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Resumo: Estudos recentes mostraram a eficácia dos derivados de E/Z-3-(4'-bromo-[l, l' -bifenil]-4-il)-( 4-X-fenil)-N,N -dimetil-2-propeno-1-amina sobre as três formas do protozoário Trypanosoma cruzi, agente causador da doença de Chagas. O derivado não-substituído (X=H) foi um dos mais ativos e menos tóxicos desta série. Neste trabalho, o composto (X=H) foi preparado e seus isômeros Z e E foram isolados por cromatografia de camada delgada preparativa para a realização dos ensaios biológicos. O isômero Z foi mais ativo que o E sobre formas tripomastigotas do T. cruzi. Nos ensaios de quantificação de DNA (DNA) e de redução do sal de tetrazólio (MTT), usando células fibroblásticas V79, o isômero Z foi o mais tóxico. No método de incorporação do corante vermelho neutro, a mistura isomérica e os isômeros isolados apresentaram toxicidades equivalentes. Os compostos foram mais tóxicos neste método em comparação com MTT e DNA. O isômero E foi o mais tóxico na avaliação da toxicidade aguda sobre a bactéria Escherichia coZi e sobre camundongos. Não houve alteração comportamental em camundongos tratados com a mistura I isomérica, em relação ao controle, no ensaio do Campo Aberto. Os estudos da atividade do composto (X=H) sobre o fungo Trichophyton rubrum e sobre epimastigotas do T. cruzi, sugerem a inibição da biossíntese do ergosterolcomo um possível mecanismo de ação tripanossomicida

Resumo: A 6-nitrodopamina (6-ND) é liberada dos vasos do cordão umbilical humano e modula a reatividade vascular agindo como um antagonista da dopamina. "Neste estudo, investigamos a liberação de 6-ND pelos vasos deferentes isolados de ratos e seu impacto nesse tecido. Utilizamos cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em tandem (LC-MS-MS) para quantificar os níveis de dopamina, noradrenalina, adrenalina e 6-ND nos vasos deferentes isolados de ratos. Realizamos estimulação por campo elétrico (EFS) e construímos curvas concentração-resposta para 6-ND, noradrenalina, dopamina e adrenalina, tanto na ausência quanto na presença (por 30 minutos) dos seguintes agentes: L-NAME, SCH-23390, haloperidol, PG-01037, sonepiprazol, desipramina, clomipramina, amitriptilina, ciclobenzaprina, carbamazepina, maprotilina, paroxetina, oxcarbazepina e cetanserina, nos vasos deferentes epididimais isolados de ratos (VDEIR). Liberações basais de 6-ND e noradrenalina foram detectadas nos vas deferens isolados de ratos. A liberação de 6-ND foi reduzida pela incubação de tecido com L-NAME e dos vas deferens obtidos de ratos tratados com L-NAME. SCH-23390 causou desvios para a esquerda nas curvas concentração-resposta para 6-ND sem afetar as contrações de VDEIR induzidas por dopamina ou EFS. Haloperidol, PG-01037 e sonepiprazol causaram desvios significativos para a direita nas curvas concentração-resposta à dopamina, mas não tiveram efeito nas contrações VDEIR induzidas por 6-ND ou EFS. Os compostos tricíclicos desipramina, clomipramina, amitriptilina, ciclobenzaprina e carbamazepina induziram desvios para a direita na curva concentração-resposta 6-ND, mas não reduziram as respostas contráteis de noradrenalina, dopamina e adrenalina. Também observamos uma redução nas contrações dos vasos deferentes epididimais isolados de ratos (VDEIR) induzidas por EFS no grupo controle, porém essa redução não foi observada nos tecidos obtidos de animais tratados com L-NAME...
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Resumo: As catecolaminas são compostos orgânicos que possuem, em sua estrutura, um grupo catecol (3,4-diidroxibenzeno) ligado por uma ponte de etil a um grupo de amina. São encontradas no sistema nervoso simpático, na medula adrenal, e estão distribuídas em várias regiões do sistema nervoso central, sendo as principais catecolaminas, dopamina, norepinefrina e epinefrina, formando uma classe de neurotransmissores químicos e hormonais. A dopamina é um neurotransmissor amplamente conhecido por seu papel nas funções cerebrais, no entanto, também foi demonstrado que a dopamina exerce efeitos inotrópicos positivos no coração, aumentando a força de contração. As nitrocatecolaminas são uma nova classe de catecolaminas. A primeira indicação de produção endógena de nitrocatecolamina surgiu ao se observar que os níveis de noradrenalina detectados por microdiálise do núcleo paraventricular hipotalâmico de ratos diminuíam após a perfusão do tecido com uma solução contendo óxido nítrico (NO). A 6-nitrodopamina (6-ND) também faz parte das novas catecolaminas e, através da utilização de espectroscopia de massa em tandem por eletropulverização positiva para HPLC (HPLC-MS/MS), foi identificada a liberação basal de 6-ND em diversos tecidos vasculares in vitro, como artéria e veia umbilical e poplítea humana, como, também, em aorta de Chenoidis carbonária, Pantheophi guttatus e Callitrix spp. Além dos tecidos vasculares, a liberação basal de 6-ND foi observada em átrio e ventrículo direito isolado de rato, camundongo e coelho, e ducto deferente isolado de rato e humano. O objetivo deste estudo foi investigar se a 6-ND é o agente endógeno mais potente em relação aos parâmetros de inotropismo positivo no coração isolado de rato. Para tanto, foram utilizados os ventrículos direito e esquerdo, isolados em bloco, de cada coração de rato, e suspensos em um banho de órgão de 5 mL contendo solução de Krebs-Henseleit (KHS; em mM: NaCl 118, KCl 4,7, CaCl2 2,5, MgSO4 1,7, NaHCO3 24,9, KH2PO4 1,2, dextrose 11, piruvato de sódio 2, pH 7,4) continuamente gases com uma mistura (95% O2: 5% CO2) a 37 °C, suplementada com ácido ascórbico (1 mM) para prevenir oxidação de catecolaminas. Nossos resultados mostraram que os ventrículos isolados apresentaram liberação basal de 6-ND, a qual foi significativamente inibida pelo pré-tratamento (30 min) com L-NAME (100 µM). A liberação basal de 6-ND também foi reduzida nos ventrículos obtidos de ratos tratados cronicamente com L-NAME. A incubação de ventrículos isolados de ratos com TTX (30 min, 1 µM) não teve efeito na liberação basal de 6-ND. Não foi possível detectar os níveis de dopamina, noradrenalina e adrenalina em todas as amostras estudadas. Em seguida, realizamos um tratamento crônico (4-6 semanas) em ratos com L-NAME (20 mg/dia) na água de consumo, e os corações foram isolados e perfundidos in vitro utilizando a preparação de Langendorff. Os corações obtidos dos animais tratados cronicamente com L-NAME apresentaram uma pressão de desenvolvimento do ventrículo esquerdo significativamente menor. Como também foram evidenciadas alterações significativamente menores nos seguintes parâmetros, taxa máxima de aumento da pressão do ventrículo esquerdo (dP/dtmax), frequência cardíaca, e produto de pressão, em comparação aos corações obtidos dos animais controle. Foi observado nos resultados da preparação de Langendorff que o 6-ND é um agente inotrópico positivo extremamente potente. Sua potência é ainda maior do que a da dopamina e noradrenalina (mil vezes mais) e da adrenalina (dez mil vezes mais). Portanto, pode-se considerar o 6-ND como o agente inotrópico endógeno mais potente já documentado, pois a síntese e liberação do 6-ND pelos ventrículos é significativamente reduzida após a inibição aguda e crônica da sintase de NO

