42 registros encontrados - programa Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Estrutural E área de concentração Biologia Tecidual
Matheus, Valquiria Aparecida, 1977-
TESE - Multilíngua
Número de chamada: T/UNICAMP M421a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2021.
Assunto: Junções íntimas
Resumo: O trato intestinal, além de atuar no processo de absorção, desempenha importante função de barreira contra agentes nocivos, sejam eles...
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Resumo
Resumo: O trato intestinal, além de atuar no processo de absorção, desempenha importante função de barreira contra agentes nocivos, sejam eles microorganismos ou antígenos provenientes da alimentação. Alterações na morfologia e na função desta barreira parecem contribuir com a patogênese de várias doenças, incluindo o diabetes melito, doença metabólica crônica que afeta milhões de pessoas por todo o mundo. Estudos com o butirato de sódio, um ácido graxo de cadeia curta (AGCC), proveniente do metabolismo da microbiota intestinal, têm mostrado efeito positivo sobre o metabolismo e sobre a barreira intestinal em situações patológicas. A presente Tese de Doutorado tem como objetivo geral estudar a possível ação anti-diabetogênica do butirato de sódio e seu efeito protetor sobre a barreira epitelial intestinal mediada pelas junções de oclusão (JO) em modelos in vivo e in vitro de diabetes melito tipo 2 (DMT2). Camundongos machos adultos, da linhagem C57BL6J, foram distribuídos em quatro grupos experimentais: controle (C); controle+butirato (CB); dieta hiperlipídica (DHL); dieta hiperlipídica+butirato (DB) (n=20 animais/grupo), os quais foram mantidos num período de tratamento de 60 dias. A suplementação com butirato inibiu significativamente as disfunções metabólicas induzidas pela DHL (como intolerância à glicose e resistência à insulina, hiperglicemia jejum e pós-prandial e hiperinsulinemia), bem como reduziu significativamente o ganho de peso e aumentou de forma significativa o gasto energético (avaliado em câmara metabólica). Tais efeitos do butirato foram observados sem alteração da ingestão calórica diária, da expressão hipotalâmica de genes orexigênicos e anorexigênicos e da atividade locomotora. Ainda, em comparação com o grupo DHL, os animais do grupo DB apresentaram um aumento na função secretora de insulina (em ensaio in vitro de secreção estática em ilhotas isoladas), diminuição significativa na adiposidade e na razão massa gorda/massa magra (como avaliado por microtomografia computadorizada), preservação das características morfológicas do tecido adiposo marrom, aumento da expressão de UCP-1 nesse tecido e inibição significativa do quadro de esteatose hepática e de acúmulo de gordura no pâncreas. Quanto à avaliação da estrutura da barreira intestinal, mediada pelas proteínas da junção de oclusão (JO), o tratamento com butirato reverteu os efeitos deletérios da ingestão de DHL sobre a estrutura da JO, observada por imunomarcação juncional de claudinas -1 -2 -3 e de ZO-1 no epitélio de diferentes segmentos do intestino delgado e grosso, bem como reduziu a permeabilidade intestinal a marcadores paracelulares Ainda, esse AGCC não teve um efeito tóxico sistêmico, avaliado através de parâmetros hematológicos e bioquímicos séricos dos camundongos. No modelo in vitro de barreira intestinal, observamos que as células da linhagem Caco-2, expostas ao lavado do conteúdo luminal intestinal de animais que receberam a suplementação com butirato (CB e DB), apresentaram um reestabelecimento da estrutura e função da barreira epitelial mediada pela JO quando comparadas àquelas expostas ao conteúdo intestinal dos animais que receberam a dieta sem suplementação (C e DHL), o que corrobora os dados in vivo. Em conclusão, a suplementação com butirato inibe o efeito diabetogênico do consumo de DHL atenuando as disfunções bioquímicas, teciduais e metabólicas e reforçando a barreira intestinal mediada pela JO em modelos in vitro e in vivo
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP D377a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2015.
Assunto: Genotoxicidade
Resumo: A atrazina é um herbicida largamente empregado no Brasil, e em rios brasileiros concentrações acima do permitido pelo CONAMA já são...
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Resumo
Resumo: A atrazina é um herbicida largamente empregado no Brasil, e em rios brasileiros concentrações acima do permitido pelo CONAMA já são encontradas, o que pode propiciar riscos à ictiofauna entre outros organismos aquáticos. Assim, para avaliar os efeitos da atrazina em espécie de teleósteo de larga distribuição geográfica no Brasil, o presente trabalho teve por objetivo investigar os efeitos de concentração sub-letal (3,57 mg/L) e não letal realística (3 µg/L) desse herbicida (formulação comercial ¿ GESAPRIM/Syngenta) em pacu (Piaractus mesopotamicus). Foram realizados ensaio de exposição de 30 dias seguido de ensaio de recuperação por 14 dias. Para cada ensaio 6 aquários com 6 exemplares de alevinos de pacu (2 aquários para cada grupo experimental: sub-letal exposição/SLE, não letal exposição/NLE, controle exposição/ CE, sub-letal recuperação/ SLR, não letal recuperação/NLR e controle recuperação/CR) foram utilizados, totalizando 72 peixes. Ao término de cada ensaio os alevinos foram pesados e sacrificados por anestesia profunda. Sangue periférico foi colhido para preparo de esfregaços sanguíneos, que foram destinados à avaliação genotóxica da substância nos eritrócitos periféricos por meio do teste do micronúcleo. Amostras de fígado foram colhidas para análise morfológica à microscopia de luz e ultraestrutural. Análise semi-quantitativa das alterações hepáticas induzidas também foi realizada para determinação do índice de severidade do comprometimento hepático. Não foi observado comprometimento do ganho de peso nos alevinos expostos às concentrações de atrazina testadas. A análise da ocorrência de micronúcleos e alterações morfológicas nucleares indicou potencial genotóxico para a concentração testada no grupo SLE, sendo que no ensaio de recuperação o potencial genotóxico foi observado apenas pela indução de anormalidades nucleares e não pela ocorrência de micronúcleos. A análise morfológica do fígado indicou alterações decorrentes da indução de estresse celular que culminaram com morte celular, observando-se inclusive áreas focais de necrose. Estas alterações foram mais frequentes no grupo SLE, e não ocorreu recuperação destas alterações no grupo SLR. No grupo exposto à concentração não letal, alguns exemplares apresentaram alterações de mitocôndrias também sugestivas de estresse celular, porém tais modificações não foram notadas nos alevinos do ensaio de recuperação. A análise do índice de severidade hepática indicou que 60% dos exemplares do grupo SLE e 50% dos exemplares do grupo SLR apresentaram comprometimento severo da função hepática, já os exemplares dos grupos CE, CR, NLE e NLR apresentaram índice indicativo de função hepática não alterada. Assim, os resultados aqui apresentados indicam que a exposição por 30 dias à concentração de 3,57 mg/L de atrazina induz severa alteração da função hepática, não reversível no período de recuperação aqui testado. Já a concentração de 3 µg/L de atrazina, mesmo acima do permitido pelo CONAMA, não acarretou sérios danos para os exemplares expostos e as alterações observadas foram passíveis de recuperação. Finalmente, a atrazina em alevinos de pacu apresentou potencial genotóxico, porém a frequência de ocorrência de comprometimento nuclear é baixa, mesmo na maior concentração testada
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP R71a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2019.
Assunto: Células-tronco embrionárias
Resumo: Durante o desenvolvimento embrionário de camundongos, até o momento da implantação o embrião é composto por dois folhetos extraembrionários, a...
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Resumo
Resumo: Durante o desenvolvimento embrionário de camundongos, até o momento da implantação o embrião é composto por dois folhetos extraembrionários, a endoderme primitiva e a trofectoderma e um folheto embrionário, o epiblasto. Após o processo de implantação, ocorre a gastrulação, a qual é responsável pela formação e posicionamento dos três folhetos germinativos: mesoderme, endoderme e ectoderme, os quais irão originar o embrião em si, entre os estágios E6.5 ¿ E7.5. Esses eventos são finamente regulados por interações entre vias de sinalizações e fatores de transcrição. Coup-TFI e Coup-TFII (Chicken ovalbumim upstream promoter transcription factor I e II), são receptores nucleares que apresentam importantes funções durante o desenvolvimento embrionário, sendo descritos por atuarem na transição entre a pluripotência e aquisição de destinos celulares. Neste trabalho, buscamos avaliar por ensaios de perda de função in vivo utilizando siRNA e in vitro através de nocaute gênico de Coup-TFII, se os Coup-TFs participam na formação da endoderme primitiva, um dos folhetos extraembrionários, além de analisar qual a função de COUP-TFII durante a formação dos três folhetos germinativos por meio da diferenciação de células-tronco embrionárias em corpos embrióides. Nossos resultados sugerem que ambos Coup-TFs participam em conjunto da rede de regulação gênica para a correta especificação da endoderme primitiva, atuando como reguladores negativos, tanto de fatores de pluripotência, quanto de fatores importantes para a especificação da endoderme primitiva. Ao passo que COUP-TFI atua bloqueando a pluripotência para que as células possam seguir destinos de endoderme primitiva, COUP-TFII atua no controle do nível de expressão de genes expressos neste folheto extraembrionário. Adicionalmente, durante a especificação dos três folhetos germinativos, a qual nós analisamos por meio da diferenciação de células-tronco embrionárias, detectamos um padrão de co-expressão de COUP-TFII com marcadores de ectoderme e mesoderme. Esse padrão de co-localização, juntamente com as análises de nocaute gênico sugerem que COUP-TFII está atuando como regulador negativo, tanto de destinos mesodérmicos quanto neuroectodérmicos. Por fim, demonstramos que tanto Coup-TFI como Coup-TFII estão possivelmente sendo regulados pela sinalização FGF, uma importante via de sinalização que controla a formação da endoderme primitiva e a gastrulação. Nossos dados em conjunto adicionam dois novos fatores na rede de regulação que controla a formação da endoderme primitiva, além de demonstramos a participação de Coup-TFII durante a formação dos três folhetos germinativos, eventos essenciais para a formação do embrião
Veiga, Fernanda Cristina da, 1987-
TESE - Multilíngua
Número de chamada: T/UNICAMP V533a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2020.
