149 registros encontrados - programa Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química E área de concentração Desenvolvimento de Processos Biotecnológicos
Westin, Cecília Buzatto, 1987-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP W527a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2016.
Assunto: Engenharia tecidual
Resumo: Neste trabalho visou-se desenvolver e avaliar o uso de suportes porosos produzidos com xantana, quitosana e Poloxamer P188, perfurados (QXp)...
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Resumo
Resumo: Neste trabalho visou-se desenvolver e avaliar o uso de suportes porosos produzidos com xantana, quitosana e Poloxamer P188, perfurados (QXp) ou não (QX), e de poli(caprolactona) (PCL) eletrofiada contendo ou não dexametasona (DEX) para adesão, crescimento e diferenciação de células-tronco mesenquimais (CTM) dentárias, ainda pouco exploradas com tal finalidade, em combinação com o fator de diferenciação kartogenina. Foram analisados o aspecto, morfologia da superfície, absorção e perda de massa em diferentes soluções aquosas, espessura, eficiência de incorporação e cinética de liberação da dexametasona, comportamento térmico, cristalinidade e citotoxicidade indireta dos suportes. O comportamento das CTM foi avaliado por determinação dos parâmetros cinéticos de crescimento, microscopia eletrônica de varredura e análise histológica da diferenciação celular. Os suportes QXp apresentaram interconectividade aumentada entre os poros. A matriz de PCL exibiu aspecto macroscópico homogêneo e flexível, com distribuição aleatória de fibras, e a presença de DEX não resultou em diferença macroscópica na morfologia dos suportes. Maior absorção foi verificada para QXp, em água. Para os suportes de PCL, devido à limitada absorção, notou-se menor perda de massa. As espessuras médias variaram de 887 a 969 µm para suportes QXp e de 286 a 395 µm para os de PCL. A impregnação de DEX nos suportes QXp não foi efetiva. Porém, nos suportes de PCL, o fármaco foi adequadamente incorporado por adição direta, notando-se liberação máxima em 72 h em concentração apropriada para a diferenciação celular em condrócitos. A adição de DEX não alterou a estabilidade do suporte de PCL de acordo com dados de análise termogravimétrica. A análise de difração de raios X demonstrou estrutura amorfa para os suportes QXp e cristalina para os de PCL. A velocidade específica máxima de crescimento das CTM dentárias foi de 0,03 h-1, e o tempo de duplicação, de 23,1 h. Baixa citotoxicidade foi verificada para todas as matrizes, sendo as de PCL menos citotóxicas que as de QXp. A menor concentração de kartogenina utilizada (100 nmol/L) foi a mais adequada para a indução da diferenciação celular, por implicar em menor relação custo/benefício. Observou-se adesão, proliferação e diferenciação apropriadas das células em condrócitos tanto nos suportes de QXp quanto nos de PCL com dexametasona, concluindo-se que ambos são aplicáveis na área de Engenharia de Tecidos cartilaginosos
Adsorção de corantes em turfa de origem Magalhânica
Sepúlveda Cuevas, Luisa Antonia
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP Se63a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2011.
Assunto: Adsorção
Resumo: O objetivo deste trabalho foi estudar a remoção dos corantes Naftol Azul Preto (NAP), Azul Maxilon 5G (AM) e Azul Brilhante de Remazol R...
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Resumo
Resumo: O objetivo deste trabalho foi estudar a remoção dos corantes Naftol Azul Preto (NAP), Azul Maxilon 5G (AM) e Azul Brilhante de Remazol R (ABRR) em fase aquosa por adsorção em turfa de origem magalhânica. De acordo com a caracterização físico-química do adsorvente, os principais grupos funcionais detectados foram os carboxílicos, fenólicos, hidroxilas, aminas e metil, que lhe conferiram uma carga preferencialmente negativa e um Ponto de Carga Zero (PCZ) igual a 3,68. Os resultados dos experimentos em batelada mostraram que a adsorção do corante NAP foi fortemente dependente da carga superficial da turfa. Os modelos de isotermas de Langmuir, Freundlich e Sips foram bem correlacionados aos dados experimentais de equilíbrio de ambos os corantes. As capacidades máximas de adsorção (qm) e o parâmetro de energia de Langmuir (b) dos corantes NAP e AM alcançados foram de 33,7 e 33,1 mg/g e 0,031 e 0,139 L/mg, respectivamente. De acordo com os resultados dos experimentos cinéticos em tanque agitado, as porcentagens de remoção e as capacidades de adsorção atingidas foram de 81 e 97 %, 12 e 30 mg/g para os corantes NAP e AM, respectivamente. Os modelos cinéticos de segunda ordem e de Langmuir foram bem correlacionados aos dados experimentais para baixas concentrações iniciais de corante. A modelagem do sistema mostrou que a difusão intrapartícula acontece de forma paralela no volume e na superfície do poro e é a etapa que controla a velocidade de transporte das moléculas de corante até os sítios ativos da turfa. Os coeficientes de difusão no poro foram determinados entre 1,08-3,5 10-10 m2/s e os coeficientes de difusão na superfície entre 0,2-1,5 10-11 m2/s. Dos ensaios em colunas de leito fixo, as capacidades de adsorção na saturação variaram entre 17,1 e 30,1 mg/g para o corante AM nas condições selecionadas. A altura de transferência de massa foi dependente da concentração e vazão da alimentação com valores entre 14 e 23 cm. De forma oposta, as capacidades de adsorção do corante NAP foram entre 2-3 mg/g, equivalente a 20-30 % da capacidade de equilíbrio em ensaios em batelada. Esses resultados foram atribuídos às baixas energias de adsorção do corante em turfa. O modelo de THOMAS apresentou uma boa predição da concentração de corante na fase inicial das curvas de ruptura (C/Cf < 0,5), quando o corante AM foi adsorvido em um leito de turfa. No entanto, o modelo não foi capaz de predizer o comportamento do corante NAP
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Adsorção de IgG humana em duas matrizes porosas derivatizadas com o ligante histidina
Aquino, Luciana Cristina Lins de
DISSERTAÇÃO - r d
Número de chamada: T/UNICAMP Aq56a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2000.