Resumo: Objetivos: a 6-nitrodopamina (6-ND) foi previamente identificada como uma substância endógena com propriedades antagônicas da dopamina, este estudo visa identificar seu papel na agregação plaquetária. Principais métodos: A cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa foi usada para quantificar os níveis de 6-nitrodopamina, cAMP e cGMP de amostras de plaquetas lavadas. A agregometria óptica foi usada para identificar o papel de 6-ND, Dopamina, antagonistas dopaminérgicos seletivos e agonistas dopaminérgicos seletivos na agregação estimulada por ADP e colágeno para identificar qualquer papel inibitório ou potencializador de 6-ND. As agregações foram realizadas em PRP humano e plaquetas lavadas. Resultados: As plaquetas liberam 6-ND após estimulação pela trombina. A pré-incubação de 6-ND em plaquetas antes da estimulação com trombina não afeta os níveis de cAMP ou cGMP. 6-ND não afeta a agregação de PRP induzida por ADP, colágeno ou epinefrina ou agregação de plaquetas lavadas induzida por trombina. 10 µM de dopamina é suficiente para potencializar a agregação induzida por ADP e colágeno em concentrações abaixo do limiar. 6-ND reduz a potenciação da dopamina e serotonina da agregação induzida por ADP e Colágeno. A análise de antagonistas dopaminérgicos conhecidos revelou que Haloperidol, PG01037 e SB277011A reduzem a potenciação da dopamina, mas não a potenciação do ADP basal e do colágeno. A cetanserina bloqueia a agregação potencializada pela serotonina, mas não pela dopamina. Sumanirol um agonista D2 seletivo, potencializou agregação que foi bloqueada por 6-ND e PG01037. Significado: Os dados sugerem que o 6-ND pode funcionar como um antagonista do receptor D2/3 e da serotonina. Dado que tanto a dopamina quanto o 6-ND são liberados pelo endotélio vascular, o 6-ND pode desempenhar um papel protetor contra trombose envolvendo disfunção vascular ou como antipsicótico

Resumo: A contratilidade do ducto deferente é essencial na fase de emissão do processo ejaculatório. Controlada pelo sistema nervoso autônomo e predominantemente noradrenérgica. O ducto deferente é um modelo amplamente utilizado nos estudos da neurotransmissão simpática, especialmente o tecido de roedores, oferecendo vantagens práticas e econômicas. O ducto deferente humano se origina na cauda do epidídimo, passa pelo canal inguinal e termina na base prostática, tem camada muscular espessa e é revestido por epitélio pseudoestratificado, com inervação se estendendo ao longo do ducto, formando um plexo denso, derivado de fibras simpáticas (T10-L2) e parassimpáticas (S2-S4). A fase de emissão envolve a transferência de fluido espermático pelo ducto deferente, desde os testículos até a uretra posterior. Estudos mostram que a contração não é unicamente mediada pela noradrenalina, mas também por ATP e outros neurotransmissores. Pesquisas recentes destacam a 6-ND como modulador das contrações do ducto deferente de ratos. A 6-ND tem ação contrátil de musculatura lisa em diversos tecidos humanos, sua liberação endógena é evidenciada pela presença em diferentes tecidos humanos. Esta nitrocatecolamina tem atividade biológica diversificada, incluindo a inibição da recaptação de noradrenalina e ação vasodilatadora específica, modula contrações cardíacas e potencializa a ação de outras catecolaminas. Os antidepressivos tricíclicos são eficazes no tratamento da ejaculação precoce, sendo utilizados na prática clínica há décadas, mesmo embora, sejam classificados como parte do tratamento off-label. Essa classe de droga, com estrutura de três anéis aromáticos, inclui subtipos de amina terciária e secundária e era anteriormente a primeira linha de tratamento para depressão maior. A vasectomia, forma permanente de esterilização masculina, não impacta a libido nem a função erétil. Estudos pós-vasectomia mostram que a inervação noradrenérgica do segmento distal do ducto diminui, o que pode afetar a maturação e transporte dos espermatozóides, influenciando no sucesso de uma eventual reversão do procedimento

Resumo: A obesidade e suas comormidades representam um problema de saúde pública em todo mundo. De acordo com a Organização Mundial da Saúde, o sobrepeso e a obesidade são os principais fatores de risco para o desenvolvimento de muitas doenças crônicas, incluindo diabetes tipo 2, hipertensão, câncer, entre outras. O desenvolvimento da obesidade está correlacionado com diverosos aspectos endócrinos, bioquímicos, genéticos e comportamentais, como a ingestão de dieta rica em gorduras e açúcares, baixa atividade física e privação do sono. O balanço energético positivo leva a um aumento do número, e no tamanho dos adipócitos resultando em um distúrbio do tecido adiposo, que passa secretar citocinas pró-inflamatórias, tais como o factor de necrose tumoral (TNF) -alfa, interleucina (IL) IL1-?, IL-6. Essas adipocinas são peças chaves para a resistência à insulina, hiperglicemia, dislipidemia, entre outras. O aumento desses mediadores inflamatórios, pode levar a danos celulares, incluindo danos a proteínas, estresse mitocondrial e fragmentação de DNA. Deste modo, estas adipocinas desempenham papel chave no desenvolvimento da sindrome metabólica, e também podem contribuir para os distúrbios circadianos. A melatonina é um hôrmonio produzido pela glândula pineal, apenas no período escuro e é o hormônio responsável por indicar para nosso corpo o dia e a noite. Está envolvida em diversos processos, como regulação dos relógios biológicos internos e metabolismo energético, age como poderoso antioxidante, e também como um agente anti-inflamatório. A melatonina é produzina a noite, somente na ausência de luz, logo privação do sono inibe sua síntese e este fenômeno vem sendo descrito como parte do desenvolvimento da obesidade e diabetes tipo 2, entre outras doenças. A melatonina também é capaz de modular as respostas imunes através da inibição da ativação de processos inflamatórios, regula também a proliferação e atividade de células imunocompetentes. A glândula pineal é também um alvo imunológico. Em algumas condições patológicas de inflamação crônica a produção de melatonina pela pineal pode ser suprimida. Existe uma quantidade substancial de evidências que suportam os efeitos benéficos da suplementação de melatonina sobre a obesidade e suas complicações. Objetivo do presente trabalho foi investigar a relação da ingestão de uma dieta rica em gordura por camundongos C3H/HePas, com a diminuição da produção de melatonina, e o potencial envolvimento do TNF-alfa. A indução da obesidade promoveu alterações na glândula pineal tais como aumento de EROs, apoptose e também aumento da expressão de TNF-alfa. Para testar nossa hipótese submetemos os animais a um tratamento com anticorpo monoclonal específico anti-TNF-alfa, concomitante com o inicio da dieta hiperlipídica, para reverter os efeitos causados pelo TNF-alfa. Com a neutralização do TNF-alfa foi observado um proteção parcial na diminuição da produção de melatonina, bem como uma melhora parcial no metabolismo de glicose e lipídeos. No entanto, o Infliximabe foi eficaz em proteger a glândula pineal do estresse oxidativo e da expressão de TNF-alfa. Ainda para evidenciar os efeitos das alterações metabólicas causados pela dieta hiperlipídica na ausência da produção de melatonina, suplementamos melatonina (em duas doses) na água de beber dos animais alimentados com dieta hiperlipídica, pudemos observar uma reversão parcial nos efeitos metabólicos causados pela dieta hiperlipídica, tanto no metabolismo da glicose quanto no metabolismo de lipídeos. Além disto, mostramos que o palmitato estimula a apoptose e a expressão de TNF-alfa em glândulas pineais de rato em cultura. Estes efeitos são revertidos pela adição de Infliximabe ao meio de cultura. O conjunto de nossos dados mostram que o aumento de TNF-alfa é crucial para a redução na produção de melatonina na obesidade

Resumo: A obesidade é caracterizada pela deposição ectópica de gordura no fígado. Este acúmulo de gordura hepática (NAFLD) pode gerar consequências graves, como a hepatite não alcoólica (NASH), fator de ricos para carcino hepatocelular (HCC). A morte de hepatócitos, evento chave na evolução da NAFLD para NASH, é causada pelo excesso de nutrientes e é dependente do estresse de retículo endoplasmático (RE). O estresse no RE resulta no acúmulo de proteínas não processadas desencadeia a "unfolded protein response" (UPR), podendo gerar apoptose. A mTOR é formada basicamente por dois complexos: mTOR1 e mTOR2; ambos são sensíveis a nutrientes, a insulina e a rapamicina. O complexo mTOR2/Rictor catalisa a fosforilação da AKT, aumentando a sinalização da insulina. Deste modo, o objetivo deste trabalho foi avaliar a relação entre ativação da mTOR, do estresse de RE e da apoptose em hepatócito expostos a ácidos graxos livres. Observamos que a apoptose causada pelo palmitato ativa o estresse de RE de maneira tempo dependente. Não observamos alterações na fosforilação de proteínas alvo específicas para o complexo mTOR1. No entanto, a fosforilação geral da mTOR foi estimulada pelo palmitato. Altas doses de rapamicina inibiram a apoptose e do estresse de RE causado pelo palmitato, sugerindo a participação do complexo mTOR2. Estes resultados ainda foram confirmados pelo silenciamento gênico da Rictor. A fosforilação em serina 473 da AKT apresenta um caráter transitório, elevando-se em tempos que precedem morte e o estresse de RE, e diminuindo em tempos prolongados concomitantemente à apoptose. A inibição da AKT pelo "AKT inhibitor" gerou diminuição da apoptose, do estresse de RE e da incorporação lipídica na linhagem de hepatoma. Estes dados sugerem que a AKT, como alvo preferencial da mTOR2 é necessária para geração de morte e da UPR. A glicose (33.3mM) gera morte as células HepG2 e esta é inibida com baixas doses de rapamicina, mostrando possível atividade via mTOR1 nesta resposta. De outro modo, a frutose (4.5mM) que também desencadeia apoptose das células de hepatoma, tem seu efeito inibido por doses maiores de rapamicina, indicando atividade mTOR2 neste processo. No entanto, a possibilidade de diferentes monossacarídeos recrutarem complexos diferentes de mTOR para desencadear apoptose ainda precisa ser melhor explorada