Assunto: Genes Dapper
Resumo: O gene Dact1 é um importante membro de uma família gênica que codifica proteínas multifuncionais, as quais desempenham papéis no...
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Resumo
Resumo: O gene Dact1 é um importante membro de uma família gênica que codifica proteínas multifuncionais, as quais desempenham papéis no desenvolvimento embrionário e no adulto. Sua função mais conhecida é de modulador da via de sinalização Wnt/beta-catenina, que participa de múltiplos processos biológicos. Neste contexto, esta tese visou caracterizar a expressão gênica e proteica de Dact1 durante a miogênese esquelética de mioblastos murinos (C2C12) e também investigar in silico a modulação de Dact1 em miopatias no humano. Nossos achados revelaram ampla expressão gênica e proteica de Dact1 durante a miogênese em células C2C12, sugerindo que esta molécula possa atuar como um modulador bivalente da via Wnt/beta-catenina. Também foi demonstrado que a transcrição de Dact1 é modificada em doenças humanas, como as distrofias, o que prevê um possível papel fisiopatológico de Dact1 em doenças musculares. Esta tese também buscou ampliar a compreensão da regulação transcricional de Dact1, identificando e caracterizando CNEs (Conserved Non-coding Elements), que potencialmente atuam como elementos cis-reguladores deste gene. Análises de genômica comparativa revelaram a presença de oito CNEs no intervalo genômico KIAA0586-Dact1-Daam1 conservados entre humano, camundongo e galinha. Seis destes CNEs correspondem a elementos reguladores do Ensembl Regulatory Build no genoma humano. A análise de dados de atividade e repressão destes elementos no Ensembl permitiu verificar que há uma correlação entre os padrões de expressão de Dact1 no ser humano com os perfis de atividade/repressão destes elementos em diferentes contextos. A maioria destes CNEs apresenta sítios de ligação para fatores de transcrição (TFBSs) conservados evolutivamente, os quais geram redes de interação proteína-proteína de alta significância, possibilitando mapear interações físicas e/ou funcionais entre estas proteínas e associá-las à atividade de Dact1 em diversos contextos celulares e patológicos no humano. Esta análise sistemática apontou para o CNE4 como possível enhancer de Dact1 no contexto miogênico. A interação entre o CNE4 e o promotor de Dact1 foi confirmada por dados de Hi-C em músculo humano, disponíveis no Gene Expression Omnibus (GEO). Em adição, a atividade de enhancer do CNE4 foi validada in vitro por ensaio com o gene repórter Luciferase em células C2C12. O detalhamento da conservação evolutiva do CNE4 foi realizado comparando a sequência humana com aquelas correspondentes em organismos-modelo, animais domésticos e também de interesse econômico. A análise de TFBSs e de interação proteína-proteína do CNE4 para primatas e bovídeos revelou que as redes de fatores de transcrição geradas possivelmente regulam atividades distintas de Dact1 nestes grupos, indicando divergência funcional. Em conjunto, os resultados apresentados nesta tese abrem novos caminhos para investigações futuras sobre a função de Dact1 na miogênese esquelética e miopatias humanas, bem como apresenta um panorama inédito sobre a regulação transcricional de Dact1 em diferentes contextos, abrindo perspectivas para estudos funcionais e avaliação de SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) nestes elementos cis-reguladores que estejam associados a doenças ou processos evolutivos
Mendes, Leonardo de Oliveira, 1985-
TESE - Multilíngua
Número de chamada: T/UNICAMP M522a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2014.
Assunto: Próstata
Resumo: O etanol provoca danos reprodutivos, diretamente nos tecidos ou indiretamente via eixo hipotalâmico-hiposário-gonadal. A próstata,...
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Resumo
Resumo: O etanol provoca danos reprodutivos, diretamente nos tecidos ou indiretamente via eixo hipotalâmico-hiposário-gonadal. A próstata, hormônio-dependente, é susceptível aos efeitos do etanol. Evidências atribuem papel anti-inflamatório à testosterona, com crescente interesse na ação da terapia hormonal sobre o etanol. Assim, o presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos da terapia hormonal com testosterona sobre o consumo de etanol: 1) nas dosagens hormonais plasmátcas e tecidual, na histopatologia, proliferação celular e na localização e expressão de receptores hormonais (artigo I); 2) nas concentrações plasmáticas e expressão de citocinas pró e anti-inflamatórias (artigo II) no lobo ventral da próstata de ratos UChB. Ratos com 90 dias de idade foram divididos em dois grupos experimentais (n = 20/grupo): C, consumo de água ad libitum,e EtOH, consumo de etanol a 10% (v/v), > 2g de etanol/kg de peso corpóreo/dia, e água ad libitum. Aos 150 dias de idade, 10 ratos de cada grupo receberam injeções subcutâneas de cipionato de testosterona (5mg/kg de peso corpóreo) diluídos em olho de milho durante quatro semanas em dias alternados, T e EtOH+T, enquanto os restantes (10/grupo) receberam somente óleo de milho como veículo. Aos 180 dias de idade, os ratos foram eutanasiados por decapitação para coleta do sangue e as próstatas ventrais foram dissecadas, pesadas e processadas. Secções da próstata ventral foram coradas com hematoxilina e eosina, impregnação pela prata e azul de toluidina. Radioimunoensaio para avaliação das concentrações plasmáticas de testosterona, estradiol, diidrotestosterona (DHT) e testosterona intraprostática, imuno-histoquímica para Ki-67, AR, ER?, ER?, DACH-1,TGF-?1, pSmad 2, e-caderina e ?-actina, western blot para AR, ER?, ER?, DACH-1, PAR4, IL-6 IL-10, TNF? e TGF-?1 e elisa para determinação das concentrações plasmáticas de IL-6, IL-10, TNF? e TGF-?1foram realizados. A terapia com testosterona aumentou o peso da próstata ventral. Houve diminuição do compartimento epitelial e aumento do luminal no EtOH com a terapia hormonal revertendo esses efeitos. O compartimento estromal do EtOH caracterizou-se pela presença de feixes de fibras reticulares delgados e esparsos, com ruptura da camada de células musculares lisas.Focos inflamatórios, metaplasia, atipia reativa inflamatória, perda de adesão entre as células epiteliais e aumento de mastócitos intactos e desgranulados foram frequentes no EtOH e ausentes no EtOH+T. Tanto testosterona como etanol não alteraram a taxa de proliferação celular, porém maior expressão de PAR4 foi observada no EtOH. Houve aumento da testosterona plasmática, intraprostática e DHT no T e EtOH+T e diminuição do estradiol plasmático no EtOH+T. Os T e EtOH+T também apresentaram níveis plasmáticos superiores de TNF? e TGF-?1, sem diferença em relação à IL-6 e IL-10. A expressão de AR, ER?, DACH-1 e IL-6 na próstata foi semelhante entre os grupos experimentais, diferentemente do que foi observado para ER?, TNF? e TGF-?1, que diminuíram após terapia hormonal.Nossos resultados indicam que o etanol foi capaz de induzir a emergência de focos inflamatórios, além de suprimir a imunorreatividade para e-caderina e ?-actina. A testosterona reverteu esses efeitos, reduzindo a expressão do ER?, TGF-?1, TNF? e NFR2, tornando-se um possível alvo a ser avaliado para as disordens causadas pelo etanol
BCCL (1)
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP F369a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2013.
Assunto: Tendões - Anatomia e histologia
Resumo: O tendão calcanear e o tendão flexor digital superficial de frangos são estruturas adaptadas para resistir às forças de tensão geradas pelos...
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Resumo
Resumo: O tendão calcanear e o tendão flexor digital superficial de frangos são estruturas adaptadas para resistir às forças de tensão geradas pelos músculos e transmitidas para os ossos. Em algumas regiões, estes tendões também suportam forças de compressão adicionais às de tensão. Durante o envelhecimento os tendões apresentam modificações nas regiões sujeitas à compressão e a tensão, com variações na composição da matriz extracelular, disposição de fibras de colágeno e celularidade, assim como em suas interações com outros componentes da matriz. O objetivo desse trabalho foi analisar a organização estrutural e a composição da matriz extracelular das regiões submetidas à tensão e a tensão-compressão em diferentes idades (1 mês, 5 meses e 8 meses). O tendão calcanear e o tendão flexor digital superficial foram divididos em região proximal (tensão-compressão) e distal (tensão). Os resultados morfológicos, em ambos os tendões, mostraram presença de uma estrutura fibrocartilaginosa na região sujeita as forças de tensão-compressão. No tendão calcanear foi possível observar ainda, presença de um coxim gorduroso, que se acentuou com o passar da idade. Esse coxim funciona como um amortecedor, uma vez que essa região é muito requisitada durante a locomoção do animal. Já a região que recebe apenas forças de tensão apresentou alterações marcantes nos diferentes tendões em relação aos animais mais jovens. No tendão calcanear dos animais mais velhos, as fibras de colágeno estão mais compactadas exibindo poucas ondulações e células com núcleos alongados, enquanto que no tendão flexor digital superficial essa região apresentou-se com pontos de calcificação, de forma que essa morfologia pode indicar o início do estabelecimento de uma matriz óssea. Análises bioquímicas apresentaram, tanto no tendão calcanear como no tendão flexor digital superficial, aumento da atividade da MMP-2 e MMP-9 comparados aos animais mais jovens, em ambas as regiões, indicando um processo de remodelamento no tecido. No SDS-PAGE do tendão calcanear, componentes com migração eletroforética semelhante ao decorim e fibromodulim aumentaram com o avanço da idade, principalmente na região sujeita às forças de tensão, enquanto que no SDFT o decorim aparentemente diminuiu com o envelhecimento
BCCL (1)
TESE - Multilíngua
Número de chamada: T/UNICAMP C175a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2019.