Assunto: Adsorção
Resumo: A técnica de adsorção por afinidade, que utiliza adsorventes com alta seletividade para adsorver compostos, principalmente proteínas, tem sido...
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Resumo
Resumo: A técnica de adsorção por afinidade, que utiliza adsorventes com alta seletividade para adsorver compostos, principalmente proteínas, tem sido empregada para remover autoanticorpos do plasma de pacientes com doenças auto-imunes e também na produção em larga escala de drogas terapêuticas através do ftacionamento do plasma humano ou animal. Na circulação extracorpórea o plasma do paciente é alimentado em uma coluna contendo um ligante imobilizado em uma matriz insolúvel que remove os auto-anticorpos, e as proteínas não adsorvidas retomam para o paciente sem nenhuma alteração. Na busca de sistemas adequados para a aplicação no tratamento de doenças auto-imunes, esta pesquisa investiga a adsorção de IgG em dois suportes de afinidade empregando a histidina como ligante, imobilizado em membranas de fibras ocas de álcool poli etileno vinílico (pEV A) e gel de copolímero de metacrilato (Toyopearl), denominados His-PEV A e His- Toyopearl, respectivamente. Sendo verificada a possibilidade de adsorção de IgG em ambos suportes, experimentos de seletividade e de capacidade de adsorção em modo dinâmico e estático demonstraram uma maior eficiência para o sistema His-PEV A do que para o HisToyopearl, tanto na presença do tampão Hepes a pH 7,0 como do Tris-HCI pH a 7,4. Através da obtenção de isotermas de adsorção, para os suportes com e sem ligante, à temperatura ambiente e à 37 °C, foi constatada a existência de interações não-específicas entre a proteína e a matriz, sendo necessário efetuar as etapas de lavagem, eluição e regeneração, após ser atingido o equilíbrio de adsorção, para obter a quantidade de proteína adsorvida especificamente nos suportes. A determinação de parâmetros como a capacidade máxima de adsorção, a constante de dissociação do complexo IgG-histidina (KJ) e as constantes cinéticas de adsorção (Iça) de dessorção (kd) de proteína, indicaram que apesar de ambos sistemas apresentarem uma afinidade pela proteína da mesma ordem de grandeza (lO-sM), o suporte His-PEV A apresenta uma maior capacidade para a adsorção específica de proteína, nas temperaturas analisadas
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Bresolin, Igor Tadeu Lazzarotto, 1981-
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP B754a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2010.
Assunto: Imunoglobulina G.
Resumo: Dentre os hemoderivados disponíveis comercialmente, as imunoglobulina do isotipo G (IgG) recebem destaque pelo seu uso em aplicações...
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Resumo
Resumo: Dentre os hemoderivados disponíveis comercialmente, as imunoglobulina do isotipo G (IgG) recebem destaque pelo seu uso em aplicações terapêuticas. Por esta razão são requeridas com elevado grau de pureza. Várias técnicas vêm sendo investigadas para a purificação de IgG a partir do soro ou plasma humano, desde a precipitação até métodos mais seletivos, como os cromatográficos. Neste trabalho, investigou-se o efeito de agentes quelantes de IMAC (cromatografia por íons metálicos imobilizados) como Tris-2(aminoetil)amina (TREN) e o-fosfoserin (OPS) como grupos ionogênicos (sem íon metálico imobilizado), além do aminoácido L-Lisina e seu polímero poli-L-Lisina (PLL) como ligantes visando a purificação de IgG a partir do soro humano. Para tanto, foram realizados experimentos de adsorção em diferentes sistemas tamponantes. A seletividade dos adsorventes foi verificada por eletroforese SDS-PAGE e análise nefelométrica. As melhores condições, para cada caso, foram utilizadas em experimentos de curvas de ruptura e isotermas de adsorção de albumina de soro humano (HSA) e IgG. No caso dos ligantes TREN e PLL, 73% e 86% da IgG alimentada foi recuperada nas frações não-retidas (cromatografia negativa) apresentado pureza superior a 90%. Quando o ligante OPS foi utilizado, por sua vez, a recuperação de IgG ocorreu nas frações retidas juntamente com IgM. Experimentos de curva de ruptura mostraram que um fator de purificação de 4.9 foi atingido, sendo a IgG recuperada com pureza de 88%. Este ligante se mostrou eficiente quando se deseja purificar IgG humana que possui pontos isoelétricos na faixa de 7,8 a 8,5. Para todos os ligantes, a recuperação de IgG a partir soro humano pode ser alcançado sob condições brandas de pH, baixa força iônica, e temperatura ambiente. De um ponto de vista de processo em larga escala, todos os ligantes apresentados neste trabalho apresentam potencial para serem usados como uma das etapas em um processo industrial de recuperação e purificação de IgG
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Capelletti, Raquel Vannucci, 1978-
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP C171a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2015.