Resumo: Introdução: Bothrops atrox (jararaca-do-norte) é a principal causa de envenenamento ofídico na região amazônica. Vários estudos têm investigado a bioquímica desta peçonha, bem como os efeitos locais (dor, edema, hemorragia e mionecrose) que ela causa. Por outro lado, os efeitos sistêmicos têm sido menos estudados. Neste trabalho, investigamos as alterações hemodinâmicas causadas por esta peçonha em ratos anestesiados bem como os possíveis mediadores envolvidas nestas respostas. Métodos: Ratos machos Wistar (300-400 g) anestesiados com isoflurano foram canulados para o registro da pressão arterial (carótida) e para a administração intravenosa (i.v.) de diferentes substâncias (peçonha, antagonistas e inibidores) (veia femoral esquerda). Em alguns experimentos, houve administração intramuscular (i.m.) de peçonha. A frequência respiratória foi determinada manualmente e o ECG foi monitorado via eletrodos introduzidos nas patas dianteiras e traseira. Em intervalos pré-estabelecidos, foram coletadas amostras de sangue arterial para análise bioquímica e determinação da cinética da peçonha. Ao término dos experimentos, foram coletados tecidos (rim, pulmão, coração, fígado e músculo) para análise histológica. A capacidade do antiveneno botrópico comercial em neutralizar algumas atividades enzimáticas e as alterações hemodinâmicas foi avaliada pré-incubando-se a peçonha com antiveneno antes de testar a atividade residual. A peçonha também foi fracionada por gel filtração e os picos testados quanto à sua atividade sobre a pressão arterial. Resultados: A peçonha (0,4 mg/kg, i.v.) causou hipotensão imediata (máxima aos 5 min) seguida por recuperação nos 20 min seguintes; não houve alteração na frequência cardíaca, ECG ou frequência respiratória, e não houve mortes (sobrevida até o final do experimento: 120 min). Uma dose maior (0,7 mg/kg, i.v.) causou hipotensão progressiva, bradicardia e falência respiratória, com morte de todos os ratos (n=6) em 20±4 min. A administração intramuscular (músculo gastrocnêmio) de peçonha (4 mg/kg) mostrou um perfil hemodinâmico semelhante àquele observado com a dose menor i.v. A análise histológica mostrou que a dose menor i.v. causou trombose e hemorragia pulmonares, além de dano renal (descamação epitelial, deposição proteica e microaneurismos); houve proteinúria e hemoglobinúria em urina coletada no final do experimento. Não houve alteração histológica nos outros tecidos examinados (fígado, coração). Quando administrada i.m. ou i.v. (dose maior), a peçonha causou apenas trombose pulmonar. Já a administração i.m. causou hemorragia e necrose locais, e proteinúria. Houve aumento significativo de creatinoquinase (CK) aos 120 min após injeção da peçonha por via i.v. (dose menor) ou i.m., porém só foi observado aumento da lactato desidrogenase (LDH) com a peçonha injetada por via i.v.; não houve alteração na concentração de glicose circulante em nenhum grupo. A peçonha injetada i.v. mostrou uma cinética bifásica, enquanto a administração i.m. resultou em absorção contínua durante o experimento. Com ambas as vias, ao final do experimento houve detecção de peçonha por ELISA na urina. O antiveneno (razão peçonha:antiveneno de 5:1 e 5:10) injetado 1 min após a peçonha não atenuou a hipotensão, mas reduziu o dano renal (proteinúria) e o aumento de CK. A pré-incubação da peçonha com antiveneno nas proporções indicadas acima inibiu as atividades amidolítica, PLA2 e proteolítica da peçonha. O pré-tratamento dos ratos com sildenafil (inibidor da PDE5), atenolol (antagonista ?1-adrenérgico), atropina (antagonista muscarínico não seletivo), doxiciclina (inibidor de metaloprotease) ou infliximabe (anticorpo contra TNF?) não afetaram a hipotensão. Por outro lado, o pré-tratamento com L-NAME ou L-NMMA (inibidores da enzima óxido nítrico sintase) e ODQ (inibidor da guanilil ciclase solúvel) causou perfil de hipotensão semelhante àquela observada com a dose maior de peçonha i.v., e aumentou a letalidade da peçonha. Estes ratos não apresentaram hemorragia nem hemoglobinúria, no entanto, foram observados presença de trombos de forma semelhante aos ratos tratados somente com a peçonha. O pré-tratamento com indometacina (inibidor não seletivo da ciclooxigenase) atenuou a hipotensão inicial (primeiro minuto pós-peçonha) e melhorou a recuperação subsequente. Já o HOE-140 (antagonista dos receptores B2 da bradicinina) e o pBPB (inibidor da PLA2) atenuaram ou aboliram a hipotensão, respectivamente. A cromatografia por gel filtração resultou em cinco picos: pico I causou hipotensão transitória, aumento de CK e hemoglobinúria, enquanto que o pico II reproduziu o perfil de hipotensão visto com a peçonha, sem aumentar o CK, mas causou hemorragia; os outros picos (III, IV e V) não mostraram ação significativa sobre a pressão arterial. Conclusão: Baseado nos resultados deste trabalho, concluímos que em ratos anestesiados a peçonha de B. atrox injetada i.v. ou i.m. causa hipotensão, sem alterar os parâmetros cardíacos (frequência e ECG) ou respiratórios. A hipotensão envolve a ação de PLA2 e cininas, enquanto a formação do NO exerce efeito protetor contra a redução na pressão arterial e a letalidade da peçonha. O antiveneno botrópico polivalente não é eficaz em proteger contra as alterações hemodinâmicas observadas

Resumo: O envenenamento por serpentes do gênero Bothrops resulta em alterações sistêmicas que incluem coagulopatia, hemorragia sistêmica, choque hipovolêmico e insuficiência renal aguda. Neste estudo investigamos a ação de da peçonha de B. jararacussu e suas frações cromatográficas sobre alguns parâmetros cardiovasculares (pressão arterial, freqüências cardíaca e respiratória, e eletrocardiograma) em ratos anestesiados com uretana. Ratos Wistar (300-400 g) foram canulados na arteria carótida esquerda para monitoramento contínuo da pressão arterial sistêmica e na veia femoral para administração das peçonhas e frações cromatográficas. A freqüência cardíaca e o ECG foram monitorados por um eletrocardiógrafo. No final do experimento, coração, rins, fígado e pulmão foram processados para avaliação histológica. Os ratos foram monitorados durante 120 min. Para análise histológica, foram coletados amostras de coração, pulmão, rim e fígado. A peçonha (0.25, 0.5 and 0.75 mg/kg, i.v.) casou queda acentuada da pressão arterial nos até os 5 minutos após administração das peçonhas, tendo recuperação para valores de níveis basais nas doses menores, e a dose maior não houve recuperação. As doses menores não causaram alterações nas freqüências cardíacas e respiratórias, porem a dose maior causou queda irreversivel destes parâmetros. Alterações transitórias vistas no ECG foram extra sístole, taquicardia ventricular e alteração na amplitude do complexo QRS. Ratos injetados com a menor dose sobreviveram durante os 120 minutos monitorados no experimento, já os injetados com a maior dose morreram com aproximadamente 15 minutos após a administração da peçonha. A gel filtração resultou em 5 picos (PI-PV), sendo que a administração dos 2 primeiros picos mostraram alterações semelhantes a peçonha bruta. O fracionamento do pico I por troca iônica, não resultou em alterações cardiovasculares,pois provavelmente eles agem em sinergismo. Similarmente, a Bothropstoxina isolada do pico III não causou alterações. Analise histológica mostraram alterações em órgãos, principalmente em pulmões. Adicionalmente,foi visualizado mionecrose, edema e infiltrado inflamatório no coração, perda da arquitetura tecidual no fígado, e microaneurismas capilares, presença de proteína na luz tubular, e infiltrado inflamatório nos rins. Os picos I, II e III mostraram alterações similares a peçonha bruta. Estes resultados mostram que as peçonhas botrópicas produzem alterações cardiovasculares importantes, alem de alterações morfológicas em diversos órgãos. A predominância de hemorragia e presença de atividade hemorrágica nos picos I, II e III indicam a presença de diversas proteínas hemorrágicas nesta peçonha.