Assunto: Testículos
Resumo: Baccharis dracunculifolia D. C. (Asteraceae) é uma planta originária do sudeste da América Latina, conhecida por alecrim do campo e utilizada...
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Resumo
Resumo: Baccharis dracunculifolia D. C. (Asteraceae) é uma planta originária do sudeste da América Latina, conhecida por alecrim do campo e utilizada pela população na medicina tradicional cujos seus metabólitos secundários são coletados pela abelha Appis mellifera para a produção de própolis verde brasileira, que é de grande importância para as indústrias alimentícia e farmacêutica, uma vez que exibe propriedades anticâncer, antibacteriana, anti-inflamatória e antiulcerosa, entre outros. Alguns compostos fenólicos estão presentes em sua composição e têm sido descritos, por exemplo, os efeitos adversos dos fitoestrógenos sobre a saúde humana reprodutiva. A falta de uma supervisão de um profissional sobre a dose e o período de ingestão pode expor os consumidores de produtos naturais a riscos. Por outro lado, a infertilidade masculina é um problema comum e complexo e neste sentido, muitas pesquisas nessa área são realizadas para e em muitos casos, as causas são desconhecidas. Há descrição na literatura de muitos produtos naturais que são usados na medicina popular para o tratamento de disfunções sexuais masculinas. Sendo um desses produtos a própolis que parece induzir aumento do nível de testosterona, é capaz de aumentar a produção de espermatozoides e interferir na morfologia do segmento inicial da cabeça do epidídimo. Por outro lado, a dispersão de agrotóxicos no ambiente tem sido associada ao aumento na frequência de distúrbios na saúde, inclusive na fertilidade. A ametrina é um exemplo desses agrotóxicos, que seu efeito na reprodução demonstrou modificações intersticiais testiculares evidentes, com decréscimo no número de células de Leydig e no número de espermatozoides. Como o herbicida afeta negativamente parâmetros reprodutivos, seria interessante avaliar ação da própolis na possível reversão dessas alterações. Portanto, o objetivo dessa tese foi avaliar os testículos de ratos Wistar sobre o efeito protetor da própolis sobre os danos caudados pela ametrina em animais adultos; o efeito da própolis em animais expostos, desde o desmame até a fase adulta de reprodução; o efeito da própolis da geração F1 machos, de fêmeas prenhas expostas durante a gestação. Em todos os resultados, foi observado alterações nos resultados. E como conclusão, nos animais adultos, pode-se inferir que tanto a ametrina quanto a própolis alteraram a fisiologia testicular reduzindo a PDE e os níveis de testosterona séricos. Quando usadas juntas, o efeito foi mais grave pois houve redução do nível de testosterona e indução de peroxidação lipídica, evidenciando que a própolis não teve um efeito protetor ao dano causado ao tecido testicular pelo agroquímico. Nos animais expostos após o desmame, a própolis afetou o desenvolvimento dos órgãos reprodutivos masculinos, prejudicando a fertilidade masculina durante a vida adulta. Portanto, o presente estudo indica que a ingestão de própolis (6mg/kg/dia) pode representar um risco para a reprodução masculina, afetando a esteroidogênese e a PDE de ratos. E na exposição intrauterina, mostramos pela primeira vez uma ligação entre os macrófagos estimulados e a deterioração celular de Leydig causada pelo estresse oxidativo e destaca a possível implicação da Art-C nesse processo
Avaliação da participação das enzimas antioxidantes no envenenamento por "Phoneutria nigriventer"
Fachinelli, Thaísa de Castro, 1988-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP F118a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2016.
Assunto: Sistema nervoso central
Resumo: O veneno da aranha "Phoneutria nigriventer" (PNV) possui potente ação neurotóxica ao afetar a fisiologia de canais iônicos e a...
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Resumo
Resumo: O veneno da aranha "Phoneutria nigriventer" (PNV) possui potente ação neurotóxica ao afetar a fisiologia de canais iônicos e a neurotransmissão. Acidentes graves produzem intensos sinais neurotóxicos centrais decorrentes dessa ação. Estudos experimentais mostram que o PNV quebra a barreira hematoencefálica (BHE). A formação em excesso de espécies reativas de oxigênio (EROs) estão entre as causas que causam abertura da BHE. Nosso objetivo é avaliar se as manifestações neurotóxicas e a quebra da BHE pelo PNV teriam participação do sistema antioxidante. Ratos Wistar ("Rattus norvegicus") machos (6-8 semanas) receberam por via endovenosa 0,85 mg/kg de PNV ou veículo (0,9% salina estéril, controle). O hipocampo, cerebelo e soro foram submetidos aos ensaios de peroxidação lipídica; atividade e expressão (western blotting e imunohistoquímica) das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPX), glutationa redutase (GR) e danos ao DNA. Outros animais foram tratados com o antioxidante quercetina (50 mg/kg) ou com quercetina+PNV (intra-peritoneal). Os sinais neurotóxicos e ensaios experimentais foram avaliados em períodos críticos do envenenamento (15 min-2 h), quando há sinais de melhora (5-6 h) e quando não há sinais de envenenamento (24 h). A quebra da BHE foi analisada pelo extravasamento de Azul de Evans (2%-7mL/Kg) e expressão das proteínas juncionais ocludina, 'beta'-catenina, ZO-1 e laminina. Os resultados mostraram que o hipocampo apresentou-se mais protegido contra os danos em lipídeos (2 e 5 h) e o cerebelo e soro não foram alterados. No soro, a atividade antioxidante foi predominante na fase mais crítica do envenenenamento (15 min-5 h), e após 24 h só a GPX continuava elevada. No hipocampo, GR foi a enzima mais ativa, seguida por CAT no cerebelo e GPX no soro. Em relação à expressão total das enzimas no hipocampo e cerebelo, houve aumento ou diminuição, exceto para SOD que teve aumento constante. A imunohistoquímica mostrou variação por região no hipocampo e cerebelo; os períodos de melhora da neurointoxicação (2-5 h) foram os de menor expressão, sendo SOD e GR as menos expressas. A quercetina atenuou as manifestações tóxicas do envenenamento, com destaque para a ausência da paralisia dos membros inferiores, entretanto não impediu a quebra da BHE como demonstrado pelo extravasamento do corante Azul de Evans e alterações da via paracelular como mostrado pela diminuição das proteínas juncionais e também da laminina. Concluímos que as modulações na atividade/expressão das enzimas refletem ativação/desativação do sistema antioxidante em resposta à flutuação nos níveis elevados de EROs no tecido cerebral, e que são regionalmente diferenciados, no curso dos diferentes períodos do envenenenamento. Evidências sugerem que o hipocampo possui mecanismos detoxificantes mais eficientes, uma vez que nessa região ocorreu dimimuição de danos lipídicos com participação efetiva do sistema glutationa. Sugere-se que os mecanismos detoxificantes desencadeados pelo sistema antioxidante não foram suficientes para impedir a quebra da BHE. O antioxidante quercetina teve papel protetor relevante contra as manifestações neurotóxicas dos animais, porém o flavonóide não impediu a quebra da BHE. O estudo permite avançar no entendimento dos mecanismos envolvidos nos efeitos do PNV no sistema nervoso central
Veiga, Fernanda Cristina da, 1987-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP V533b
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2016.
Assunto: Genes Dapper
Resumo: Os genes da família Dact codificam proteínas multifuncionais que desempenham importantes funções na embriogênese e na manutenção da homeostase...
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Resumo
Resumo: Os genes da família Dact codificam proteínas multifuncionais que desempenham importantes funções na embriogênese e na manutenção da homeostase pós-natal. Em particular, estas proteínas são importantes moduladoras das vias de sinalização Wnt e TGF-?, sendo requeridas para regular os níveis de sinalização parácrina em diferentes contextos celulares, maximizando a eficiência de vários processos biológicos. Estudos recentes associaram ao gene Dact1 a capacidade de modular a diferenciação de pré-adipócitos em adipócitos maduros, demonstrando a grande plasticidade deste gene. Isto posto, uma nova perspectiva se abre em relação ao mecanismo molecular que pode estar agindo sobre a transcrição desse gene no tecido adiposo branco. Neste trabalho foi identificada uma ECR (do inglês, Evolutionary Conserved Region) que potencialmente exerce um papel regulatório na expressão de Dact1, podendo coordenar temporal e espacialmente sua ação. A partir desta abordagem, esta pesquisa aprofundou o conhecimento sobre a ação dessa ECR no contexto da adipogênese, tendo como técnicas análises de Bioinformática, clonagem de fragmentos de DNA genômico, construção de vetores de expressão, análise de expressão gênica por RT-PCR e análise funcional em cultura de células pré-adipogênicas 3T3-L1. Os resultados mostraram que, de fato, o gene Dact1 está sendo transcrito nos pré-adipócitos em estado proliferativo e também durante a indução da diferenciação em células 3T3-L1, assegurando que o aprofundamento no entendimento da regulação deste gene no contexto da adipogênese se faz pertinente e necessário. Neste trabalho também foi analisada a conservação desta ECR entre os vertebrados, identificando os principais polimorfismos presentes nos sítios de ligação para fatores de transcrição presentes nesta região e que são conservados entre diferentes ordens de mamíferos e aves. Ademais, as análises de Bioinformática apontaram que o gene Dact1 pode ser modulado por esta ECR durante a adipogênese, pois apresenta, nesta região, sítios de ligação altamente conservados entre aves e mamíferos para os fatores de transcrição PPAR? e SMADs, personagens centrais do processo adipogênico. Além disso, as análises dos dados de ChIP-Seq do banco de dados da UCSC mostraram que este provável elemento cis-regulador deve agir em outros contextos celulares nos camundongos, como cardiomiócitos e hepatócitos. Ensaios de eletroporação de células 3T3-L1 com construções de expressão contendo a ECR regulando a atividade dos genes-repórter eGFP e Luciferase foram realizados para testar a funcionalidade deste elemento genômico em pré-adipócitos. Os resultados obtidos mostraram que há uma alteração na expressão dos genes-repórter, indicando que esta ECR deve estar sendo induzida neste contexto celular. Estudos adicionais serão importantes para elucidar o mecanismo pelo qual esta região genômica é ativada
Baicere-Silva, Clarianna Martins, 1984-
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP B149c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2013.
