compostos responsáveis pelo odor desagradável da mamadeira de silicone. Odores de cetonas, derivados de benzofenona e álcoois também foram identificados por GC-O-MS, no entanto foram detectados em concentrações abaixo do limite de quantificação do método desenvolvido

Resumo: O leite cru é a base para a formulação de diversos produtos, o que torna o microbioma inicial a principal preocupação da cadeia láctea. As bactérias que permanecem nas fábricas de leite ultra alta temperatura (UAT) influenciam os parâmetros já estabelecidos para o processamento em laticínios, tais como o tempo, temperatura, tratamentos de inativação bacteriana e etapas de limpeza. Embora o tratamento UAT seja capaz de eliminar a maioria das células vegetativas, bacilos esporulados geralmente permanecem em superfícies abióticas, principalmente porque se aderem facilmente ao aço inoxidável. Neste contexto, o trabalho inicial desta tese foi coletar dados sobre a diversidade de bactérias aeróbias formadoras de esporos em leite UAT comercializado no Brasil, explorando 100 amostras (leite desnatado e integral). Foi possível identificar 12 Bacillus cereus que foram isolados de 7 amostras, 38 Bacillus sporothermodurans de 19, e 47 Geobacillus stearothermophilus de 27 amostras. Em seguida observamos a motilidade e formação de biofilme em microplacas após 24 horas. A maioria dos isolados foi capaz de formar biofilmes e os valores em densidade ótica OD595 na formação de biofilme variaram de 0,14 a 1,04 para B. cereus, 0,20 a 1,87 para B. sporothermodurans, e 0,49 a 2,77 para G. stearothermophilus. Na próxima etapa, focamos em entender como é a formação de biofilme de B. sporothermodurans sobre aço inoxidável durante o período de 10 dias. A adesão e formação de biofilme foram comparadas em diferentes condições quando expostas às proteínas do leite (soro e caseína). Microscopia eletrônica de varredura (MEV) foi utilizado para avaliar arquitetura do biofilme em aço inoxidável e o espectroscopia de fotoemissão por raio-X (XPS), como técnica complementar, sondou o condicionamento da superfície do substrato após 24 h. As proteínas afetaram a contagem bacteriana total nos biofilmes e influenciaram a arquitetura do biofilme. Assim, este é o primeiro trabalho sobre ciclo de vida do biofilme B. sporothermodurans sob a influência das proteínas do leite (soro de leite e caseínas). Por fim, tratamentos enzimáticos e químicos foram avaliados como estratégia para prevenir e reduzir o impacto prejudicial desses biofilmes na indústria de laticínios. Esses tratamentos enzimáticos e químicos foram eficazes na redução de biofilmes de B. sporothermodurans. Os dados obtidos nesta tese evidenciam que as indústrias de laticínios precisam controlar a qualidade da matéria prima, a eficiência dos processos térmicos e dos procedimentos de limpeza e sanitização; reduzindo a contaminação do produto e evitando a formação de biofilme e, consequentemente, uma microbiota persistente nas plantas de processamento, que podem abrigar espécies patogênicas como B. cereus s.s.