Resumo: Os anestésicos locais (AL) podem interagir com os bloqueadores neuromusculares (BNM) e modificar as suas propriedades farmacocinéticas e farmacodinâmicas, no entanto o mecanismo dessa interação é controverso. Este estudo experimental, realizado em preparações nervo frênico - hemidiafragma de rato e músculo biventer cervicis de pintainho, teve por objetivo avaliar o efeito de diferentes AL na transmissão neuromuscular e sua influência no bloqueio produzido pelo pancurônio. Foram avaliados os seguintes parâmetros: efeito na transmissão neuromuscular dos AL (ropivacaína, levobupivacaína, mistura em excesso enantiomérico de bupivacaína) e do pancurônio empregados isoladamente; o bloqueio produzido pelo pancurônio em preparações previamente expostas aos AL; a eficácia da neostigmina e da 4-aminopiridina na reversão do bloqueio neuromuscular produzido pelo pancurônio isoladamente e em preparações previamente expostas aos AL; a ação dos AL na resposta contraturante à acetilcolina; seus efeitos nos potenciais de membrana e nos potenciais de placa terminal em miniatura. Os resultados foram expressos em médias e desvios padrão e analisados através dos testes t de Student, Wilcoxon, Anova, Kruskall-Wallis e Mann-Whitney. Adotou-se um nível de significância de 5% (p<0,05). Na preparação nervo frênico - hemidiafragma de rato, os AL nas concentrações empregadas, não alteraram a amplitude das respostas musculares mas, potencializaram o efeito do pancurônio. O bloqueio neuromuscular foi parcial e totalmente revertido com a neostigmina e com a 4-aminopiridina, respectivamente. Não causaram alteração significativa nos potenciais de membrana e produziram diminuição progressiva na amplitude e na frequência dos potenciais de placa terminal em miniatura. Na preparação biventer cervicis de pintainho os AL, com exceção da ropivacaína, promoveram diminuição na resposta contraturante da acetilcolina. Os resultados obtidos neste estudo demonstram um sinergismo entre os fármacos estudados, resultante das ações pré e pós-juncionais dos anestésicos locais

Resumo: Esta tese descreve a atividade contrátll em músculo liso vascular de coelho do veneno da aranha arrnadeira Phoneutria nigriventer. ° endotélio dos vasos foi retirado mecanicamente e os mesmos foram montados em um sistema de cascata, superfundidos com solução de Krebs aquecida (37°C) e oxigenada (95% 02 + 5% C02)' ° Phoneutria nigriventer (0.3 - 30 µg) produziu contrações dependentes da dose em arterias (pulmonar, mesentérica e celíaca) e veias (jugular, mesentérica e cava). A atividade contrátll do veneno em tecidos venosos e na artéria pulmonar não foi alterada quando o mesmo foi submetido a diálise (20-72h) ou quando os tecidos .foram perfundidos com metisergida, indicando que tal atividade não depende da serotonina contida no veneno. A atividade contrátll nas artérias mesentérica e celíaca foi abolida com a diálise do veneno ou com o uso da metisergida, indicando a serotonina corno principal agente espasmogênico nestes tecidos. A tetrodotoxina e a fenoxibenzarnina não afetaram significativamente a. contração induzida pelo Phoneutria nigriventer, sugerindo que o efeito contrátll independe da ativação de canais de sódio e da liberação de catecolarninas das terminações nervosas da parede do vaso. A atividade contrátll do Phoneutria nigriventer apresentou urna redução significativa quando incubado com tripsina, indicando que o veneno contém polipeptídeos responsáveis pela atividade espasmogênica. Após o fracionamento parcial do veneno através de filtração em gel de Sephadex G-1O e cromatografia de troca iônica, obtivemos 8 frações as quais revelaram atividade contrátll em tecido liso vascular. A eletroforese em gel de SDS-poliacrilarnida-tricina mostrou que o massa molecular destas frações está situado entre 8-50 kDa.

Resumo: As serpentes venenosas ou peçonhentas vulnerantes (inoculam oveneno na presa) correspondem a 450 espécies das 3000 conhecidas. Os venenos de serpentes do gênero Bothrops induzem efeitos locais intensos tais como dor, edema, hemorragia e necrose. Nesse trabalho investigamos a ação do veneno de Bothrops lanceolatus (espécie encontrada na Ilha da Martinica, América Central) na junção neuromuscular e no músculo esquelético de camundongos, a uma dose pré-estabelecida de 20 Jlg/ml (dose que apresentou efeitos mais constantes e nítidos com o mesmo padrão de resposta, depois de testarmos doses de 15 á 60 Jlg/ml) . Nas preparações nervo ftênico-diaftagma de camundongos, com estimulação elétrica indireta, o veneno de Bothrops lanceolatus induziu aumento inicial das contrações musculares e o aparecimento de contrações espontâneas (efeitos pré-sinápticos) seguido por bloqueio neuromuscular de 70 % em 182,6 :t 15,7 min (n=4). A Neostigmina (Neo, 5,8JlM) e a 4- aminopiridina (4AP, 53 JlM) antagonizaram o bloqueio produzido pelo veneno, nessa preparação, sendo que com a Neo o antagonismo foi parcial (64,4% :t 9,2) (n=5) e com a 4AP o antagonismo foi total (n=5). Utilizando-se a estimulação elétrica direta, o veneno na dose estudada não alterou a amplitude da resposta contrátil (n=4), confirmando que sua ação provavelmente se dá na junção neuromuscular e não nas fibras musculares da preparação. Nas preparações diafragma cronicamente desnervado de camundongos (n=4), a contratura induzida pela adição de acetilcolina (Ach, 36 JlM) foi inibida pelo veneno, sugerindo uma ação nos receptores colinérgicos nicotínicos pós-sinápticos . o estudo dos Potenciais Bioelétricos nas preparações nervo frênicodiafragma de camundongos, revelou ausência de alterações no estudo do potencial de membrana (n=4), portanto na dose estudada o veneno não possui ação despolarizante sobre a fibra muscular do diafragma de camundongo. Quanto ao estudo do potencial de placa terminal em miniatura (pptm), observou-se um progressivo decréscimo na amplitude e na freqüência dos potenciais até seu total desaparecimento. Esse bloqueio é totalmente revertido tanto pela neostigmina (5,8flM) (em 11,6 :!:3,6 min) (n=4) como pela 4-aminopiridina (53flM) (em 5,6 :!:0,6 min) (n=4) . Isso vem confirmar, mais uma vez, que a ação do veneno tem grande probabilidade de ocorrer na região pós-sináptica, nos receptores colinérgicos nicotínicos. Foram realizados também, experimentos com a preparação biventer cérvicis de pintainho (n=8), para comparar os resultados com aqueles obtidos com a preparação diafragma cronicamente desnervado de camundongo (que desenvolve a neoformação de receptores ao longo de toda fibra muscular, semelhante ás fibras das aves). A contratura induzida de acetilcolina (36 flM) também foi inibida pelo veneno, confirmando os resultados obtidos nas preparações diafragma cronicamente desnervado, e sugerindo novamente que o veneno tenha uma ação nos receptores colinérgicos nicotínicos pós-sinápticos . Com esse trabalho concluímos que o veneno de Bothrops lanceolatus (20flglmI) provoca um bloqueio neuromuscular que é revertido parcialmente pela neostigmina e totalmente pela 4-aminopiridina e que não possui ação despolarizante nas fibras musculares. Embora esse veneno tenha apresentado tanto efeitos pré como pós-sinápticos, nos experimentos "in vitro", com a dose estudada, os efeitos pós-sinápticos são mais evidentes