Assunto: Espermatogênese
Resumo: A família Characidae apresenta 16 subfamílias e noventa e dois gêneros não assinalados a nenhuma subfamília e, portanto, considerados incertae...
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Resumo
Resumo: A família Characidae apresenta 16 subfamílias e noventa e dois gêneros não assinalados a nenhuma subfamília e, portanto, considerados incertae sedis. Neste grupo são inúmeros os problemas taxonômicos/filogenéticos. A maior parte destes gêneros encontravam-se alocados na subfamília Tetragonopterinae, mas dada à falta de evidências de que Tetragonopterinae constitui um grupo monofilético, manteve-se na subfamília apenas o gênero Tetragonopterus. Os gêneros incertae sedis, em Characidae, constituem um grupo imenso e heterogêneo de peixes, predominantemente pequenos, abundantes nos rios e em outros habitats aquáticos da região neotropical. O conhecimento das relações de parentesco entre os Characidae e, consequentemente, entre os antigos Tetragonopterinae, tem por base principalmente características osteológicas, de anatomia de partes moles e, mais recentemente, dados de seqüência molecular. Sabe-se que as características reprodutivas podem conter importantes sinais filogenéticos. Portanto, procedeu-se uma análise filogenética a partir de dados reprodutivos como a estrutura testicular, o tipo de espermiogênese e a ultraestrutura dos espermatozoides de representantes de alguns dos gêneros incertae sedis em Characidae, anteriormente alocados em Tetragonopterinae e outros Characiformes utilizados como grupo externo. A topologia da árvore obtida, foi parcialmente congruente com as hipóteses existentes para o grupo, comprovando a utilidade deste tipo de dado no que se refere à elucidação dos padrões evolutivos em Characidae
BCCL (1)
Rangel, Raquel Albuquerque, 1985-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP R163c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2018.
Assunto: Desenvolvimento muscular
Resumo: A miogênese é um processo que envolve mudanças progressivas a partir de células progenitoras localizadas nos somitos dos embriões de...
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Resumo
Resumo: A miogênese é um processo que envolve mudanças progressivas a partir de células progenitoras localizadas nos somitos dos embriões de vertebrados. Estas células, conhecidas como mioblastos, passam por uma etapa inicial de intensa proliferação celular para, em seguida, diferenciar-se formando miócitos que se fundem para compor fibras musculares contráteis. O sucesso destas diferentes etapas depende de um complexo panorama de expressão gênica, que envolve a atividade de marcadores moleculares com funções bem estabelecidas. Dentre eles, estão marcadores associados com: 1) o comprometimento da linhagem miogênica e proliferação das células progenitoras (Pax3 e Myf-5), 2) início da diferenciação celular (MyoD, Miogenina, Miostatina), 3) diferenciação terminal e formação das fibras musculares contráteis (cadeia pesada da miosina ¿ MyHC) e 4) marcadores reguladores do ciclo celular (p21), bem como o gene endógeno GAPDH. No presente estudo utilizou-se amostras de tecido da musculatura peitoral de embriões de galinha nos estádios 8, 11, 14 e 17 do desenvolvimento embrionário e células de cultura primária de mioblastos de galinha. Dada a carência de informações sobre a expressão dos marcadores moleculares clássicos da miogênese, o objetivo deste trabalho foi estabelecer o padrão de expressão gênica da Miostatina (Mstn), a distribuição espacial e o conteúdo proteico da MSTN, importante regulador do crescimento e desenvolvimento da musculatura esquelética, e dos demais marcadores selecionados nesse estudo ao longo das diferentes etapas da miogênese esquelética. Para tanto, a atividade dos marcadores selecionados foi definida, primeiramente, por RT-PCR e, em seguida, foi feita a quantificação da expressão gênica por qRT-PCR, tanto em tecidos, modelo in vivo, quanto em células, modelo in vitro. Posteriormente, realizou-se um estudo da distribuição espacial da proteína MSTN, em tecidos e em células, bem como a análise do conteúdo proteico, em tecidos. Além disso, realizou-se uma caracterização morfológica da miogênese fetal em galinha (dias 8, 11, 14 e 17) para observar as modificações que ocorrem ao longo do desenvolvimento. Os resultados confirmaram a expressão gênica da Mstn durante todas as etapas da miogênese fetal em galinha, tanto em tecidos (dias de desenvolvimento embrionário 8, 11, 14 e 17) quanto em cultura primária de mioblastos (cinco dias de diferenciação celular). Quanto aos marcadores moleculares, no modelo in vivo, ocorreu aumento gradual do p21 em consonância com o aumento da expressão da Mstn; Pax3 apresentou indução no dia 11 e teve uma queda acentuada no dia 17; Myf-5 manteve-se constante ao longo dos dias; Myod e Miogenina apresentaram aumento da expressão no dia 11, precedendo o pico de expressão da Mstn no dia 14; MyHC aumentou sua expressão nas etapas mais avançadas do desenvolvimento, com destaque para o dia 17. Em contrapartida, no modelo in vitro, o p21 teve aumento progressivo de sua expressão ao longo dos 5 dias de cultura, em oposição à Mstn; Pax3 e Myf-5 apresentaram maior expressão nos dias 1 e 2 da cultura; Myod e Miogenina tiveram maior expressão nos primeiros dias de cultura; MyHC apresentou-se muito mais expresso nos dias 4 e 5 de cultura celular. Em tecidos, os estudos de expressão gênica corroboraram com os dados obtidos nas etapas seguintes, onde foi observado, por imuno-histoquímica, a distribuição espacial da proteína e a confirmação do conteúdo proteico da MSTN. Enquanto que em células, o resultado obtido por meio da imunocitoquímica não foi conforme o esperado, visto que as células da cultura celular não apresentaram níveis detectáveis da proteína MSTN. O último ensaio produzido neste trabalho, com co-cultura de mioblastos primários fetais com organoides de fibroblastos de galinha, revelou que podem ser os fibroblastos, presentes na co-cultura, que parecem expressar a MSTN, contudo, por ser um achado inédito, serão necessários estudos futuros para comprovar essa hipótese levantada
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP R71c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2015.
Assunto: Fator II de transcrição COUP
Resumo: Células-tronco embrionárias (CTE) são células indiferenciadas que possuem a capacidade de (1) se proliferarem indefinidamente (auto-renovação)...
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Resumo
Resumo: Células-tronco embrionárias (CTE) são células indiferenciadas que possuem a capacidade de (1) se proliferarem indefinidamente (auto-renovação) e, quando induzidas, (2) darem origem a qualquer tipo celular presente no embrião (pluripotência). Uma das abordagens mais comumente utilizadas para o estudo de diferenciação de CTE é através da formação de agregados multicelulares esféricos denominados corpos embrióides (CE). CE passam por um processo de morfogênese semelhante ao observado em embriões, originando derivados dos três folhetos germinativos. Durante o desenvolvimento embrionário, a formação e o posicionamento dos três folhetos ocorre por um processo altamente coordenado que culmina na formação de um embrião polarizado no eixo anteroposterior. Entretanto, um dos grandes desafios de pesquisas que envolvem o uso da diferenciação de CTE em CE é encontrar indícios de que esses processos são recapitulados in vitro e se entender como que células derivadas dos folhetos germinativos, que no embrião ocorrem de forma altamente organizada, são originadas em estruturas celulares sem nenhuma organização global evidente, como visto em CE. Coup-TFII (Chicken ovalbumin upstream promoter-transcription factor II) é um fator de transcrição o qual possui um papel fundamental na regulação do desenvolvimento embrionário e na aquisição de destinos celulares específicos durante a diferenciação de CTE. Utilizando CE como um modelo de estudo, caracterizamos a expressão de Coup-TFII e seu possível envolvimento durante a determinação de destinos celulares. Nossos resultados identificaram uma expressão hemisférica de Coup-TFII em CE em etapas inicias do processo de diferenciação. Esta observação nos levou a caracterizar a distribuição espacial de marcadores moleculares tecido-específicos nos CE em relação à expressão hemisférica de Coup-TFII. Interessantemente, praticamente todas as células identificadas como precursores mesodérmicos e precursores neuroectodérmicos, através da expressão de Brachyury-T e Nestin, respectivamente, estão contidas nas população de células Coup-TFII-positivas. Estes resultados sugerem a existência de um mecanismo de organização global intrínseco nas CTE, onde a expressão de Coup-TFII parece segregar os CE em dois hemisférios e, provavelmente de forma antagônica com Oct4, determinaria diferentes destinos celulares ainda em fases iniciais da diferenciação
BCCL (1)
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP F738c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2018.
Assunto: Miostatina
Resumo: A Miostatina (MSTN) é uma proteína reguladora da deposição da musculatura esquelética e de sua homeostase. Ela atua controlando o balanço...