Resumo: Um recente relato da presença de Aspergillus flavus e Aspergillus parasiticus em polpa de tomate industrializada brasileira motivou preocupações quanto a possível presença de micotoxinas em produtos de tomate nacionais. Aspergillus fIavus e Aspergillus parasiticus são conhecidos produtores de aflatoxinas, uma família de toxinas com propriedades hepatotóxicas, mutagênicas, teratogênicas e carcinogênicas. No presente trabalho foi adaptado e avaliado um método para determinação de aflatoxinas em produtos de tomate por cromatografia de camada delgada com detecção por comparação visual com padrões. Para verificar a possível contaminação de produtos de tomate comercializados com aflatoxinas foram analisadas 63 amostras de produtos de tomate (polpa, extrato, purê, catchup, tomate desidratado e tomate seco conservado em óleo) provenientes de 5 Estados e uma do exterior, compreendendo 29 marcas. A avaliação do método para determinação das aflatoxinas em produtos de tomate resultou em uma recuperação médía de 86%, para as quatro aflatoxinas, em dois níveis de adição. Os limites de detecção para as aflatoxinas B1, B2, G1 e G2 variaram entre 2 e 7 mg/Kg dependendo do tipo de produto. As aflatoxinas não foram detectadas em nenhuma das amostras analisadas

Resumo: Alimentos tipo hambúrguer à base de plantas (AHBP) são considerados produtos alternativos aos hambúrgueres convencionais à base de carne (HCBC), pois apresentam características organolépticas e/ou químicas similares a eles. Porém, ainda não está clara sua contribuição no aporte nutricional, principalmente de elementos essenciais, que podem variar devido a matéria prima utilizada na formulação. Portanto, o objetivo geral do estudo foi investigar AHBP em 3 etapas: análise da formulação, rotulagem e composição nutricional de produtos disponíveis no comércio online e tradicional brasileiro e comparação com HCBC; validação de um método alternativo de mineralização das amostras para avaliar o teor de elementos essenciais (Ca, Mg, Fe, Zn, Cu, Mn, Na e K) em produtos de cogumelo, ervilha, grão-de-bico e soja; execução de ensaios de digestão in vitro, com o protocolo INFOGEST 2.0, para estimar a bioacessibilidade dos elementos essenciais e verificar a presença e influência de inibidores de absorção no potencial nutricional desses produtos. Os 119 AHBP avaliados na etapa 1, apresentaram variações para a composição de ingredientes, alegações nutricionais, certificações e preços, sendo agrupados em 10 tipos: soja, grão-de-bico, ervilha, feijão, cogumelos, lentilha, berinjela, cenoura, "misturas" e "outros". Os tipos soja, ervilha e "misturas", apresentaram maiores teores de proteínas, gorduras e sódio, o de lentilha se destacou quanto ao teor de fibras e os demais tipos para o teor de carboidratos. Quando comparados aos HCBC, somente o tipo ervilha foi nutricionalmente similar a eles. Na etapa 2, a mineralização das amostras em micro-ondas de uso analítico, usando ácido nítrico diluído e peróxido de hidrogênio para posterior determinação dos elementos por espectrometria de absorção atômica em chama (FAAS), resultou em um método mais eficiente. Além disso, todos os parâmetros testados na validação apresentaram resultados satisfatórios. Os 4 tipos de AHBP analisados, foram considerados fonte de pelo menos dois elementos essenciais, com exceção do Ca, sendo o produto de soja o único considerado fonte de Mg, Fe, Zn, Mn e K. Quanto aos elementos Na, Fe e Zn, os teores declarados na tabela nutricional não seguem as legislações brasileiras vigentes. Na etapa 3, os conteúdos bioacessíveis de Ca, Mg, Zn e Mn, para a marca 1 do produto de grão-de-bico, foram os maiores entre os AHBP. Sobre os elementos, o Mg foi o único que apresentou conteúdo bioacessível em todas as amostras analisadas. Os taninos condensados, apresentaram concentrações abaixo do limite de quantificação (LQ) para todas as amostras, enquanto que teores de ésteres de mio-inositol fosfato variaram de