Resumo: Tendo em vista que os bloqueadores dos canais de cálcio, são utilizados na terapêutica, geralmente, por longos períodos de tempo, muitas vezes em gestantes, propôs-se estudar neste trabalho, os efeitos do verapamil sobre o germe dentário de filhotes de ratas tratadas com a droga, antes e durante a prenhez. Avaliou-se os efeitos da droga sobre implantações uterinas, reabsorções fetais, desenvolvimento ósseo e níveis plasmáticos de cálcio, fosfatos e proteínas totais em mães e filhotes. Utilizou-se 73 ratos Wistar...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital

Resumo: Os efeitos neuromusculares do veneno de Bothrops neuwiedi pauloensis foram estudados através de preparações biventer cervicis de pintainho e nervo frênico-diafragma de camundongo. Em preparação de ave, o veneno produziu bloqueio irreversível e dependente da concentração das contrações musculares em resposta à estimulação elétrica indireta. Com 1-20 µgde veneno/ml, as respostas ao KCI (13,4 mM) foram parcialmente ou completamente inibidas, enquanto que as respostas à ACh (110 M)não foram afetadas. Com 50 µg/ml,as respostas à ACh, ao KCI e à estimulação direta foram inibidas. O veneno induziu também contraturas dependentes da concentração a partir de 10 µg/ml. À 20-24°C, o
veneno (50 µg/ml)produziu somente um bloqueio parcial (30,7 ± 8,0%, média ± SEM; p < 0,05; n = 3) após 120 min sem afetar as respostas à ACh e ao KCI. Em preparação de camundongo, 50 µg de veneno/ml causaram bloqueio
total das respostas à estimulação indireta e direta, e, quando o Ca2+(1,8 mM) da solução nutritiva foi substituído pelo sr2+ (4.0 mM), somente um bloqueio parcial da resposta à estimulação indireta foi obtido (40.3 ±7.8%; P < 0,05; n = 3) após
120 min de incubação. Estes resultados indicam que o veneno de B. n. pauloensis é neurotóxico, atua preferencialmente em sítios pré-sinápticos, e que sua atividade farmacológica está relacionada a sua atividade enzimática. O veneno foi fracionado por HPLC de exclusão molecular e sua atividade neuromuscular foi recuperada no primeiro, segundo e terceiro picos (pico 1, pico 2 e pico 3, respectivamente) do perfil cromatográfico. Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital

Resumo: O coronavírus SARS-CoV-2 causa a COVID-19, pandemia decretada em 2020. Os ácidos graxos livres modulam as respostas à infecção pelo SARS-CoV-2 e seus níveis circulatórios são elevados em indivíduos com obesidade. Contudo, não está claro se os ácidos alfa-linolênico (Ala) e esteárico (Est) podem modular a entrada do vírus e a resposta inflamatória de macrófagos e de células epiteliais pulmonares ao SARS-CoV-2, contribuindo com as alterações observadas em indivíduos com obesidade. Assim, o objetivo deste estudo foi observar a expressão de genes envolvidos na internalização viral e na resposta inflamatória em macrófagos e em células epiteliais pulmonares expostos ao SARS-CoV-2 e avaliar se a obesidade ou a presença de Ala ou Est poderiam afetar a expressão desses genes nestas células. Para tal, foram analisados dois conjuntos de dados de sequenciamento de RNA de células únicas (scRNA-seq) pertencentes ao repositório público de dados genômicos funcionais GEO. O primeiro conjunto englobou dados de macrófagos e células epiteliais purificadas de tecido pulmonar de pacientes com COVID-19. Neste, observamos que, em comparação às células epiteliais, os macrófagos concentram maior expressão de TMPRSS2, IFITM3, AXL, genes relacionados à internalização viral, além das citocinas inflamatórias IL-1 ß, TNF-a e de IFN-?. Macrófagos derivados de THP-1 e células epiteliais brônquicas Beas-2B foram incubados com SARS-CoV-2 e então submetidos à quantificação da expressão de genes alvo por qPCR, confirmando os achados do scRNa-seq. Por isso, todos os experimentos subsequentes foram conduzidos apenas com macrófagos. Em um segundo conjunto de dados de scRNA-seq englobando macrófagos pulmonares de indivíduos com COVID-19 com e sem obesidade, observou-se que os macrófagos dos indivíduos com obesidade apresentaram maior expressão de ACE2, o receptor de SARS-CoV-2, e de TMPRSS2 e IFITM3 e menor expressão de IFN-?. Já em macrófagos derivados de THP-1, o qPCR mostrou que a exposição ao vírus induziu aumento da expressão gênica de TMPRSS2, IL-1ß, IL-10 e de NLRP3, que indica a formação de inflamassomos. Ambas as incubações com Ala e com Est associadas ao vírus potencializaram o aumento da expressão de IL-1ß induzido pelo vírus e permitiram o aumento da expressão de IFITM3, de TNF-a e de SOD2, enzima mitocondrial que converte ânion superóxido em peróxido de hidrogênio. Somente a co-incubação com Ala preveniu o aumento da expressão de TMPRSS2 e de NLRP3 promovidos pelo vírus e levou ao aumento da expressão de p47phox. Somente a co-incubação com Est e vírus elevou a expressão de IFN-ß e IFN-?. Somente quando aliada à co-exposição ao Ala ou ao Est, a incubação dos macrófagos derivados de THP-1 com a proteína spike recombinante promoveu aumento da expressão de ACE2 e de IL-1ß. Dessa forma, concluímos que o vírus SARS-CoV-2 induz nos pulmões dos pacientes com COVID-19 resposta mais acentuada nos macrófagos do que nas células epiteliais e que Ala e Est in vitro atuam de forma sinérgica com o vírus aumentando a resposta inflamatória de macrófagos derivados de THP-1 ao SARS-CoV-2, o que não se observou em macrófagos pulmonares de indivíduos com COVID-19 associada à obesidade

Resumo: A Tumera ulmifolia L. pertence à família Turneraceae e é popularmente conhecida como chanana. É um subarbusto de flores amareladas, comum no nordeste do Brasil. Devido ao seu uso popular em distúrbios inflamatórios, foram estudadas as propriedades antiinflamatórias do extrato hidroalcoólico bruto (EHB) e de sua fração ativa (Fr.EtOH) em modelos de inflamação, com o objetivo de fornecer subsídios para seu uso tradicional. Em ensaios de toxicidade aguda, verificou-se que EHB não foi tóxico aos animais quando administrado pelas vias oral (DLso > 15 g/kg) e intraperitoneal (DLso = 7.8 g/kg), demonstrando ser praticamente inócuo. EHB (1g/kg, po) e Fr.EtOH (100 mg/kg, po) mostraram efeito antiedematogênico dose-dependente em ensaios de edema de pata induzido por carragenina. As respostas máximas de ambos ocorreram 3 horas após o tratamento com o agente flogístico, com porcentagens de inibição de 30%. A DEso de Fr.EtOH foi de 150 mg/kg. EHB (1g/kg, po) reduziu o aumento de permeabilidade vascular induzido por PGE2 (34%), histamina (54%) e 5-hidroxitriptamina (79%), mas não aquele aumento induzido por bradicinina, enquanto que o diclofenaco sódico (5 mg/kg, po) diminuiu a permeabilidade vascular induzida por todos estes mediadores, com porcentagens de inibição de 46, 63, 88 e 61%, respectivamente. No teste de granuloma cotton pel/et, EHB (1 g/kg, po) e diclofenaco sódico (5mg/kg, po) mostraram ser equivalentes em inibir a fase transudativa do granuloma (57 e 54%, respectivamente), mas somente o diclofenaco sódico inibiu a fase proliferativa (64%). Foi avaliada a influência de Fr.EtOH (5 mg/kg, ip) sobre os parâmetros hematológicos do sangue periférico e do exsudato peritoneal. Nenhuma alteração relativa aos perfis numéricos totais eritrocitário e leucocitário do sangue periférico foi evidenciada; entretanto, na contagem diferencial dos leucócitos foi detectado um aumento do número de basófilos (80%). A análise dos dados obtidos no estudo do exsudato peritoneal demonstrou que Fr.EtOH (5 mg/kg, ip) inibiu, de modo dosedependente, a migração de leucócitos para o peritôneo. Esta diminuição ocorreu principalmente devido a uma redução no número de linfócitos (78%) e neutrófilos (57%) que migraram para a cavidade peritoneal. Por outro lado, em estudo de potência antiinflamatória versus atividade ulcerogênica, EHB (1g/kg, po) não potencializou as lesões gástricas induzidas pelo ácido acetilsalicílico, pelo contrário, produziu uma redução de 67% do índice de lesões ulcerativas (ILU). EHB (1 g/kg, po) e Fr.EtOH (100 mg/kg, po) reduziram as lesões gástricas induzidas por ligadura do piloro, inibindo o ILU em 79 e 82%, repectivamente; etanol (1 mllanimal, po) inibindo o ILU em 60 e 55%, respectivamente; assim como aquelas induzidas por indometacina (30 mg/kg, sc) inibindo o ILU em 51 e 57%, respectivamente; entretanto, ambos não foram capazes de produzir inibição sobre as lesões gástricas produzidas por estresse. A Fr.EtOH (100 mg/kg, po) produziu um aumento (38%) da formação de muco da barreira gastroprotetora; já a carbenoxolona (200 mg/kg, po) também aumentou o muco em cerca de 42%. Adicionalmente, Fr.EtOH (100 mg/kg, po) não produziu inibição do número de contorções abdominais induzidas por ácido acético (0.6%, ip), enquanto que a dipirona magnesiana (200 mg/kg, po) foi capaz de reduzir cerca de 90% dessas contorções. Assim, nos modelos de inflamação utilizados, EHB e Fr.EtOH apresentaram marcada atividade antiinflamatória, não acompanhada de danos gástricos; ao contrário, ambos apresentaram ações antiulcerogênicas em vários modelos experimentais de úlcera gástrica. Deste modo, foi possível confirmar, ainda que preliminarmente, as informações populares do uso em inflamação da espécie vegetal Tumera ulmifolia