Assunto: Água - Poluição
Resumo: Biofilmes microbianos são frequentemente formados por contaminantes remanescentes ou resistentes a procedimentos de limpeza e sanitização,...
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Resumo
Resumo: Biofilmes microbianos são frequentemente formados por contaminantes remanescentes ou resistentes a procedimentos de limpeza e sanitização, estando presentes em variados locais, desde indústrias a hospitais. A água é o principal estímulo para o desenvolvimento microbiano, e seu fluxo tem papel importante na disseminação de contaminantes. Biocidas são comumente utilizados para o controle microbiano, porém podem gerar culturas resistentes e causar corrosão em tubulações, requerendo frequente reposição para manter sua atividade. Este estudo teve por objetivo avaliar o uso de biocidas de diferentes categorias associados a membranas de biopolímeros como estratégia alternativa de prevenção e controle de contaminação em sistemas envolvendo fluxo de água, visando minimizar o uso de produtos agressivos, especialmente em ambientes susceptíveis com alta circulação de pessoal. Foram utilizados os polissacarídeos quitosana e alginato para a constituição das membranas, ambos de origem biológica e de baixa toxicidade a mamíferos. Culturas microbianas típicas, bem como as isoladas da tubulação, de torneiras, de chuveiros, e do ar de ambientes industriais, foram expostas, nas formas suspensa em água, em biofilmes e em cultura pura e mista, aos agentes antimicrobianos selecionados, associados ou não aos biopolímeros. Observou-se que a eficácia de uso das membranas depende da sua composição e da diversidade microbiana contaminante. A quitosana com menor grau de desacetilação (85%) mostrou-se mais efetiva, de modo geral, que a de 98%. Em pH 4,0 a formulação de quitosana apresentou maior atuação contra bactérias. Em pH 7,0 a atividade foi mais pronunciada contra fungos. A quitosana com 85% de desacetilação em pH 7,0 apresentou melhor atividade sobre microrganismos planctônicos, especialmente contra a bactéria Gram-positiva S. aureus, enquanto o alginato mostrou melhor desempenho na erradicação de biofilmes de culturas puras. Em biofilmes mistos ambos os polissacarídeos se mostraram promissores. O aumento da concentração dos biopolímeros de 1 para 2% não proporcionou aumento da eficácia. As membranas contendo apenas quitosana ou alginato apresentaram-se pouco efetivas contra os contaminantes testados, sendo a membrana formada por quitosana de melhor desempenho, mas ainda pouco atuante contra bactérias Gram-negativas e fungos. A incorporação de biocidas nesta membrana favoreceu a ampliação do seu espectro de atuação para todas as formulações, mesmo sob lixiviação. Mesmo não tendo sido possível adequar a formulação para a incorporação de todos os biocidas selecionados (classe dos desinfetantes), obteve-se alternativas promissoras, tais como a membrana contendo o biocida à base de n-octilisotiazolinona, que se mostrou majoritariamente efetiva contra fungos, em especial a versão encapsulada para exposição à lixiviação, enquanto que a formulação contendo nitrato de prata a 1,5% com benzisotiazolinona a 9%, contra bactérias. De modo global, a minimização apropriada do uso de biocidas pôde ser demonstrada, embora seja ainda dependente da diversidade na microbiota avaliada. Células em suspensão ou em biofilmes possuem diferentes mecanismos de desenvolvimento e ambos devem ser avaliados para que se possa delinear tratamentos mais efetivos, sendo a proposição de um conjunto de recomendações preventivas e de monitoramento que reflita cuidados com o segmento industrial e que dê diretrizes a outros ambientes susceptíveis considerada de alta relevância para atingir este propósito
Aplicação da blenda de sericina/alginato na produção de partículas para adsorção de íons metálicos
Lima, Jacqueline Oliveira de, 1990-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP L628a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2015.
Assunto: Alginatos
Resumo: A sericina é uma proteína presente no casulo do bicho-da-seda, geralmente descartada em efluentes de processos de fiação. O uso do alginato na...