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Resumo
Resumo: A Miostatina (MSTN) é uma proteína reguladora da deposição da musculatura esquelética e de sua homeostase. Ela atua controlando o balanço entre a proliferação e a diferenciação dos mioblastos, regulando a atividade de genes e proteínas do ciclo celular e dos fatores miogênicos, fatores de transcrição essenciais à diferenciação dos precursores miogênicos e à formação das fibras musculares. Níveis elevados de MSTN são associados a doenças que causam degeneração dos músculos esqueléticos, tais como atrofias, distrofias musculares e caquexia. A proteína GSK-3beta também é encontrada em níveis elevados em pacientes caquéticos e, recentemente, tem sido relacionada ao controle da homeostase e da regeneração muscular devido ao seu papel negativo sobre a via de síntese e degradação proteica Akt/mTOR. GSK-3beta também pode participar da ativação do fator transcricional CREB1 e na regulação de MEIS1 durante a miogênese, mecanismos que a colocam como forte candidata na regulação da atividade do promotor gênico basal da Mstn, o qual possui sítios de ligação para estes fatores de transcrição, em adição ao sítio para NF-Y, importante regulador da miogênese e do ciclo celular. Considerando este cenário, o presente trabalho se propôs a verificar os efeitos da proteína GSK-3beta sobre a transcrição da Mstn por meio da transfecção de células C2C12 com construções de expressão de GSK-3beta. Ademais, nós tratamos mioblastos C2C12 com LiCl, um conhecido inibidor desta proteína. As análises de expressão gênica diferencial revelaram que a proteína GSK-3beta é capaz de aumentar a expressão da Mstn e inibir a transcrição de Creb1, Meis1 e das variantes de Nf-ya, enquanto o comportamento oposto é observado nos tratamentos com LiCl. Foi detectado um leve aumento da quantidade de proteína MSTN em células tratadas com GSK-3beta, enquanto LiCl reduziu os níveis de expressão da proteína. Ensaios da dupla luciferase mostraram que a modulação de GSK-3beta não modifica a atividade do promotor basal da Mstn, mas análises de bioinformática indicam que a indução de expressão da Mstn pode ser consequência da inibição da via Wnt/beta-catenina por GSK-3beta. Nossos dados apontam para GSK-3beta como um alvo importante de pesquisas visando o desenvolvimento de estratégias terapêuticas para modular da expressão da Mstn de modo a recuperar a massa e função de músculos comprometidos
Dinâmica gametogênica em Rhinella schneideri (Anura, Bufonidae)
DISSERTAÇÃO - Multilíngua
Número de chamada: T/UNICAMP M765d
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2015.
Assunto: Contagem de células
Resumo: A contagem de células germinativas, para machos e fêmeas, é uma forma de análise bastante eficiente para determinar períodos favoráveis à...
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Resumo
Resumo: A contagem de células germinativas, para machos e fêmeas, é uma forma de análise bastante eficiente para determinar períodos favoráveis à reprodução. No intuito de descobrir sobre as possíveis variações na produção de gametas de uma população de Rhinella schneideri (Anura, Bufonidae) em uma área urbana do município de Cuiabá, MT, Brasil, fizemos a caracterização das células germinativas e as contamos mensalmente em dois períodos (2007/2008 e 2012/2013). Machos exibem seis categorias de células germinativas, sendo elas espermatogônias primárias e secundárias, espermatócitos primários e secundários, espermátides e espermatozóides. Fêmeas exibem cinco, sendo ovogônias, ovócitos pré-vitelogênicos, vitelogênicos, maduros e complexos pós-ovulatórios. A quantificação celular mostrou diferença no período de maior produtividade gamética entre ambos períodos analisados para ambos os sexos. Para machos todas as categorias de células germinativas foram vistas em todos os períodos, em 2007/2008, o período de maior produtividade gamética corresponde ao período chuvoso, já em 2012/2013 a produção de gametas em agosto foi alta, mas com a chegada do período chuvoso diminuiu, se contrapondo ao encontrado em 2007/2008. Visualizamos, apenas no segundo período, presença de ovócitos pré-vitelogênicos no interior dos túbulos seminíferos de poucos indivíduos da população. Em 2007/2008, as fêmeas apresentaram gônadas em três diferentes estágios de maturação: ovário em período de aptidão reprodutiva, o qual vai de outubro a dezembro de 2007, período de recuperação e crescimento do ovário, o qual vai de janeiro a maio de 2008 e período de repouso, o qual vai de junho a agosto de 2008. Em 2012/2013 elas apresentaram gônadas em dois diferentes estágios de maturação: fase ovário em desenvolvimento a qual ocorre de fevereiro a junho de 2013 e fase de aptidão á reprodução, na qual o ovário tem abundância de ovócitos maduros e complexos pós-ovulatório observada de agosto de 2012 a janeiro de 2013. A dinâmica gametogênica para ambos sexos difere na mesma população em momentos distintos e pode estar relacionada às ações antrópicas. Isso é um fato comum a outras espécies de anuros e pode estar relacionado à localização geográfica da população
Matheus, Valquiria Aparecida, 1977-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP M421e
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2016.
Assunto: Diabetes mellitus
Resumo: Diabetes melito é uma doença metabólica crônica que afeta milhões de pessoas por todo o mundo. Aproximadamente 90 a 95% dos casos são do tipo...
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Resumo
Resumo: Diabetes melito é uma doença metabólica crônica que afeta milhões de pessoas por todo o mundo. Aproximadamente 90 a 95% dos casos são do tipo 2, que está relacionado à resistência periférica à insulina e obesidade. A dieta rica em lipídios altera a composição da microbiota intestinal e pode levar a uma quebra de barreira epitelial intestinal que tem por consequência a entrada sistêmica de patógenos ou antígenos provenientes da alimentação. Tem sido sugerido que uma disfunção nesta barreira pode levar a um processo inflamatório sistêmico, contribuindo para o desenvolvimento do quadro de resistência periférica à insulina resultando em diabetes. Levando em conta o efeito anti-inflamatório do butirato de sódio sobre doenças intestinais, estudos com a suplementação de butirato de sódio na dieta, em modelos in vivo, tem demostrado melhora do quadro patológico. O objetivo desta dissertação foi estudar a influência do consumo da dieta hiperlipídica (DHL) sobre a barreira epitelial intestinal mediada pela junção de oclusão e investigar o efeito do butirato sobre os parâmetros metabólicos e sobre a função de barreira paracelular epitelial intestinal em camundongos obesos e pré-diabéticos após ingestão de DHL. Camundongos machos adultos, da linhagem C57BL6J, foram divididos em quatro grupos experimentais (dieta controle; dieta controle+butirato; dieta hiperlipídica; dieta hiperlipídica+butirato; n=14 animais/grupo) e mantidos num período de tratamento de 60 dias. Com relação aos parâmetros metabólicos, o butirato induziu uma diminuição significativa da hiperglicemia em jejum e pós-prandial induzida pela DHL (60d), sendo que a ingestão diária, em gramas, das diferentes dietas foi similar em todos os grupos experimentais. O alto nível de glicose plasmática do grupo que recebeu DHL foi acompanhado por um quadro de hiperinsulinemia, o qual não foi observado após tratamento com butirato. O teste de tolerância à insulina comprovou que, com a suplementação com butirato, os animais tornaram-se mais sensíveis a este hormônio chegando ao nível de resposta muito próximo a do grupo controle. A suplementação com butirato induziu ainda uma diminuição significativa tanto do ganho de peso corpóreo como do acúmulo de tecido adiposo visceral induzida por DHL. A análise morfológica de cortes histológicos da mucosa intestinal mostrou que não houve diferenças histológicas significativas entre os grupos experimentais e nem indícios de inflamação local induzida pela exposição à DHL. Quanto à avaliação da estrutura da barreira intestinal, mediada pela proteína da junção de oclusão, a claudina 1, o tratamento com butirato induziu um aumento significativo na imunomarcação juncional e do conteúdo proteico dessa proteína juncional nos segmentos intestinais (jejuno, íleo e cólon); a claudina 1 não foi imunodetectada no duodeno de nenhum dos grupos experimentais. Quanto à avaliação funcional da barreira com marcador Dextran-FITC, a suplementação com butirato parece ter reforçado a função de barreira epitelial devido a menor presença desse marcador no plasma dos animais que receberam a suplementação. Os dados sugerem que a suplementação com butirato inibe o efeito deletério do consumo de DHL sobre os parâmetros metabólicos e induz um aumento da expressão proteica de claudina 1, resultando em um reforço na barreira epitelial intestinal
Oliveira, Letícia Prado, 1988-
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP OL4e
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2017.
Assunto: Matriz extracelular
Resumo: Considerando que o tratamento com estatinas é favorável em vários tipos de lesões, este trabalho investigou a influência da administração por...