Resumo: Antibióticos estão entre os medicamentos mais prescritos em contexto hospitalar, e a irracionalidade no uso desta importante classe terapêutica tem sido apontada como um dos mais sérios problemas da farmacoterapia em todo o mundo. O uso excessivo de antimicrobianos traz em seu bojo a ameaça da emergência de cepas multirresistentes, além de toxicidade e custos desnecessários. Este trabalho descreve a contribuição do farmacêutico na implantação de um protocolo de uso profilático de antibióticos nos procedimentos cirúrgicos no Hospital e Maternidade Celso Pierro (l{MCP) em Campinas, um trabalho realizado em parceria da Comissão de Controle de Infecção Hospitalar e da Farmácia Hospitalar. Foram objetivos do estudo a promoção do uso racional de antibióticos profiláticos em cirurgia, através da implantação de um protocolo de antibiótico profilaxia , descrevendo a contribuição do farmacêutico no controle gerencial e técnico, com a perspectiva de fazer cumprir o protocolo, atingindo um controle de dispensação e uso do antibiótico profiláticos em procedimentos cirúrgicos e viabilizando o seu custo. Foram analisadas 687 cirurgias, 335 antes do protocolo, e 352 após o protocolo. A implantação do protocolo fez com que a indicação adequada de 56.4% no período 'pré protocolo atingisse 100% no período pós protocolo, que a escolha adequada do antimicrobiano passasse de 74.5% para 97.2% e que a adequação quanto à continuidade da prescrição de antibiótico profilático cirúrgico subiu de 21.4% para 95.7%, tomando como referência de adequação o protocolo padronizado. Ocorreu una redução de 39.8 % na mediana do custo da, antibiótico-profilaxia procedimento cirúrgico. Os resultados do estudo demonstram que para o sucesso da implantação de protocolo há necessidade de o trabalho ser desenvolvido por uma equipe multidisciplinar , cada profissional cumprindo adequadamente o seu papel

Resumo: A dispnéia é um dos sintomas cardeais das doenças cardiovasculares, as quais constituem importante causa de morbi e mortalidade no mundo. A subjetividade desse sintoma dificulta sua quantificação acurada, levando ao desenvolvimento de questionários, como o Modified Dyspnea Index (MDI), com o objetivo de avaliar mais especificamente o sintoma. Objetivos: Este estudo teve como objetivo realizar a adaptação cultural do instrumento Modified Dyspnea Index para a língua portuguesa do Brasil; testar sua confiabilidade e sua validade convergente por meio da correlação com o esforço percebido (aplicação da Escala Modificada de Borg), avaliação da força muscular respiratória e avaliação da qualidade de vida relacionada à saúde (aplicação do questionário Minnesota Living with Heart Failure). Metodologia: O processo de adaptação cultural seguiu metodologia recomendada internacionalmente, com as etapas de tradução-retrotradução e avaliação, por comitê de juízes, das equivalências: semântica, idiomática, cultural/experimental, conceitual e metabólica. O Índice de Validade de Conteúdo foi utilizado para avaliar a proporção de concordância entre os juízes. Como se trata de instrumento para uso do profissional de saúde, foi desenvolvido e validado um roteiro para nortear a aplicação do MDI. A confiabilidade foi avaliada segundo o critério da equivalência inter-observador, com aplicação simultânea do instrumento por dois profissionais de saúde (fisioterapeuta e enfermeiro) a pacientes portadores de doença cardiovascular com queixa de dispnéia. A validade foi testada segundo o critério da validade convergente, por meio da correlação entre MDI e: Escala Modificada de Borg, qualidade de vida relacionada à saúde (versão brasileira do Minnesota Living with Heart Failure - LHFQ) e valores de Pressão inspiratória máxima (Pi máx) e Pressão expiratória máxima (Pe máx). Os instrumentos foram aplicados por um único pesquisador, sob forma de entrevista; em seguida, os pacientes foram submetidos à mensuração da Pe máx e Pi máx. A concordância entre os avaliadores independentes, junto a 31 pacientes, foi avaliada por meio do coeficiente Kappa e para o teste das correlações entre o MDI e demais medidas (n=151) foi empregado coeficiente de correlação de Spearman. Foi adotado p? 0,05 como nível de significância. Resultados: O MDI sofreu alterações de acordo com a avaliação da validade de conteúdo. Foi constatado elevado coeficiente de concordância entre os observadores quanto ao escore total do MDI (k= 0,960). Foi observada correlação negativa significativa, embora de pequena magnitude entre MDI e Escala de Borg Modificada (r= -0,29, p=0,0003) e entre MDI e Pi máx e Pe máx (r= 0,26, p=0,0001; e r= 0,28, p=0,0006; respectivamente). A correlação entre o MDI e a medida de qualidade de vida, entretanto, foi de forte magnitude, considerando-se o escore total do LHFQ e sua dimensão física (r= -0,53, p=<0,0001; r= -0,59, p=<0,0001, respectivamente); e de moderada magnitude com a dimensão emocional (r= -0,30, p=<0,0001). A adaptação do MDI para a cultura brasilleira foi realizada com rigor e a análise de sua confiabilidade e validade aponta fortes evidências de ser uma ferramenta útil para avaliação da dispnéia em pesquisa e na prática clínica.

Resumo: Hipertensão arterial resistente (HAR) é uma condição clínica que inclui pacientes com HAR controlada (HARC) e HAR não controlada (HARNC). Pacientes resistentes frequentemente apresentam alterações nos níveis de adipocinas e lesões em órgãos-alvo (LOA) como rigidez arterial, hipertrofia ventricular esquerda (HVE) e microalbuminúria (MA). Resistina, leptina e adiponectina podem ter efeitos no controle da pressão arterial (PA), contudo, não se sabe se os níveis de adipocinas e marcadores de LOA estão associados nos subgrupos de HAR. Objetivo: Avaliar a relação entre os níveis de adipocinas e rigidez arterial, HVE e MA em ambos os subgrupos. Métodos: Foram avaliados em HARC (n=38) e HARNC (n=51) o IMC, PA de consultório e MAPA, níveis plasmáticos de adiponectina, leptina e resistina (ELISA), velocidade de onda de pulso (VOP), MA e ecocardiograma. Resultados: Níveis de leptina e resistina estavam aumentados (30,4±16,8 ng/mL; p = 0,004 e 11,3±4,0 pg/mL; p = 0,007 respectivamente) em HARNC, enquanto os níveis de adiponectina diminuídos (4,7± 2,6 ug/mL; p < 0,001). Rigidez arterial, HVE e MA estavam aumentados (11,3±2,5 m/s; p < 0,001; 153,6±35,1 g/m2; p < 0,001; e 92,4±97,0 mg/g; p < 0,001 respectivamente) no subgrupo com HARNC. Neste subgrupo encontramos correlação inversa entre adiponectina e VOP (r = -0,42, p < 0,01) bem como com MA (r = -0,48, p < 0,01). Houve correlação positiva entre leptina e VOP (r = 0,37, p = 0,02) somente no subgrupo HARNC e a resistina não se correlacionou com marcadores de LOA em ambos os subgrupos. Conclusão: Hipoadiponectinemia está associada à presença de maior rigidez arterial e MA somente em pacientes HARNC. Níveis elevados de leptina estão associados somente com rigidez arterial neste mesmo subgrupo. Essas adipocinas podem influenciar a resistência a terapia anti-hipertensiva, contribuindo para a dificuldade de controle pressórico neste subgrupo de HAR