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Resumo
Resumo: A sericina é uma proteína presente no casulo do bicho-da-seda, geralmente descartada em efluentes de processos de fiação. O uso do alginato na formação da blenda com essa proteína visa melhorar as características físicas do biomaterial produzido. Processos de adsorção conduzidos por biomateriais surgem como alternativa aos processos convencionais para o tratamento de efluentes. Neste sentido, o objetivo deste estudo foi investigar o uso de partículas de sericina/alginato como um bioadsorvente para a remoção de íons metálicos de águas residuais. A partícula otimizada para o teste de afinidade com íons metálicos foi a reticulada termicamente a 100°C e produzida por gotejamento em solução aquosa de CaCl2. Desse teste foi obtida a seguinte ordem de afinidade: Cd2+ > Cr3+ > Ni2+ > Zn2+ > Cu2+ > Pb2+ > Ag+. Os ensaios cinéticos e de equilíbrio foram realizados com o íon metálico Cd2+, para o qual a partícula apresentou maior porcentagem de remoção (85,2%). Os modelos cinéticos de Pseudoprimeira ordem, Pseudossegunda ordem, Difusão intrapartícula, modelo de Boyd e Transferência de massa em filme externo foram ajustados aos dados experimentais. Os resultados mostraram que a difusão intrapartícula e a transferência de massa em filme externo desempenham papel considerável na bioadsorção de Cd2+ por partículas de sericina/alginato. As isotermas de equilíbrio foram avaliadas utilizando os modelos de Langmuir, Freundlich e Dubinin-Radushkevich. O modelo de Freundlich, no qual se prevê a heterogeneidade dos sítios de adsorção, foi o que representou o melhor ajuste aos dados experimentais em todas as temperaturas avaliadas (10, 20, 40 e 60°C). Parâmetros termodinâmicos, como a variação da energia de Gibbs (?G), da entalpia (?H) e da entropia (?S), foram determinados pela lei de Henry. A adsorção de íons cádmio em partículas de sericina/alginato foi termodinamicamente espontânea e de natureza exotérmica. Análises de caracterização deste bioadsorvente, antes e após o processo de adsorção, foram realizadas por meio das seguintes técnicas: Fisissorção de N2 (BET), Picnometria a gás hélio, Porosimetria de mercúrio, Microscopia Eletrônica de Varredura, Microscopia Ótica, Espectroscopia no Infravermelho, Difração de raios-X, Análise Termogravimétrica, Análise Termodiferencial e Potencial Zeta. Verificou-se que a adsorção de íons de cádmio não altera significativamente as propriedades do sólido adsorvente. Os resultados sugerem, então, que as partículas de sericina/alginato podem ser aplicadas como bioadsorventes eficazes para a remoção de Cd2+ de águas residuais
Silva Junior, Absolon Carvalho da
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP Si38a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2012.
Assunto: Cromatografia líquida de alta eficiência
Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital
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Capelletti, Raquel Vannucci, 1978-
DISSERTAÇÃO - r d
Número de chamada: T/UNICAMP C171a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2006.
Assunto: Biofilmes
Resumo: Biofilmes são associações de espécies microbianas interdependentes, funcionando de forma complexa e coordenada como mecanismo de colonização...
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Resumo
Resumo: Biofilmes são associações de espécies microbianas interdependentes, funcionando de forma complexa e coordenada como mecanismo de colonização de superfícies. Quando indesejavelmente instalados em uma planta industrial, os biofilmes contribuem para a contaminação de muitas áreas de processo, pois representam fontes de liberação e disseminação de microrganismos que podem deteriorar produtos, causando prejuízos financeiros e retrabalho, situação esta que pode ser prevenida e/ou controlada. No entanto, sua remoção representa um desafio, principalmente no que diz respeito à determinação do tipo e da dosagem adequada de biocida para este fim. Freqüentemente, a abordagem para a resolução deste problema é empírica. O presente trabalho teve por objetivo desenvolver um protocolo reprodutível para a formação de biofilmes em laboratório a partir de consórcios microbianos e a avaliação de sua susceptibilidade aos biocidas mais recomendados. Foram utilizados como inóculo microrganismos presentes em fluido de corte proveniente da indústria de usinagem de metais, por ser este um dos principais segmentos industriais sujeitos à formação de biofilmes. A metodologia adotada foi a recomendada para a utilização do dispositivo MBEC¿, um aparato amplamente empregado nas áreas médica e odontológica para o estudo de patógenos isolados, enfocando-se no estudo a influência de variáveis como tipo e concentração do inóculo, tempo e temperatura de incubação para a obtenção do biofilme e tempo de sonicação para desagregação do biofilme. Os resultados obtidos mostraram que o procedimento estabelecido para a obtenção in vitro de biofilmes foi plenamente satisfatório utilizando o inóculo constituído do fluido contaminado, e que tais biofilmes foram eficientemente erradicados na presença de biocidas não-oxidantes em concentrações 12 vezes superiores às normalmente empregadas. A temperatura de 25 ou 35°C e período de 48 h de incubação devem ser empregados para o desenvolvimento do biofilme e, para sua desagregação, recomenda-se efetuar a sonicação por 30 minutos. O isolamento das culturas puras a partir do consórcio microbiano original da amostra de fluido de corte, e o estudo dos biofilmes formados a partir das cepas isoladas não resultou na formação de biofilmes com número suficiente de células aderidas, indicando a ocorrência de seleção de cepas sem grande capacidade de adesão e de cepas fastidiosas e até mesmo não-cultiváveis, que requerem condições especiais de cultivo e que são essenciais para corresponder à flora original da amostra na formação do biofilme
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Avaliação de meio de cultura para a produção de interleucina-2 por linfoblastos murinos
DISSERTAÇÃO - r d
Número de chamada: T/UNICAMP G132a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2002.