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Resumo
Resumo: Considerando que o tratamento com estatinas é favorável em vários tipos de lesões, este trabalho investigou a influência da administração por via oral e da aplicação local de sinvastatina no tendão de Aquiles após tenotomia parcial. Ratos Wistar foram tratados durante 7 e 21 dias após a tenotomia parcial e divididos nos seguintes grupos: N tendão intacto; L7 e L21 tendão lesionado; SL7 e SL21 tendão lesionado tratado com a administração local de uma esponja de colágeno embebida com uma solução de sinvastatina (2,2 mg/50?l); VL7 e VL21 tendão lesionado com administração local de uma esponja de colágeno embebida com uma solução aquosa de carboximetilcelulose a 0,5% como veículo; SO7 e SO21 tendão lesionado tratado com sinvastatina por via oral; VO7 e VO21 tendão lesionado tratado com carboximetilcelulose 0,5% por via oral. Foi realizado ELISA para interleucina 1 beta (IL-1Beta) e fator de transformação do crescimento beta (TGF-Beta). As análises funcionais foram realizadas pelo sistema de Catwalk. Para as análises bioquímicas foi realizada zimografia para metaloproteinases 2 e 9 (MMP-2 e MMP -9), western blotting para colágeno I e III, dosagem de glicosaminoglicanos (GAGs). Para as análises morfológicas, cortes de tendões foram corados com azul de tolouidina (AT) e a organização dos feixes de colágeno foi analisada através da birrefringência. O grupo tratado com sinvastatina por via oral exibiu menores concentrações de IL-1Beta um dia após a lesão. O grupo SO7 apresentou uma redução significativa de TGF-Beta comparado ao grupo VO7. A marcha dos animais foi significativamente melhor nos grupos SO7 e SO21. Todos os grupos analisados em 7 e 21 dias apresentaram uma redução significativa de colágeno do tipo III. Houve um aumento significativo da MMP-2 ativa nos grupos L7, VL7, VO7, SO7 e nos grupos L21 e SO21. Ambas as isoformas de MMP-9 nos grupos SO7 e SO21 apresentaram valores mais próximos aos valores do grupo normal. Além disso, as fibras de colágeno do grupo SO21 exibiram uma melhor organização e compactação quando comparados com os demais grupos lesionados neste mesmo período. Nossos resultados sugerem que o tratamento por via oral com sinvastatina foi benéfico na recuperação da marcha dos animais, na organização das fibras de colágeno e, além disso, parece exercer uma modulação de IL-1Beta, TGF-Beta e da atividade de MMPs durante a cicatrização do tendão. Sendo assim, futuramente, é possível que a sinvastatina administrada por via oral seja empregada como terapia após uma ruptura de tendão
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP So85e
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2022.
Assunto: Paridade
Resumo: Os processos fisiológicos da gravidez e do parto impactam adaptações drásticas do canal do parto e do assoalho pélvico para permitir distensão...
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Resumo
Resumo: Os processos fisiológicos da gravidez e do parto impactam adaptações drásticas do canal do parto e do assoalho pélvico para permitir distensão acentuada seguida de retorno ao estado pré-gestacional. No entanto, numerosos estudos epidemiológicos sugerem que muitas mulheres não conseguem se recuperar completamente desse evento; de fato, o trauma da distensão dos órgãos do canal de parto parece desempenhar um papel importante na causa do prolapso de órgãos pélvicos (POP), caracterizado pelo descenso de um ou mais órgãos pélvicos, como a bexiga, o útero, o reto e o intestino delgado pelo canal vaginal. Durante a prenhez, o canal de parto se remodela para permitir um parto seguro. Nessa remodelação hormonalmente regulada, a sínfise púbica, uma junção fibrocartilaginosa, é uma das estruturas que passa por modificações, as quais resultam no afastamento dos ossos púbicos com a formação do ligamento interpúbico, o qual se conecta ao osso pela êntese, uma estrutura de transição com gradações e organização diferencial celular e dos componentes de MEC. Após o primeiro parto, o processo de retorno assegura a homeostase e a estabilidade mecânica dos tecidos pélvicos. Sucessivos partos impactam a recuperação da histoarquitetura articular. Contudo, são pouco conhecidos os efeitos da multiparidade e da idade nas células e na MEC da entese da sínfise púbica durante a prenhez e o retorno pós-parto, o que pode auxiliar na compreensão da fisiopatologia do prolapso de órgãos pélvicos. Deste modo, o presente estudo buscou compreender e comparar as alterações da entese entre camundongos fêmeas primpíparas e multíparas senescentes durante a prenhez e o pós-parto. Durante a prenhez e o pós-parto, camundongos C57BL6/6J primíparos e multíparos senescentes foram estudados a microscopia de luz convencional e polarizada, microscopia eletrônica de transmissão, imuno-histoquímica e PCR em tempo real. Foram caracterizadas alterações morfológicas e moleculares no que diz respeito à população celular, aos componentes da MEC, à imunolocalização e à expressão gênica de marcadores condrogênicos e osteogênicos na êntese de animais multíparos quando comparadas às enteses de animais primíparos. Apesar de não ocorrer a recuperação da cartilagem na articulação interpúbica nos animais multíparos senescentes, nossos resultados sugerem que a êntese contém células metabolicamente ativas durante a prenhez e o pós-parto, mas com perfil de expressão de marcadores condrogênicos e osteogênicos reduzidos em função da paridade e da idade. Assim, nosso estudo evidencia alterações na sínfise púbica de camundongos multíparos senescentes e tais alterações podem fornecer bases para compreender disfunções nos mecanismos biológicos capazes de remodelar o canal do parto, alterando consequentemente a estabilidade pélvica, um fator crítico para a compreensão da fisiopatologia do POP
Costa, Carolina Frandsen Pereira da, 1990-
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP C823e
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2021.
Assunto: Currículos
Resumo: "Núcleo curricular essencial" aqui se referem aos tópicos do conhecimento que deveriam ser necessariamente e indispensavelmente abordados no...
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Resumo
Resumo: "Núcleo curricular essencial" aqui se referem aos tópicos do conhecimento que deveriam ser necessariamente e indispensavelmente abordados no decorrer de uma disciplina. Este estudo descreve o processo de elaboração de um núcleo curricular essencial de embriologia humana para o curso de graduação em medicina, usando o método de Delphi como ferramenta para obtenção de consenso, em um processo democrático e baseado em pesquisa. A partir da identificação de conteúdo essencial, foi feita a reestruturação e elaboração de um livro digital (e-book), contendo animações, exercícios e casos clínicos que priorizam tópicos classificados como essenciais. A aprovação ética para este estudo foi concedida pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Universidade Estadual de Campinas (Referência CAAE 59382016.0.0000.5404). Um método Delphi modificado, de duas rodadas, com sete fases, foi usado para identificar tópicos essenciais de conteúdos de embriologia: (1) um questionário inicial foi desenvolvido pela equipe de pesquisa, com seleção dos tópicos de conteúdo de embriologia, (2) a validação do questionário foi realizada por um painel piloto; (3) na primeira rodada do painel os participantes foram solicitados a avaliar a relevância de cada tópico em uma escala Likert e os dados demográficos foram coletados; (4) a seguir foi realizada a análise de consenso e identificação de informações demográficas; (5) a segunda rodada do método de Delphi, os participantes foram convidados a aceitar ou rejeitar os tópicos mais relevantes da rodada anterior, (6) foi realizada a análise de consenso e o processo de seleção final dos tópicos considerados essenciais, (7) a análise estatística envolveu análise de agrupamento multivariada e análise de categorização descritiva. Os resultados estão listados a seguir: (1) Três livros didáticos de embriologia foram selecionados para a seleção de tópicos de conteúdo de embriologia. Um conjunto de 1.577 tópicos brutos foi identificado. Tópicos sinônimos ou semelhantes foram unificados, resultando em 679 tópicos. (2) O tempo médio de resposta ao questionário foi de 53 minutos. (3) Os convites aos painelistas foram enviados a 109 especialistas de oito instituições, e na primeira rodada participaram 57 pessoas (52,3%). Seis dos participantes deixaram seções inteiras sem resposta e suas entradas foram excluídas da análise. (4) O painel de especialistas (n = 51) foi composto por 49% mulheres e 51% homens, e a idade variou de 29 a 70 anos. A faixa etária mais frequente foi 55-59 anos (20%) e 40-44 (20%). No painel, 78% eram médicos, 14% biólogos, 6% cientistas biomédicos e um era enfermeiro (2%). Após análise de consenso, de um total de 679 tópicos em embriologia humana, 10% foram considerados essenciais (n = 69), 32% importantes (n = 215), 44% aceitáveis ??(n = 300) e 12% não exigidos (n = 79). (5) 69 tópicos selecionados para a segunda rodada foram classificados de acordo com a taxa de aceitação. Cinco tópicos alcançaram índice de aceitação igual ou inferior a 80% e foram rejeitados. (6) O núcleo recomendado para o tema Embriologia Humana selecionado pelo painel Delphi, após análise de consenso, foi composto por 64 itens. (7) Os resultados obtidos com o método Delphi foram corroborados pelas análises fatoriais e multivariadas. Nenhuma das seis características demográficas (sexo, faixa etária, titulação, ano de graduação, especialidade médica e ano da última especialização dos respondentes) pôde ser significativamente associada aos dois clusters produzidos após a análise multivariada de agrupamento. No entanto, o núcleo curricular sugerido por especialistas médicos foi de 64 tópicos, enquanto o núcleo curricular sugerido por especialistas não médicos foi de 204 tópicos. A concordância entre esses dois grupos - coeficiente kappa (0,0535) - foi significativa (p <0,0001). Para concluir, este estudo pode ser uma ferramenta valiosa para a tomada de decisão sobre o que deve ser o currículo essencial de embriologia para os cursos de graduação em medicina ou outros cursos da área da saúde, especialmente em instituições brasileiras e outras instituições latino-americanas
Soares, Edilene Siqueira, 1989-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP So11e
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2015.
Assunto: Barreira hematoencefálica
Resumo: Neste trabalho investigamos a permeabilização da barreira hematoencefálica (BHE) pela peçonha da aranha Phoneutria nigriventer (PNV) através...