Resumo: A Hipertensão arterial refratária (HAR) é definida, de acordo com o Seventh Joint National Committe (JNC VII), quando os níveis pressóricos permanecem acima de 140 mm Hg para pressão arterial sistólica e 90 mm Hg para pressão arterial diastólica, mesmo sob uso de três ou mais classes de anti-hipertensivos, incluindo um diurético em dose plena e os demais anti-hipertensivos em doses submáximas a despeito de boa adesão ao tratamento não-farmacológico e farmacológico. A fisiopatologia da hipertensão arterial, inclusive a refratária, é complexa, sendo modulada por diversos fatores interligados: sistema nervoso autônomo, músculo liso vascular (endotélio-óxido nítrico) e rins, além do sistema renina-angiotensina-aldosterona (SRAA), entre outros. Desta forma, a fisiopatologia da HA é assumida como poligênica e heterogênea, com contribuição importante do ambiente (multifatorial). Entre as muitas adaptações sofridas pelo organismo para suportar a sobrecarga crônica de pressão encontra-se a hipertrofia ventricular esquerda (HVE) e o remodelamento vascular. Os resultados do Framingham Heart Study demonstraram de forma inequívoca o valor prognóstico da detecção de hipertrofia ventricular esquerda na estratificação de risco para doença cardiovascular, morbidade e mortalidade. A avaliação da espessura íntima - média das paredes anterior e posterior da carótida, utilizando ultra-som de alta resolução, vem sendo usado na detecção precoce de remodelamento vascular e como marcador precoce de aterosclerose. A produção endotelial de NO é a maior contribuinte do relaxamento da musculatura lisa vascular. A inabilidade de liberação de NO ou disfunção endotelial, pode ser avaliada de forma não invasiva, quantificando-se a resposta da artéria braquial ao estímulo mecânico como a resposta à manobra de compressão/descompressão da artéria braquial ou após estímulo farmacológico de substâncias vasodilatadoras, como a nitroglicerina, cuja ação é direta sobre a musculatura lisa vascular. Uma abordagem genética permite investigar a participação dos polimorfismos de base única dos genes (SNP) que codificam os componentes do sistema renina-angiotensina-aldosterona, tais como, o polimorfismo I/D da enzima conversora da angiotensina e a variante M235T do angiotensinogênio e o polimorfismo Glu-Asp do gene para sintase endotelial do óxido nítrico em pacientes com hipertensão arterial refratária. Foram estudados, 220 indivíduos, dos quais 70 eram hipertensos refratários (HAR), 80 responsivos a tratamento farmacológico (HT) e 70 indivíduos controles (CT). Os objetivos do presente estudo foram: 1) caracterizar e analisar comparativamente perfil clínico, demográfico, antropométrico e bioquímico de pacientes com HAR, HT e CT; 2) avaliar a massa do ventrículo esquerdo (HVE), a espessura íntima - média (EIM) das carótidas e quantificar a reatividade vascular, visando identificar alterações morfológicas e funcionais cardiovasculares; 3) analisar marcadores genéticos (SNP) dos genes do AGT, da ECA e da eNOS, visando esclarecer mecanismos básicos de controle da PA, incluindo a identificação de predisposição individual à HAR; 4) avaliar a associação dos polimorfismos da AGT, ECA e eNOS, com as alterações morfológicas e funcionais cardiovasculares. Os principais resultados do presente estudo mostraram: a) semelhante prevalência de indivíduos não caucasianos e caucasianos, aumento do índice de massa corporal, elevação da concentração sérica de aldosterona, da atividade plasmática da renina e da excreção urinária de sódio em pacientes com HAR; b) presença de alterações morfológicas caracterizadas por HVE e aumento da EIM das carótidas (remodelamento cardiovascular) e alterações funcionais qualificadas como alteração da vasodilatação dependente (VMF) e não dependente do endotélio; c) elevada prevalência do genótipo T/T do polimorfismo M235T do gene para angiotensinogênio e do genótipo Glu-Glu para eNOS nos pacientes com HAR, ambos em correlação estatisticamente significante com alterações morfológicas e funcionais cardiovasculares. Os resultados deste trabalho permitem concluir que: HAR tem distribuição étnica equivalente e que apresentam fatores associados como: aumento do IMC e hiperatividade do sistema renina-angiotenisna-aldosterona; fenótipos intermediários caracterizados por remodelamento cardiovascular (HVE e aumento da EIM das carótidas) e alterações funcionais representadas pela disfunção vascular dependente e não-dependente do endotélio, estão envolvidas na expressão fenotípica de pacientes com HAR e HT. O genótipo T/T do polimorfismo do gene para AGT e o Glu-Glu da eNOS têm maior prevalência em pacientes com HAR, contudo somente o genótipo TT do polimorfismo para AGT apresenta correlação com alterações estruturais e funcionais cardiovasculares. Enquanto, os genótipos Glu-Glu e Glu-Asp se correlacionam somente com alterações funcionais

Resumo: O estudo da ação eretogênica da histamina foi realizado através da injeção intracavernosa (IC) de histamina em 38 pacientes com diagnóstico de impotência sexual psicogênica. A resposta erétil induzida pela histamina foi comparada com aquela induzida pela injeção IC de papaverina. Além disso, estudou-se as respostas relaxantes induzidas pela histamina, in vitro, em 14 segmentos de corpo cavernoso humano oriundos de 7 pacientes submetidos a cirurgia de implante de prótese peniana. A histamina (3 a 100 µg) induziu relaxamento dose-dependente da musculatura lisa dos corpos cavernosos de seres humanos, in vitro. O tratamento dos tecidos cavernosos com antagonista H1 (mepiramina, 1 µM) potencializou em 67 ± 26% a resposta relaxante da histamina, enquanto que, a infusão de antagonista H2 (cimetidina 5 µM) inibiu significativamente (60 ± 5%) este efeito. A infusão simultânea de cimetidina e mepiramina não aboliu a ação relaxante da histamina. Dos 38 pacientes submetidos a injeção IC de histamina (30-60 µg), 12 (32%) apresentaram ereção total e 26 (68%) obtiveram tumescência peniana ou ereção parcial. A injeção IC de papaverina (50 mg) induziu a ereção total na maioria dos pacientes (66%). O tempo de ereção induzido pela histamina foi menor em relação ao marcado pela papaverina (média de 6.7 e 200 minutos, respectivamente ). A incidência de complicações.provocadas pela papaverina foi alta pois todos os pacientes (100%) referiram dor durante ou poucos minutos após a injeção, 5% apresentaram hematoma no local da injeção e 15% priapismo. Não foram observadas complicações locais ou sistêmicas com a histamina. O tratamento com astemizol (antagonista de receptores histaminérgicos H1) em 8 pacientes não alterou a resposta erétil induzida pela injeção IC de histamina. Por outro lado, o tratamento de 4 pacientes com cimetidina (antagonista de receptores histaminérgicos H2) reduziu em 2 dos pacientes a qualidade da resposta erétil obtida previamente com a histamina. Desta maneira, concluímos que a histamina pode ser um mediador fisiológico da ereção peniana em seres humanos porque relaxa a musculatura lisa cavernosa in vitro e induz a ereção peniana quando utilizada por via IC. Os resultados obtidos em corpo cavernoso humano in vitro indicam que a ação eretogênica da histamina ocorre através da ativação de receptores histaminérgicos do tipo H2, e possivelmente, H3