Assunto: Interleucinas
Resumo: As interleucinas são moléculas da família das citocinas que apresentam atividade modificadora da resposta biológica. Dentre os diferentes...
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Resumo
Resumo: As interleucinas são moléculas da família das citocinas que apresentam atividade modificadora da resposta biológica. Dentre os diferentes tipos de interleucinas já caracterizadas está a interleucina-2 (IL-2), que tem um papel importante na restauração da função imunológica, sendo utilizada no tratamento de alguns tipos de câncer e de doenças infecciosas. Neste trabalho, realizou-se um estudo da composição de um meio de cultura que conduzisse a um aumento da produção de IL-2 por linfoblastos murinos linhagem EL-4. Para isso, foram avaliados os efeitos das concentrações de glutamina e dos indutores de formação de IL-2 forbol-12-miristato-13-acetato (PMA) e concanavalina A (Com A), dos percentuais de Pluronic F68 e soro fetal bovino (SFB) e da concentração de inóculo celular sobre a produção de IL-2 e o crescimento das células EL-4. Para a avaliação dos efeitos destas variáveis utilizou-se a metodologia de planejamento experimental. Os ensaios foram realizados primeiramente de maneira estática, em placas de cultura, e, após a obtenção da formulação do meio de cultura mais adequada, realizaram-se ensaios cinéticos, em maior escala, em frascos do tipo spinner. Nos estudos realizados utilizando-se a metodologia do planejamento experimental, verificou-se que a concentração de IL-2 mostrou uma tendência de aumento com a elevação da concentração de PMA, enquanto a viabilidade celular diminuiu com a presença de soro fetal bovino... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital
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Avaliação do efeito do sal volatil carbamato de amonio sobre a estabilidade de enzimas
Silva, Lucimara Lopes da, 1979-
DISSERTAÇÃO - r d
Número de chamada: T/UNICAMP Si38a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2008.
Assunto: Eletrólitos
Resumo: A precipitação de proteínas com sais é uma etapa de purificação freqüentemente encontrada em bioprocessos. Porém, a necessidade de um...
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Resumo
Resumo: A precipitação de proteínas com sais é uma etapa de purificação freqüentemente encontrada em bioprocessos. Porém, a necessidade de um tratamento posterior para recuperação do sal e purificação da proteína torna o processo de precipitação com sais convencionais oneroso, além de limitado por questões ambientais. A precipitação com sais voláteis é uma alternativa à precipitação convencional, tendo como principal vantagem a fácil remoção destes sais dos precipitados e efluentes líquidos através da elevação da temperatura ou diminuição da pressão. A indução do "salting-out" de proteínas por estes sais para foi inicialmente investigada por nosso grupo de pesquisa, no entanto, algumas proteínas apresentaram indícios de desnaturação, embora a eficiência da precipitação tenha sido verificada. Para esclarecer esta questão, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do sal volátil carbamato de amônio na atividade de cinco enzimas (a-amilase, lisozima, celulase, peroxidase e lipase). Realizaram-se ensaios mantendo-se as enzimas a 4,0ºC por 60 min em soluções 1,0 a 5,0 molal deste sal. Depois da remoção do sal volátil, as massas secas foram dissolvidas em tampões apropriados e estas soluções tiveram sua concentração de proteína e atividade enzimática determinadas. Experimentos similares com sais convencionais também foram feitos, assim como ensaios de precipitação com carbamato de amônio em forças iônicas de 5,0 a 9,0 molal. a-Amilase, lisozima e lipase não tiveram perda de atividade em soluções salinas de 1,0 a 5,0 molal, enquanto que celulase e peroxidase mostraram uma perda de atividade média de 55% e 44%, respectivamente. Análises dos experimentos similares com sulfatos de amônio e de sódio levam à conclusão que estas duas enzimas desnaturaram em presença do sal volátil carbamato de amônio. Os ensaios de precipitação não mostraram nenhuma desnaturação enzimática ou separação de fases para a-amilase e lipase, enquanto que a celulase e a peroxidase precipitaram com alguma perda de atividade. Os balanços de massa e de atividade determinados para estes casos não permitiram uma conclusão definitiva sobre o efeito do sal volátil sobre estas duas enzimas durante a precipitação
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Mariño Bohórquez, Mayra Alejandra, 1985-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP M339a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2014.
Assunto: Glicosídeo hidrolases
Resumo: O crescente interesse pelo aproveitamento da matéria-prima renovável vem demandando novas tecnologias eficientes na produção de etanol de...