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Resumo
Resumo: Neste trabalho investigamos a permeabilização da barreira hematoencefálica (BHE) pela peçonha da aranha Phoneutria nigriventer (PNV) através da via transcelular no cerebelo de ratos. As cavéolas foram analisadas nas células endoteliais pela expressão de proteínas associadas à sua formação (caveolina-1, Cav-1 e dinamina-2, Din2) e internalização (caveolina-1 fosforilada, pCav-1 e quinase da família Src, SKF), e nos astrócitos com avaliação da caveolina-3 (Cav-3) e da conexina-43 (Cx43) (formadora de junções comunicantes). A ação do PNV sobre o endotélio também foi avaliada pela ativação (acoplamento) ou inativação (desacoplamento) da enzima eNOS, produtora de óxido nítrico (NO). As estruturas que compõe a BHE foram avaliadas através de microscopia eletrônica de transmissão. Inicialmente, o estudo de Cav-1 contemplou sua localização, expressão gênica e proteica após o envenenamento em diferentes idades, ratos neonatos eram mais suceptíveis ao envenenamento do que ratos adultos. Após PNV, a imunomarcação para Cav-1 foi mais evidente na camada granular e molecular e em neurônios de Purkinje. A expressão Cav-1 e Din2 (foramdoras das vesículas e seu gargalo, respectivamente) aumentou em períodos de envenenamento agudo (1 h), de recuperação (5 h) e na ausência de sinais clínicos (24 h); em contrapartida SKF e pCav-1 envolvidas na internalização caveolar foram superexpressas em períodos opostos (às 2 h e 72 h). O PNV induziu aumento da metaloproteinase-9 da matriz (MMP9), importante mediadora de quebra da BHE e aumentou a formação e o tráfego de vesículas no endótelio após envenenamento. A análise de eNOS revelou desacoplamento (aumento de monômeros) nos períodos de envenenamento agudo (1-2 h) com progressivo retorno e super-expressão de dímeros (re-acoplamento) às 72 h; essas alterações foram relacionadas à ação do PNV sobre os níveis intracelulares de cálcio investigado pelo aumento na expressão de calmodulina e confimado pela localização de calbindina-D28. Os dados revelam a interferência do PNV sobre a homeostase endotelial e função vascular ao afetar o sistema eNOS/NO, importante controlador do tônus vascular. Nos astrócitos, as cavéolas são formadas por Cav-3 e sua superexpressão é associada a doenças neurológicas. O PNV aumentou significativamente os níveis basais de Cav-3 em astrócitos GFAP positivos (astrogliose reativa) em períodos de aumento de Cx43 (às 1, 5 e 24 h), e na vigência de edema citotóxico nos pés astrocitários e alterações nos contatos sinápticos axo-dendríticos e axo-somáticos. Em conjunto os resultados revelam que: (a) a quebra da via transcelular da BHE pelo PNV tem aumento da endocitose via cavéolas; (b) componentes da unidade neurovascular, como endotélio, astrócitos e neurônios estão intimamente envolvidos; (c) no endotélio, os efeitos são mediados pelo sistema eNOS/NO; (d) a SKF ativa o sistema endocítico e de transporte vesicular; (e) nos astrócitos, a dinamica expressão de Cx43 e Cav-3 e o retorno aos níveis basais em paralelo com a ausência de sinais de intoxicação nos animais (72 h) dá evidências de que ambas as proteínas interagem na resposta astrocitária. Os dados permitem sugerir que a presença de peptídeos neurotóxicos no veneno de Phoneutria nigriventer estão no centro dos efeitos aqui relatados
BCCL (1)
Barbieri, Mainara Ferreira, 1987-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP B234e
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2014.
Assunto: Albumina
Resumo: A origem da albumina nos órgãos do trato reprodutor masculino tem sido questionada ao longo dos anos sendo sua presença tecidual...
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Resumo
Resumo: A origem da albumina nos órgãos do trato reprodutor masculino tem sido questionada ao longo dos anos sendo sua presença tecidual constantemente atribuída a um mecanismo de extravasamento do plasma sanguíneo para o espaço extravascular intersticial, atribuindo-se ao fígado o papel de sítio de síntese desta proteína no período pós-natal. O padrão de distribuição da proteína albumina nos tecidos epiteliais de órgãos do trato reprodutor masculino reserva questionamentos quanto à veracidade de seu alcance luminal pelo rompimento de suas barreiras hematoteciduais. Carreador de esteroides; estimulador de células de Leydig; mediador do mecanismo parácrino de comunicação entre células de Sertoli e germinativas; promotor de proliferação celular e mediador de mudanças estruturais em membranas celulares, com suposta participação na reação acrossômica e capacitação do espermatozoide são possíveis papéis atribuídos à albumina no trato reprodutor masculino. A associação da proteína albumina a componentes glicídicos não é usual para mamíferos, porém há respaldo a essa hipótese através das PES (glicoproteínas pré-albumínicas epidídimo-específicas de ovinos) e dados de nosso grupo de pesquisa através do epítopo reconhecido pelo anticorpo monoclonal (Amc) TRA 54 (testicular germ cells immunized to rat). Essa dissertação de mestrado retoma a polêmica discussão centrada na presença, origem, localização e função da albumina no trato reprodutor masculino e se propôs, através de uma abordagem cronológica pós-natal (períodos neonatal, pré-púbere, púbere, adulto e idoso) a rediscutir os fundamentos teóricos associados à principal proteína sérica de mamíferos bem como o dúbio perfil de expressão dessa proteína em Ratos analbuminêmicos Nagase (NAR). Nesse estudo, a presença da proteína albumina foi evidenciada por immunoblotting em todos os grupos e períodos do desenvolvimento pós-natal, apresentando padrão distinto de bandeamento para testículos e epidídimos NAR. A localização celular da proteína albumina foi identificada em camundongos, por imunohistoquímica, principalmente no tecido intersticial e nas células da linhagem germinativa. Testículos de ratos Sprague Dawley adultos apresentaram marcação adicional para células de Sertoli. Testículos e epidídimos de NAR mantiveram reatividade intersticial, sugerindo, ainda que em níveis extremamente baixos, a expressão de albumina. Para epidídimos, foi identificado amplo espectro de perfis de imunomarcação das células epiteliais e estereocílios. Ductos deferentes apresentaram, na região proximal ao epidídimo, imunomarcação citoplasmática e, na região distal, marcação de estereocílios e espermatozoides luminais. Perfis de imunomarcação citoplasmática também foram observados em vesícula seminal, próstata e uretra peniana, principalmente, no período adulto. Por fim, a presença de transcritos de RNAm detectados por ensaios de RT PCR (reação em cadeia de polimerase via transcriptase reversa) para testículos e epidídimos foi confirmada desde o período neonatal até idoso, mostrando-se também presente para ducto deferente a partir da puberdade. A abordagem do desenvolvimento pós-natal revelou um pico de maior expressão da albumina no período adulto com início do declínio registrado no período idoso. Como ressalva final, a confirmação da presença de RNAm para órgãos do trato reprodutor masculino não invalida a hipótese da também presença de albumina circulante, sintetizada, em primeira instância, pelas células hepáticas
BCCL (1)
Contriciani, Renata Erbert, 1976-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP C768c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2018.
Assunto: Genes Dapper
Resumo: A miogênese esquelética é o processo de formação da musculatura esquelética, que ocorre durante o desenvolvimento embrionário de cada...
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Resumo
Resumo: A miogênese esquelética é o processo de formação da musculatura esquelética, que ocorre durante o desenvolvimento embrionário de cada indivíduo, assim como no crescimento e reparo do tecido muscular ao longo do período pós-natal. A cultura primária de mioblastos de galinha é uma cultura celular simples e é considerada um dos melhores modelos para estudo da miogênese in vitro. Isto porque os mioblastos coletados do embrião conseguem recapitular em poucos dias as fases básicas da miogênese in vivo, desde a proliferação à diferenciação terminal e contração das fibras musculares. Pelo conjunto de vantagens expostas, este sistema foi escolhido para realização dos ensaios deste estudo, os quais ocorreram ao longo dos cinco dias necessários para que as células da linhagem miogênica passem do estado proliferativo à diferenciação terminal para formar fibras musculares contráteis. O objetivo principal desta pesquisa foi investigar a expressão do gene Dact1 e da proteína correspondente (DACT1) durante a miogênese in vitro, dado seu papel como modulador dos sinais das vias de sinalização WNT/beta-catenina e WNT/PCP, necessários na miogênese esquelética de vertebrados. Para validar a cultura primária de mioblastos como um modelo para estudo da miogênese de aves, foram realizadas análises morfológicas e detecção dos padrões de expressão proteica (Miogenina e Desmina) e gênica (Dact1, Ciclina D1, MyoD e Miogenina) ao longo dos cinco dias da miogênese in vitro. Os resultados confirmaram a expressão de Dact1, conforme hipotetizada inicialmente, assim como revelaram a coerência da expressão dos marcadores avaliados com as etapas correspondentes da miogênese ao longo dos diferentes dias de cultura. Na etapa seguinte, a expressão de DACT1/Dact1 foi caracterizada por imunofluorescência e qRT-PCR nos cinco dias de miogênese em cultura. Estes ensaios revelaram que DACT1 é expressa no núcleo e citoplasma dos diferentes tipos celulares presentes na cultura primária (mioblastos, miotubos, miofibras jovens e maduras). Em conjunto com os ensaios de qRT-PCR, foi detectada indução da expressão de DACT1/Dact1 nos dias mais avançados da miogênese, quando ocorre a diferenciação terminal e maturação das fibras musculares. Finalmente, a análise de expressão gênica (RT-PCR e hibridação in situ) e proteica (imunofluorescência) no tecido peitoral de embriões de galinha no dia 11 de desenvolvimento confirmaram a expressão de Dact1/DACT1 in vivo. Em conjunto, os dados apresentados neste trabalho apontam para DACT1 como uma molécula envolvida nas diferentes etapas miogênese esquelética de aves, em particular as mais tardias, onde ocorre uma forte indução da sua atividade gênica e proteica. Estes resultados abrem a possibilidade de que Dact1 participe tanto da miogênese de outros vertebrados quanto em humanos, incluindo esta molécula no repertório de proteínas que podem estar envolvidas em processos de patologias musculares, envelhecimento e reparo do tecido muscular. Várias possibilidades de atuação de DACT1 foram levantadas na discussão deste trabalho, contudo estudos funcionais serão necessários para comprovar as hipóteses levantadas
Delatti, Paula Cristina Rugno, 1991-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP D375e
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2017.