Resumo: No presente trabalho foram desenvolvidos e avaliados dois métodos, sendo um para determinação de alternariol (AOH) e alternaria! monometil éter (AME) e outro para determinação de ácido cíclopiazônico (CpA) e ácido tenuazôiúco (TeA), em produtos de tomate por cromatografia líquida de alia eficiência utilizando detector espectrofotométrico de arranjo de diodos para quantificação e confirmação da identidade das toxinas. No método para AOH e AME os limites de detecção foram de 5,0 e 2,0 ng/g e as recuperações médias foram de 84,1 e 98,7%, respectivamente. Os desvios padrões relativos de diferentes preparações da mesma amostra variou de 0,1 a 14,6% para AOH e de 0,2 a 1,8% para AME. No método para CpA e TeA os limites de detecção foram de 8,0 e 11,0 ng/g e as recuperações médias foram 75,7 e 83,3%, respectivamente. Os desvios padrões relativos de diferentes preparações da mesma amostra variou de 1,1 a 23,9% para TeA e de 3,9 a 20,0% CpA. Oitenta amostras de produtos de tomate foram adquiridas no comércio varejista de Campinas , S.P. e analisadas para as quatro toxinas empregando os métodos desenvolvidos. Onze marcas nacionais foram avaliadas e todas comercializadas a nível nacional. As amostras de suco de tomate (onze), extrato de tomate (vinte quatro) e tomates pelados (um) não apresentaram contaminação por nenhuma das quatro micotoxinas. Das 22 amostras de polpa de tomate, seis estavam contaminadas com CpA (64 a 178 ng/g) e sete estavam contaminadas com TeA (45 a 129 ng/g). Nas 22 amostras de purê de tomate a contaminação por TeA (34 a 88 ng/g) e CpA (37 a 117 ng/g) foi detectada em quatro e duas amostras, respectivamente. AME e AOH não foram detectados em nenhuma das amostras. A confirmação da identidade foi obtida pela comparação do espectro dos compostos puros com o espectro dos picos suspeitos na amostra

Resumo: Este trabalho teve como objetivo a investigação da influência do processamento (cozimento e conserva) na bioacessibilidade de aminoácidos e aminas bioativas em cogumelos Agaricus bisporus. Para tal, foi otimizado um método para análise simultânea de aminoácidos e aminas bioativas livres em cogumelos com derivatização pré-coluna com carbamato de 6-aminoquinolil-N-hidroxysuccinimidil (Accq), separação por UPLC e detecção no UV (249 nm). A extração destes analitos foi otimizada usando delineamentos Plackett-Burman e composto central rotacional (DCCR). O método otimizado foi validado de acordo com as diretrizes da Comunidade Europeia referente a norma 657/2002 e foi rápido, fácil, preciso, sensível e confiável, adequado ao propósito. O cogumelo Agaricus bisporus (n=9) foi caracterizado pela presença de 15 aminoácidos livres, apresentando o teor total de aminoácidos livres igual a 470,0 mg/100g e apenas uma amina ¿ espermidina foi detectada (7,8 mg/ 100g). Alanina, ácido glutâmico e prolina foram os aminoácidos livres predominantes nesses cogumelos. O processamento doméstico ¿ cozimento, não afetou o conteúdo de espermidina, entretanto houve perda significativa (14 a 23%) para o produto em conserva. Em relação aos aminoácidos totais, houve uma perda média de 39,7% no cozimento e 64,6% na conserva. As perdas de aminoácidos variaram em função do tratamento. O processamento não afetou o percentual de hidrólise proteica dos cogumelos. Análises de componentes principais e agrupamentos hierárquicos mostraram que a hidrólise de proteínas nos cogumelos processados é muito pequena na fase gástrica. O teor de espermidina permaneceu o mesmo após a digestão in vitro. Embora os cogumelos apresentem baixo teor de proteínas, o processo de digestão é capaz de liberar grande parte dos aminoácidos da proteína. Os dados de bioacessibilidade de espermidina em A. bisporus, podem aumentar o valor biológico deste alimento