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Resumo
Resumo: O crescente interesse pelo aproveitamento da matéria-prima renovável vem demandando novas tecnologias eficientes na produção de etanol de segunda geração a fim de reduzir os altos custos associados com as enzimas envolvidas na sacarificação. Este estudo teve como objetivo principal concentrar, através de precipitação com etanol, glicosil hidrolases responsáveis pelas atividades de endoglucanase, ?-glicosidase, FPase e xilanase produzidas por Trichoderma harzianum P49P11. As variáveis de precipitação testadas foram temperatura, concentração de etanol e pH do fermentado. O etanol demonstrou potencial para recuperar ao redor de 98% da atividade de xilanase correspondente a 17,6 U/mL através de precipitações com 90% de etanol (v/v) em todas as temperaturas testadas (5,0, 15 e 25°C) e pH 5,0. Sob estas mesmas condições de precipitação, 90% de etanol (v/v) e pH 5,0, porém a 5°C, foi obtida a máxima recuperação da atividade de celulase (FPase) sendo 77% correspondente a 0,08 U/mg. Esta última formulação causou precipitação instantânea. Desta forma, a precipitação com etanol pode ser considerada uma técnica eficiente para concentrar xilanase e, em certa medida, para o complexo de celulase
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DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP Eg92a
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2009.
Assunto: Licopeno
Resumo: Nos últimos anos o cultivo de células animais tornou-se uma importante tecnologia de produção de vacinas e proteínas terapêuticas...
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Resumo
Resumo: Nos últimos anos o cultivo de células animais tornou-se uma importante tecnologia de produção de vacinas e proteínas terapêuticas recombinantes. Durante o crescimento in vitro de células animais, alterações nas condições ambientais ótimas do cultivo podem resultar em perda de viabilidade. Uma forma de controlar a apoptose, que é um processo de morte celular programado, é a inclusão de agentes antioxidantes no meio de cultura. O licopeno, cuja principal fonte é o tomate, tem despertado crescente interesse devido às suas propriedades antioxidantes e por apresentar atividade de proteção contra o câncer e doenças do coração. A caracterização da atividade biológica do licopeno in vitro é dificultada pelo fato de que solventes potencialmente tóxicos são empregados para sua obtenção. Assim, a extração de licopeno de tomate empregando CO2 supercrítico, consiste em uma opção atraente. Neste trabalho desenvolveu-se um processo de obtenção de licopeno de suco de tomate a partir de extração com CO2 supercrítico, em diferentes condições de temperatura e pressão, sem a etapa prévia de secagem do material, mas pela substituição de parte da água por etanol. Após a caracterização do extrato quanto à atividade antioxidante, a aplicabilidade do extrato como agente antiapoptótico foi avaliada no cultivo de células animais, especificamente da linhagem Drosophila melanogaster S2. Foram obtidos rendimentos na faixa de 7,7% a 76,9%, com efeito estatisticamente significativo apenas para a temperatura. Através da análise por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), observou-se que o licopeno é o principal composto presente nos extratos obtidos, com picos de 82,7% em média. O estudo da atividade antioxidante indicou que o extrato obtido à 40 ºC e 350 bar apresenta maior capacidade antioxidante, de 49,7% pelo método do DPPH_ e 38,2% pelo método do rubreno. Nos ensaios de citotoxicidade, o mesmo extrato não apresentou efeito citotóxico às células S2 em concentrações inferiores a 0,182 mg/mL quando disperso no solvente DMSO, entretanto quando disperso em THF, mostrou-se citotóxico às células. O extrato dissolvido em DMSO apresentou elevado potencial para ser utilizado como agente antiapoptótico no cultivo de células S2, resultando em proteção superior a 92% contra a apoptose induzida por H2O2
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Biodegradação e bioconversão do d-limoneno por bactérias isoladas de esgoto doméstico
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP OL4b
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2013.
Assunto: Limoneno
Resumo: As indústrias cítricas geram grandes quantidades de efluentes líquidos. Estes efluentes são potencialmente poluidores para descarte em corpos...
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Resumo
Resumo: As indústrias cítricas geram grandes quantidades de efluentes líquidos. Estes efluentes são potencialmente poluidores para descarte em corpos d'água e necessitam de tratamento adequado. A maioria das plantas de tratamento de efluentes cítricos utiliza processos biológicos, devido a custos operacionais mais baixos quando comparado aos processos físico-químicos. Porém, estas plantas têm apresentado problemas de eficiência de remoção da carga orgânica e inibição da atividade biológica, em função das características tóxicas do efluente cítrico, devido à presença residual do d-limoneno, um monoterpeno extraído da casca da laranja. O d-limoneno, quando separado e purificado, tem ampla aplicação industrial, na área cosmética como fragrância e na área alimentícia como agente antimicrobiano e também pode ser bioconvertido em produtos como ácidos e alcoóis perílicos e carvona que podem ser utilizados na terapia do câncer. Os objetivos deste estudo foram selecionar e identificar microrganismos capazes de degradar o d-limoneno em altas concentrações (até 5%), simulando condições similares aos efluentes cítricos e avaliar o comportamento de consórcio destes microrganismos. Também foi avaliada a qualificação dos produtos obtidos da bioconversão do d-limoneno. Os microrganismos foram isolados a partir do lodo ativado de uma estação de tratamento de esgotos. Uma pré-seleção, de 56 linhagens de bactérias foi realizada, durante as 3 etapas de enriquecimento com o d-limoneno, através da técnica de esgotamento em superfície. Foram selecionadas 10 linhagens, que apresentaram maior crescimento visual, que foram caracterizados através da morfologia, coloração diferencial (Gram) e análise filogenética. A biodegradação do d-limoneno foi avaliada pela remoção de DQO em meios de cultivos diferentes variando as concentrações de d-limoneno (1%, 3% e 5%) sob condição agitada e estática na temperatura de 30°C. A bioconversão dos produtos foi qualificada por cromatografia gasosa. Foram isoladas bactérias Gram-positivas, do gênero Bacillus resistentes à concentração de 5% de d-limoneno sem fonte complementar de carbono. A remoção de DQO foi de 77% e terpineol, alcoóis ciclodecanol e octanediol foram qualificados como produtos bioconvertidos
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TESE - r d
Número de chamada: T/UNICAMP St31c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2001.