Resumo: O veneno de Bothrops jararacussu (Bjssu) e sua miotoxina bothropstoxina-I (BthTX-I), induzem neurotoxicidade e miotoxicidade. Como o tratamento com o antiveneno é pouco eficaz contra a miotoxicidade, muitos estudos têm sido realizados utilizando substâncias que neutralizem a atividade miotóxica induzida pelo veneno, entre elas, a heparina. Os objetivos deste trabalho foram: 1) verificar o efeito da heparina sobre a miotoxicidade induzida pelo veneno e toxina, utilizando-se uma baixa concentração de heparina, porém capaz de impedir o bloqueio neuromuscular e, 2) esclarecer o papel protetor da heparina contra Bjssu. Controles foram realizados com antiveneno botrópico (AVB) comercial ou solução nutritiva de Tyrode ou salina. Para avaliar a neurotoxicidade empregou-se técnica miográfica convencional em preparações nervo frênico-diafragma de camundongos (in vitro) e nervo ciático poplíteo externo-tibial anterior de ratos (in vivo); para avaliar a miotoxicidade in vitro empregou-se a técnica histológica (microscopia óptica) e in vivo a dosagem bioquímica da creatinoquinase (CK); para avaliar o papel protetor da heparina empregou-se a protamina, um antagonista farmacológico. Os resultados obtidos in vitro mostraram que a resposta contrátil de 12 ± 2% (n=6) frente à incubação com Bjssu (40 µg/mL) por 120 min foi aumentada para 79,6 ± 5,9% (n=6) quando pré-incubado com heparina (5 UI/mL) e 68,3 ± 6,2% (n=6) quando pré-incubado com AVB (120 µL/mL); na mesma situação a BthTX-I (2,9 µM) passou de 5 ± 1,3% (n=8) para 78,8 ± 6,8% (n=8) com heparina e 62,3 ± 6,1% (n=6) com AVB. A média da quantificação do dano morfológico (leitura de três diferentes observadores) mostrou que o veneno provocou lesões de 27% e a toxina de 40%, que passaram para níveis de 5% e 9%, respectivamente, quando tratadas com heparina e 11% e 3% quando com AVB. Os pré-tratamentos não apresentaram diferença significativa em relação ao controle Tyrode. Os resultados in vivo (em ratos) mostraram que as mesmas concentrações de veneno e toxina utilizadas nos ensaios in vitro não provocaram alterações na resposta contrátil; contudo, quando injetados no músculo gastrocnêmio de camundongos, apresentaram níveis plasmáticos de CK (U/L) de: 1454 ± 185 (Bjssu, n=6) diminuindo (P<0,05) para 236 ± 40 (com heparina, n=6) e 47 ± 5 (com AVB, n=6); 1531 ± 166 (BthTX-I, n=5) diminuindo (P<0,05) para 900 ± 149 (com heparina, n=5) e 935 ±135 (com AVB, n=5). A adição de protamina (0,8 UI/mL) aos 15 minutos de incubação da mistura heparina + veneno causou o bloqueio neuromuscular característico do veneno em preparações in vitro. Conclui-se que a heparina é mais eficaz (mas pode ser totalmente bloqueada pela protamina) que o AVB quanto a sua capacidade de impedir a neurotoxicidade in vitro causada por Bjssu e BthTX-I, e que nas mesmas concentrações a heparina demonstrou nenhuma neurotoxicidade in vivo (ratos) e que ela é tão eficiente quanto o AVB na miotoxicidade in vitro, mas menos eficaz in vivo em relação ao veneno bruto

Resumo: Ratos nascidos de mães submetidas à restrição calórica (RC) durante a gravidez e lactação exibem menor peso ao nascer e menor adiposidade na vida adulta. Os receptores ativados por proliferadores de peroxissomos (PPARs) são receptores nucleares que desempenham papéis importantes na diferenciação de adipócitos e controle de adiposidade. O objetivo desta tese foi avaliar se o uso de agonistas PPAR? (gemfibrozila) ou PPAR? (pioglitazona) em mães expostas à RC durante a gestação e lactação seriam capazes de programar na prole uma recuperação do peso ao longo da vida sem alterações metabolicamente desfavoráveis. Para isso ratas Wistar foram mantidas em RC de 50% desde o 11º dia de gestação até o 21º dia de lactação, período no qual as drogas gemfibrozila (90mg/kg) ou pioglitazona (10mg/kg) foram incorporadas à ração padrão. Após o desmame, as proles fêmeas seguiram com dieta padrão entre as 22ª e 27ª semanas de vida, sendo submetidas a múltiplas análises ao longo deste período (dosagem de lipídeos, calorimetria indireta, ensaio de produção de VLDL, DEXA para composição corporal, pesagem de coxins adiposo e análise de expressão gênica em tecidos adiposos brancos e marrom). Observamos que o tratamento de mães expostas à RC com gemfibrozila gerou uma prole que teve a capacidade de consumir mais alimento e ganhar mais peso ao longo da vida, resultando em maior adiposidade na vida adulta. Este ganho de adiposidade foi acompanhado de menor acúmulo de gordura no fígado e menor produção de VLDL na vida adulta. Além disto, tal ganho não foi acompanhado de redução no gasto energético, resistência à insulina ou intolerância à glicose. As mães tratadas com gemfibrozila apresentaram concentrações de corticosterona menores que as mães RC no 15° dia de gestação. Já a ativação materna do PPAR? durante gestações e lactações submetidas à RC, por sua vez, não afetou o peso corporal das filhas, mas aumentou a adiposidade visceral. Ao contrário da ativação maternal de PPAR?, os animais nascidos de mães tratadas com pioglitazona apresentaram inflexibilidade metabólica e redução do gasto energético na vida adulta. Estes efeitos foram acompanhados por redução da expressão gênica de UCP1 no BAT, bem como menor peso relativo deste coxim. Além disso, também houve aumento da expressão de genes relacionados a captação e reesterificação de ácidos graxos no tecido adiposo branco da prole nascida de mães expostas à RC e tratadas com pioglitazona

Resumo: A 6-nitrodopamina (6-ND) é uma nova catecolamina liberada em vasos de cordão umbilical humano e em anéis aórticos de Chelonoidis carbonaria (Jabuti). Sua produção e liberação podem ser inibidas por meio do tratamento dos vasos arteriais com inibidor da síntese do óxido nítrico (NO), o L-NAME, ou pela remoção mecânica do endotélio. A 6-nitrodopamina é um vasodilatador, atuando como antagonista seletivo de receptor D2-like dopaminérgico. O presente estudo identificou que a liberação de 6-ND ocorre de forma basal no endotélio intacto e no endotélio desnudado em anéis aórticos de Pantherophis guttatus. Esta liberação foi quantificada pelo método de espectrometria de massas LC-MS-MS. Este estudo identificou, ainda, a interação da 6-ND com outras catecolaminas, utilizando a técnica de banho de órgãos. Esta técnica consiste na suspensão vertical entre dois ganchos metálicos dos anéis aórticos em que a parte inferior do ganho é ligada à base e a outra parte é conectada a transdutores isométricos; o tecido fica submerso em 10ml de uma solução tampão de Krebs-Henselet. Os anéis aórticos foram avaliados de duas formas: uma delas com endotélio intacto e na outra foi retirado o endotélio de forma mecânica. Foi identificado que os anéis aórticos que tiveram o endotélio intacto apresentaram liberação basal da 6-ND, entretanto, após a incubação prévia de L-NAME (100 ?M), a liberação foi significativamente reduzida. Os anéis aórticos com endotélio foram pré-contraídos com endotelina (3nM) e, após, foram submetidos a uma curva dose resposta com: 6-ND (10pM-1?M) e com L-761,626 (10pM-1?M), conhecido como um antagonista dopaminérgico de receptor D2; as duas drogas induziram um relaxamento dependente da concentração administrada, foi evidenciado que, mesmo com a incubação de L-NAME, este relaxamento não foi alterado. Entretanto, quando foi removido o endotélio, observou-se uma redução significativa do relaxamento do anel aórtico. Foi identificado que a curva produzida pelo efeito da incubação de 6-ND (0.1-1 ?M) produziu um significativo desvio à direita nas curvas de concentração-resposta com dopamina em anéis aórticos com endotélio intacto, que foi pré-tratado com L-NAME (pA2 7.01); no entanto, as contrações induzidas por noradrenalina e adrenalina não foram afetadas pela pré-incubação com 6-ND (1 ?M). O estudo também induziu, por estímulos de campo elétrico (EFS), a contração dos anéis aórticos. Identificamos que as contrações induzidas pelo EFS dos anéis aórticos pré-tratados de L-NAME foram, significativamente, inibidas pela incubação com 6-ND (1 ?M). O resultado do presente estudo identificou que o endotélio dos anéis aórticos de Pantherophis guttatus libera a 6-ND; esse achado representa um novo mecanismo pelo qual o NO pode modular a reatividade vascular independentemente da produção de cGMP. Palavras Chave: DOPAMINA, ÓXIDO NÍTRICO, L-761,626, ODQ, LC-MS/MS