Resumo: O aprofundamento do estudo relativo aos compostos naturais com propriedades antioxidantes e antimicrobianas em cogumelos torna-se extremamente relevante tendo em vista a possibilidade de esses compostos serem empregados nas indústrias de alimentos, farmacêutica e de cosméticos. No entanto, não foram encontrados relatos sobre o perfil fenólico de cogumelos comestíveis produzidos no Brasil assim como também não foram encontrados trabalhos que utilizassem quatro ensaios diferentes para avaliar o potencial antioxidante dos cogumelos. Portanto, o objetivo desse trabalho foi avaliar o teor de compostos fenólicos e a capacidade antioxidante e antimicrobiana de 4 espécies de cogumelos comestíveis (A. bisporus, P. ostreatus, P. ostreatoroseus e L. edodes) produzidas no Brasil. Os compostos fenólicos totais (CFT) foram determinados pelo método de Folin-Cioacalteu e a identificação e quantificação individual dos fenólicos foi realizada por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). A atividade antioxidante foi avaliada por quatro métodos: DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidrazila), ABTS+¿ [2,2¿-azino-bis (3-etilbenzo-tiazolina-6-sulfonato)], FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power) e ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity). O potencial antimicrobiano dos extratos foi avaliado através da concentração mínima inibitória (CIM). Todos os resultados obtidos para as diferentes análises foram analisados levando em consideração o período de colheita, os diferentes processamentos, graus de maturação e substratos de cultivo. No ensaio com o radical DPPH¿ o cogumelo que apresentou maior atividade antioxidante foi o Champignon de Paris (fresco). Já no ensaio com o radical ABTS+¿ e no ORAC os cogumelos que apresentaram maior ação antioxidante foram o Hiratake, o Shimeji (fresco), o Salmon e o Portobello. No ensaio FRAP o Portobello mostrou a maior atividade antioxidante. Os valores médios de CFT variaram entre 0,78 e 10,85 mg EAG/g de amostra liofilizada. Os cogumelos que apresentaram os maiores teores de CFT para o cultivo de verão e de inverno, respectivamente, foram o Hiratake com 10,09 mg EAG/g e 8,45 mg EAG/g, Salmon com 9,61 mg EAG/g e 9,45 mg EAG e Portobello com 9,07 mg EAG/g e 9,60 mg EAG. O processamento empregado ao cogumelo Champignon de Paris diminuiu consideravelmente o teor de CFT (de 7,04 mg EAG/g para 0,90 mg EAG/g - cultivo de verão) enquanto que no processo de secagem empregado ao cogumelo Shimeji não houve diminuição drástica no teor de CFT (de 8,83 mg EAG/g para 7,62 mg EAG/g - cultivo de verão). O grau de maturação influenciou no teor final de CFT mostrando que o Shimeji, colhido em estágio imaturo, possui menor teor de CFT (8,83 mg EAG/g ¿ cultivo de verão e 7,24 mg EAG/g ¿ cultivo de inverno) em comparação ao Hiratake, colhido em estágio mais maturo. Correlações positivas entre os resultados de CFT e os métodos de atividade antioxidante foram encontradas, e essa correlação foi maior para o ensaio com o radical livre ABTS¿+ e o ORAC (r = 0,92 e r = 0,89, respectivamente) do que para o ensaio FRAP (r = 0,45). Já entre o DPPH e os resultados de CFT foi encontrada baixa correlação negativa (r = -0,14). Dentre os compostos investigados por CLAE foram identificados e quantificados apenas os ácidos siríngico, p-cumárico e o trans-cinâmico, com predominância deste último. No ensaio antimicrobiano realizado verificou-se que o crescimento das leveduras C. albicans, C. rugosa, C. tropicalis, C. glabrata e C. utilis foi fortemente inibido pelos extratos aquosos dos cogumelos Shiitake (tora e composto), com CIMs variando entre 0,08 e 0,31 mg/mL. Estes resultados demonstram que os cogumelos comestíveis possuem grande potencial de utilização pela indústria farmacêutica e podem contribuir significativamente para uma boa condição de saúde devido à presença de antioxidantes