Assunto: Genes Dapper
Resumo: Os genes da família Dact codificam proteínas multifuncionais que desempenham funções cruciais durante o desenvolvimento embrionário. Em...
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Resumo
Resumo: Os genes da família Dact codificam proteínas multifuncionais que desempenham funções cruciais durante o desenvolvimento embrionário. Em particular, estas proteínas são importantes moduladoras das vias de sinalização Wnt/beta-catenina e TGF-beta, uma vez que elas são requeridas para regular os níveis de sinalização parácrina em diferentes contextos celulares, maximizando a eficiência de vários processos biológicos. Dada a importância das vias Wnt e TGF-beta para a correta formação do corpo do embrião de vertebrado, esta pesquisa visou caracterizar o padrão de expressão dos genes Dact1, Dact2 e Dact3 em membros de camundongos no estádio E14,5, uma etapa do desenvolvimento marcada pela diferenciação tecidual. Em adição, foram estabelecidos os padrões de expressão dos marcadores moleculares Col2a1, Sox9, Runx2, MyoD, Dcx, Bmp2 e Bmp7 visando compará-los com os perfis de expressão dos genes Dact. O padrão de expressão dos genes estudados foi definido por ensaios de hibridação in situ em cortes histológicos de membros, utilizando-se sondas de RNA antisenso gene específicas. Cortes sagitais de embriões de camundongos no estádio E14,5 também foram incluídos nas análises de expressão dos genes Dact. Finalmente, marcações por imunofluorescências foram realizadas para confirmar a expressão das proteínas Sox9 e Runx2 em tecidos específicos dos membros em E14,5. Nossos resultados mostraram que os genes Dact são expressos em um amplo repertório de tecidos nos membros em desenvolvimento de camundongo. A pele, o tecido cartilaginoso, o tecido muscular e o endotélio de vasos sanguíneos de pequeno calibre são os tecidos de maior nível de expressão. Surpreendentemente, a análise dos marcadores moleculares revelou que apenas o gene Col2a1 mostrou um padrão característico de marcador molecular, com sua expressão associada unicamente ao tecido cartilaginoso em desenvolvimento. Os demais genes incluídos neste estudo como marcadores moleculares apresentaram perfis de expressão complexos, abrangendo vários tecidos. Por exemplo, Sox9 e Runx2, marcadores do tecido cartilaginoso e ósseo, respectivamente, são fortemente expressos no músculo esquelético em formação no membro. Esta expressão foi confirmada ao nível proteico por ensaios de imunofluorescência, revelando que não apenas os mRNAs mas também as proteínas codificadas por estes genes estão presentes em células do tecido muscular em desenvolvimento. O estudo dos cortes sagitais dos embriões em E14,5 mostrou que os mesmos tecidos que expressam os genes Dact nos membros também expressam estes genes ao longo do eixo principal do corpo do embrião. Em adição, a análise destes cortes revelou que os genes Dact são expressos em altos níveis no sistema nervoso central e periférico, assim como nos primórdios de vários órgãos do embrião, como pulmões, fígado e rins. Em conjunto, os resultados desta pesquisa mostram que os genes Dact são expressos em múltiplos tecidos, dentre os quais estão vários que requerem sinais Wnt e TGF-beta para se desenvolver corretamente
Mantovani, Carolina Stefano, 1989-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP M319e
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2015.
Assunto: Miostatina
Resumo: A Miostatina (MSTN) é uma proteína que regula negativamente a formação de musculatura esquelética, e sua estrutura e função são conservadas em...
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Resumo
Resumo: A Miostatina (MSTN) é uma proteína que regula negativamente a formação de musculatura esquelética, e sua estrutura e função são conservadas em diversas espécies, incluindo humanos. O nocaute de seu gene causa hiperplasia e hipertrofia das fibras musculares, o que despertou grande interesse médico e agropecuário desde a descoberta deste gene. Trabalhos anteriores descrevem a função da proteína, mas ainda faltam dados sobre a regulação da sua expressão gênica. Recentemente, o promotor do gene da Mstn foi identificado e caracterizado pelo nosso grupo de pesquisa, a partir de uma abordagem filogenética. Entretanto, além do promotor, também existem outros elementos cis-reguladores que podem atuar como estimuladores ou silenciadores do processo de transcrição gênica. Em conjunto com o promotor gênico, esses elementos controlam a taxa de transcrição e conferem especificidade espacial e temporal para sua expressão. Sendo assim, a proposta deste trabalho foi identificar e caracterizar possíveis elementos cis-reguladores da Mstn a fim de ampliar o conhecimento sobre a sua regulação transcricional. Para tal, análises de genômica comparativa, semelhantes àquelas empregadas na identificação do promotor gênico da Mstn, foram realizadas para localizar regiões evolutivamente conservadas (ECRs) adjacentes ao lócus da Mstn de humano, camundongo e galinha, bem como para identificar potenciais sítios de ligação para fatores transcricionais conservados nessas regiões. Além disso, foi realizada uma análise da evolução desses possíveis elementos cis-reguladores, a fim de identificar polimorfismos que tenham o potencial de afetar a atividade transcricional da Mstn. Nossos resultados revelaram a existência de um arcabouço regulatório ancestral composto por sítios de ligação conservados em várias das ECRs analisadas, o qual tem sido mantido entre 310 e 430 milhões de anos. Além disto, foram identificados polimorfismos, bem como sítios de ligação grupo-específicos, os quais podem estar envolvidos na regulação diferencial da atividade da Mstn e, portanto, na geração de diferentes fenótipos musculares entre os animais. Dentre as oito ECRs estudadas, duas possuem maior potencial de estarem envolvidas na miogênese, uma vez que nelas foram identificados sítios de ligação para importantes fatores relacionados a este processo. Análises funcionais das ECRs 2 e 5/6 em células C2C12 em diferenciação confirmaram o potencial dessas ECRs de humano e camundongo de atuarem como elementos cis-reguladores, uma vez que mostraram que eles são capazes de modificar a expressão do gene repórter EGFP em comparação ao controle. As ECRs de galinha, por outro lado, não geraram resultados significativos, reforçando a hipótese de que as diferenças nos TFBS encontradas no grupo das aves geram alterações funcionais nas ECRs. O desenrolar de novos estudos a partir dos resultados obtidos neste trabalho permitirão estabelecer o papel específico das ECRs identificadas, bem como determinar a importância das variações de sequências destes elementos reguladores em diferentes animais. No longo prazo, nossas pesquisas poderão subsidiar o desenvolvimento de estratégias que possibilitem a modulação da atividade da Mstn em patologias humanas que afetam a musculatura esquelética
BCCL (1)
Silva, Monica Maria Moreira, 1960-
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP Si38e
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2014.
Assunto: Sínfise púbica
Resumo: Em camundongos, a sínfise púbica (SP) é metabolicamente ativa durante a prenhez. As adaptações orquestradas por hormônios e a sobrecarga...
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Resumo
Resumo: Em camundongos, a sínfise púbica (SP) é metabolicamente ativa durante a prenhez. As adaptações orquestradas por hormônios e a sobrecarga mecânica imposta na sínfise, que gradualmente dá lugar ao ligamento interpúbico (Lip) e ao seu "relaxamento" no final da prenhez permitem a passagem da prole pelo canal do parto. Tais modificações oferecem oportunidade para estudo de remodelação de tecidos semelhantes às que ocorrem nas disfunções e distopias do assoalho pélvico feminino. Estudaram-se características morfológicas, imunohistoquímica das proteínas Galectina-3(GAL3) e CartilageOligomericProtein Matrix (COMP) e o comportamento biomecânico, na SP de camundongos fêmeas adultas jovens, durante a primeira prenhez e após o parto por meio de técnicas histológicas convencionais, imunohistoquímica, microscopia de luz, eletrônica de transmissão e varredura. Nas análises da organização fibrilar utilizou-se transformada rápida de Fourier (FFT) e do comportamento biomecânico ensaio destrutivo de tração uniaxial em máquina de testes universal com velocidade constante e força progressiva nas SP/Lip de camundongos C57BL6 grupos: (NP-controle), 12, 15 e 19 dias (d) após a verificação do plug vaginal e no 30, 50 e 100dias após o parto (dpp). No ensaio de tração uniaxial, a força máxima necessária para o início da ruptura do tecido diminuiu no decorrer da prenhez, sendo o menor valor medido no dia do parto, aumentou a partir deste dia, e no 10dpp retornou a valores próximos aosdos animais NP. A energia total de ruptura (ETR) diminuiu no 12d e a partir de 15d aumentou até o 5dpp, no 10dpp, diminuiu porém se manteve menor que o NP. Na Imunolocalização das proteínas COMP e GAL3 foram detectadas em todos os grupos, com variações no tipo celular e na localização. A morfologia bicorne do útero de camundongos e o peso do útero com os filhotes alteram os estímulos mecânicos nos tecidos interpúbicos e contribuem para sua remodelação. No 3dpp, quando os estímulos mecânicos foram abruptamente retirados no parto, observaram-se organelas compostas por microtúbulos semelhante a cílio solitário não móvel, citado como organela mecanosensorial. O comportamento biomecânico dos tecidos interpúbicos durante a prenhez e após o parto foi coerente com a histoarquitetura destes e a imunolocalização das proteínas COMP e GAL-3, à medida que o comportamento biomecânico dos tecidos se modifica são indicativos que essas proteínas estão envolvidas no remodelamento de transições de elementos ósseos e ligamentares e fibrocatilaginosas durante a prenhez e após o parto. Este remodelamento que proporciona afastamento de ossos púbicos e a rápida recuperação que se inicia pós-parto, oferece suporte ao canal de parto de animais que possuem útero bicorne a exemplo do camundongo, morcego e cobaia
BCCL (1)