Assunto: Leveduras (Fungos) - Engenharia genética
Resumo: Nos últimos anos, houve um aumento significativo de trabalhos que buscam entender a dinâmica de população de leveduras habitante das domas de...
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Resumo
Resumo: Nos últimos anos, houve um aumento significativo de trabalhos que buscam entender a dinâmica de população de leveduras habitante das domas de fermentação alcoólica. Os trabalhos gerados elucidaram questões importantes. Entre elas quais seriam as características básicas para que uma levedura permanecesse em um dado processo. Seguindo este contexto este trabalho teve como finalidade contribuir para o conhecimento das características das cepas de leveduras dominantes dos processos fermentativos industriais das destilarias brasileiras. Buscou-se neste trabalho, descrever os atributos de desempenho fermentativo e composição celular de 19 cepas isoladas de vários processos instalados em diferentes regiões do Brasil e com características particulares. Os atributos estudados foram: capacidade fermentativa; taxonomia numérica; tolerância ao etanol; teores de: trealose, proteínalaminoácido, e ácidos graxos. Com objetivo de comparação dos atributos estudados, avaliou-se uma cepa destinada a indústria de panificação assim como uma isolada de um processo de produção de álcool instalado em território Indiano. Os resultados mostraram que em relação às características fermentativas as cepas embora estejam colocadas em 17 grupos diferentes todas se apresentam como boas fermentativas. Em relação à taxonomia numérica foram classificadas 20 das 22 analisadas. Sendo 8 classificadas como Saccharomyces chevalieri, 5 como Saccharomyces coreanus e 7 como Saccharomyces cerevisiae. Se for considerado a classificação segundo BARNET (1992) todas elas são representantes de S. cerevisiae. Em relação à tolerância ao etanol existe uma faixa que varia entre 0,166 e 0,653 11M. A faixa da concentração de trealose na massa celular abrange concentrações que variam 0,47 a 6,3%. No que diz respeito a quantidade de proteína, essa mostra uma variação de 10% da cepa que apresenta uma maior quantidade para que apresenta a menor. As leveduras que apresentaram maior valor de produção específica de massa celular foram também as que apresentaram uma menor quantidade de material protéico. Em relação à distribuição de aminoácidos nesta proteína, os resultados mostram que todas se apresentam dentro do perfil esperando para linhagens de S. cerevisae. Todas cepas testadas apresentaram os ácidos graxos C-12:0 (ac.láurico), C-14:0 (ac.mirístico), C-16:0 (ac.palmítico) , C-16:1 (ác.palmitoleíco), C-18:0 (ac.esteárico) e C-18:1 (ac.oleíco) em sua composição. Alguma cepas apresentaram ainda o ácido graxo insaturado C14:1 (ac.miristoleíco). Os ácidos graxos insaturados (C-16:1 e C-18:1) são os de maior abundância no material graxo que compõe as cepas testadas, que segundo alguns autores estão vinculados com a tolerância das cepas ao etanol. Alguns indícios de relação entre o teor de ácidos graxos C-16:1 e C-18:1 e a tolerância ao etanol pode ser observado, mas uma correlação exata não pôde ser determinada. A partir da compilação dos dados obtidos neste trabalho é possível afirmar que as cepas isoladas dos diversos processos fermentativos apresentaram variações comportamentais e de composição celular. Entretanto quando se avalia o parâmetro de capacidade fermentativa, todas as cepas são classificadas como adequadas para o processo de fermentação alcoólica. Isto confirma a hipótese que, embora as leveduras apresentem características fermentativas semelhantes, pois do contrário não poderiam estar presentes em um ambiente hostil, como é o das domas de fermentação, cada processo seleciona sua própria linhagem, e que a mesma é provavelmente habitante natural da matéria-prima que a unidade processa
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Guimarães, Carla Aiolfi, 1981-
TESE - Multilíngua
Número de chamada: T/UNICAMP G947c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2013.
Assunto: Agentes antineoplásicos
Resumo: O carcinoma adrenocortical (CAC) é uma neoplasia rara e maligna que surge no córtex das glândulas adrenais. A terapia mais utilizada é o...