Resumo: A presença de resíduos de antibióticos no leite resulta da aplicação de diferentes substâncias antimicrobianas no gado leiteiro para o tratamento de infecções e uso profilático na prevenção de doenças e como aditivos adicionados à ração para promover o crescimento do animal. A utilização indiscriminada dos antibióticos pode estar associada à presença de resíduos no leite e em seus derivados acima dos Limites Máximos de Resíduos (LMR) permitidos. A demanda por um controle da qualidade deste produto levou a necessidade de métodos analíticos confiáveis que permitam avaliar o teor desses resíduos, visando garantir a qualidade dos alimentos, a segurança do consumidor e o reconhecimento mútuo a nível internacional. Esta pesquisa descreve o procedimento de validação intralaboratorial de um método para identificar e quantificar resíduos de anfenicóis e de treze antibióticos da classe dos B-lactâmicos em leite UHT e em pó integrais por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada ao espectrômetro de massas (CLAE/EM), de acordo com os critérios de validação preconizados pela Diretiva 2002/657/EC. Foram analisadas 475 amostras de leites integrais UHT e 140 em pó, perfazendo um total de 615 amostras. A coleta foi realizada pela Vigilância Sanitária dos estados de MG, RJ, SP, PR, RS, SC, ES, GO, MS, BA, PA e RO no período de julho/2006 a junho/2007. As amostras foram previamente submetidas ao ensaio de Kit SNAP e Kit ELIZA para cloranfenicol e B-Lactâmicos, respectivamente. O método por CLAE/EM foi utilizado para confirmar quantitativamente os antibióticos cloranfenicol, tianfenicol e florfenicol, e qualitativamente os B-lactâmicos (ampiclina, amoxicilina, cloxacilina, dicloxacilina, oxacilina, penicilinas G e V, cefapirina, cefalotin, cefazolin, cefoperazone e ceftiofur). Observou-se que 0,65% do total de amostras de leite UHT foram confirmadas, enquanto na triagem 4,11% foram reagentes. Para o leite em pó somente 1,44% do total de amostras foram confirmadas para florfenicol, enquanto na triagem 30,9% das amostras foram reagentes. Na triagem foi detectada a presença de resíduos de ß-lactâmicos em 3 amostras de leite UHT e 3 amostras de leite em pó. Em todas foi confirmada a presença do resíduo de cefapirina, representando, respectivamente, 0,65% e 2,14% do total das amostras. Os resultados mostraram que o método desenvolvido apresentou eficiência satisfatória ao uso pretendido

Resumo: A mastite bovina é a doença que mais afeta a indústria leiteira no Brasil e no mundo. O gênero "Streptococcus" é considerado um dos principais responsáveis por desencadear tal doença nos rebanhos e "Aerococcus viridans" vem se mostrando uma espécie emergente dentro do âmbito da mastite. Além disso, a composição rica em nutrientes do leite bovino pode favorecer o desenvolvimento de comunidades bacterianas diversas. O objetivo do presente estudo foi avaliar e correlacionar a incidência de "Streptococcus" spp. e "Aerococcus viridans" em amostras de leites de vacas mastíticas e sadias provenientes de fazendas localizadas nas cinco regiões do Brasil, além de verificar e comparar a diversidade bacteriana presente em amostras de leite de tanque, considerando também as diferentes regiões do país, por meio do Sequenciamento de Nova Geração (NGS) do gene 16S rRNA. Do total de 1.447 amostras de leites coletadas nos estados de Santa Catarina, São Paulo, Goiás, Paraíba e Pará, 720 foram provenientes de vacas saudáveis (49,7%), 529 de vacas com mastite subclínica (36,6%) e 198 com mastite clínica (13,7%). Deste total, foram identificados 32 (2,2%) isolados confirmados de Streptococcus, sendo 16 (50%) S. agalactiae, dez (31,3%) S. uberis, cinco (15,6%) S. dysgalactiae e um (3,1%) S. equinus. O estado da Paraíba apresentou o maior número de isolados de Streptococcus spp. (22/32) e a espécie S. uberis foi identificada em todos os estados. Estreptomicina (19; 59,4%) e tetraciclina (16; 50%) foram os antimicrobianos com as maiores porcentagens de isolados resistentes e foram encontrados 11 (34,4%) isolados multirresistentes. Nove isolados de S. agalactiae foram sequenciados, todos advindos do estado da Paraíba por serem considerados multirresistentes. As análises de MLST identificaram dois tipos sequenciais: ST-67 e ST-103. Além disso, foi identificada a presença de quatro genes de resistência a antimicrobianos (ant(6)_Ia_3, tet(O)_3, mre(A)_1 e erm(B)_18) e 77 genes de virulência (acpC, bca, cap8J, carB, ccpA, cfa/cfb, ciaR, clpP, cpsABCDEFGKLY, csrRS, cydA, cylABDEFGIJKXZ, fba, fbsA, gbs1402, gbs1529, glnA, guaA, hasC, hylB, lepA, leuS, lgt, luxS, murF, neuABCD, pbp1A, pepCNX, psaC, purBHLN, rpoE, SAK_0517, scrB, sodA, SP_0095, SP_0121, SP_0320, SP_0494, SP_0829, SP_0856, SP_0943, SP_1396, SP_1398, SP_1399, SP_1544, SP_1847, SP_1970, vicK). Foram encontrados 15 (1%) isolados de Aerococcus viridans, a maioria considerados sensíveis aos antimicrobianos testados. Para o estudo do microbioma, 57 amostras de leite de tanque dos estados de Santa Catarina, São Paulo, Minas Gerais, Goiás, Maranhão, Pará e Tocantins foram sequenciadas por metagenômica a partir de NGS. Moraxellaceae (22,3%), Streptococcaceae (14,1%), Acetobacteraceae (13,8%), Pseudomonadaceae (11,0%) e Enterococcaceae (9,0%) foram as principais famílias. Acinetobacter (22,3%), Pseudomonas (11,7%) e Acetobacter (8,1%) foram os principais gêneros. Os resultados obtidos reforçaram os potenciais patogênicos do gênero "Streptococcus" sp. e da espécie "Aerococcus viridans" como responsáveis por desencadear mastite em bovinos de leite. Além disso, o rastreamento de bactérias em leite de tanque permitiu traçar as melhores estratégias de prevenção e controle das contaminações

Resumo: O trabalho foi conduzido no sentido de se estudar a estabilidade e verificar a cinética de perda de vitamina C em diferentes processos, utilizando-se como, matéria prima, vegetais selecionados: couve, couve-flor e pimentão. Foram feitos diferentes tipos de cozimento (água, vapor e microondas) e estocagem (temperatura ambiente, refrigerada e congelada), variando-se os tempos e condições de processamento. Foi constatado que as perdas de vitamina C nos produtos, durante o cozimento em água, foram, quase que exclusivamente, devidas à solubilização, havendo, em alguns casos, pequena perda por degradação. No caso de couve, após um período determinado durante o qual ocorreram perdas (10 minutos), o teor de vitamina C no produto se estabilizou. O aumento na proporção de água: vegetal também provocou uma elevação nas perdas. Foi observada uma menor retenção de vitamina, quando os cozimentos foram realizados em recipientes de alumínio e aço inox em comparação com material inerte (pirex). Não foi observado aumento nas perdas pela utilização de água de torneira ao invés de água destilada. Para cozimento em vapor foram encontradas menores perdas do que as constatadas no cozimento em água, não sendo, nesse caso, devidas à solubilização. Essa perdas foram atribuídas à presença de oxigênio, em contato com o tecido cortado, sob alta temperatura. O cozimento em microondas mostrou perdas inferiores às observadas nos outros dois processos. Essas perdas foram devidas à degradação enzimática, uma vez que foi constatada atividade enzimática nos primeiros minutos de cozimento, e térmica, em consequência das altas temperaturas alcançadas nesse processamento. Para os três tipos de cozimento foi observada que as perdas seguiram uma cinética de primeira ordem. A estocagem de produtos crus à temperatura ambiente comprovou que o teor de vitamina C, em vegetais, pode ser utilizado como um eficiente índice de qualidade, uma vez que foi constatado que as perdas de vitamina C estavam correlacionadas à perda de qualidade geral do produto (textura, aparência). A estocagem, em geladeira, de produtos vegetais crus mostrou uma situação muito semelhante à descrita para os mesmos produtos à temperatura ambiente, mas com perdas muito mais lentas de vitamina C e de fatores de qualidade, devido ao abaixamento da temperatura. A estocagem de vegetais branqueados em geladeira mostrou perdas muito mais acentuadas do que as observadas para vegetais crus. Vegetais crus estocados em freezer tiveram perdas expressivas de vitamina devido ao dano provocado nos tecidos pelo processo de congelamento, que pode ser observado no experimento. Para vegetais branqueados, foram observadas perdas muito baixas durante a estocagem congelada. Em termos analíticos, foi, ainda, confirmada a possibilidade de se utilizar o ácido oxálico ao invés de ácido metafosfórico como solução de extração, com economia significativa no custo da análise.