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Resumo
Resumo: O carcinoma adrenocortical (CAC) é uma neoplasia rara e maligna que surge no córtex das glândulas adrenais. A terapia mais utilizada é o tratamento com mitotano, um derivado do inseticida, que possui uma baixa solubilidade aquosa e permeabilidade intestinal. O mitotano é administrado como uma mistura racêmica composto de dois enantiômeros: R-(+) - o,p'-DDD e S-(-) - o,p'-DDD. Os carreadores lipídicos nanoestruturados (NLCs) são utilizados como suporte para a encapsulação de agentes ativos lipofílicos como é o caso do mitotano, ajudando a aumentar sua solubilidade. O objetivo deste trabalho foi caracterizar os enantiômeros e preparar NLCs encapsulando a forma enantiomérica (S) - (-) - o,p'-DDD, pela técnica de homogeneização de alta pressão a quente, caracterizar a formulação, estudar sua estabilidade, avaliar a permeação intestinal ex vivo pelo modelo do saco intestinal invertido e a retenção do enatiômero (S) - (-)- o,p'-DDD nas NLCs expostas em diferentes valores de pH in vitro. Foi utilizado NLCs contendo mitotano racêmico como controle. NLCs encapsulando (S) - (-) - o,p'-DDD tiveram diâmetro médio 95,36 nm, polidispersidade 0,288 e potencial zeta baixo -20,9 mV com uma eficiência de encapsulação alta. Os resultados de absorção intestinal ex vivo indicaram que a absorção das NLCs encapsulando o (S) - (-) - o, p'-DDD foi maior em comparação com o (S) - (-) - o, p'-DDD na forma livre e com a NLCs encapsulando o mitotano racêmico. No entanto, o teste com pH mostrou que cerca de 70% do (S) - (-) - o, p'-DDD encapsulado ficou retido nas NLCs durante 3h. Estes resultados indicaram que a formulação de NLCs produzida foi eficiente como carreador da forma S(-)-o,p'-DDD, podendo ser explorada como uma possível formulação alternativa para o tratamento do CAC
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Freitas, Alessandra Ferraiolo de
TESE - Português
Número de chamada: T/UNICAMP P884c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2009.
Assunto: Quiralidade
Resumo: O objetivo deste trabalho foi a síntese, em larga escala, da fase estacionária quiral tris(3,5-dimetilfenilcarbamato) de amilose e posterior...
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Resumo
Resumo: O objetivo deste trabalho foi a síntese, em larga escala, da fase estacionária quiral tris(3,5-dimetilfenilcarbamato) de amilose e posterior investigação desta na separação preparativa dos enantiômeros do omeprazol por cromatografia líquida de alta eficiência. O carbamato de amilose, caracterizado por análise elementar e espectroscopia na região do infravermelho, apresentou valores experimentais de CHN próximos aos valores teóricos e absorções no infravermelho próximas a 1720 cm-1, referente ao grupo C=O, a 1220 cm-1, referente à ligação C-N e em 3294 cm-1, referente à ligação N-H. Experimentos de pulsos com soluções do traçador e da mistura racêmica, em diferentes temperaturas e vazões da fase móvel, foram realizados para avaliar a homogeneidade das colunas e sua influência no processo de separação, os coeficientes de dispersão axial e de tranferência de massa e o comportamento termodinâmico da adsorção. Uma análise estatística dos dados de porosidade foi realizada através dos testes t e F mostrando que, com um nível de confiança de 95%, apenas algumas colunas apresentam porosidades equivalentes embora os erros cometidos na determinação da porosidade total e no processo de empacotamento sejam os mesmos. A recuperação do enantiômero de interesse, S-(-)-omeprazol, variou de 10-100% quando a porosidade total sofreu variações da ordem de 3%. Os gráficos de van Deemter mostraram uma relação linear entre a altura equivalente a um prato e a velocidade superficial da fase móvel. O enantiômero S-(-)- apresentou maiores coeficientes de transferência de massa e o enantiômero R-(+)- maiores constantes de Henry. O fator de separação e a resolução apresentaram valores iguais a 1,30 e 1,96, respectivamente, a 40 °C e 1,0 mL/min. Observou-se um decréscimo nos valores desses parâmetros após um determinado tempo de uso da coluna. Os valores negativos de 0 S D e 0 H D indicam um aumento na ordem do sistema cromatográfico e que a adsorção dos enantiômeros da fase móvel na fase estacionária é entalpicamente favorável. O modelo de isoterma de Langmuir foi bem correlacionado aos dados experimentais de equilíbrio no intervalo de concentração analisado. Palavras-chave: fase estacionária quiral, omeprazol, cromatografia líquida de alta eficiência
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DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP T729c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2010.
Assunto: Lipossomos
Resumo: Este trabalho apresenta um estudo comparativo de processos escalonáveis dos tipos "top-down" (cominuição) e "bottom-up" (síntese), visando a...
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Resumo
Resumo: Este trabalho apresenta um estudo comparativo de processos escalonáveis dos tipos "top-down" (cominuição) e "bottom-up" (síntese), visando a produção de lipossomas funcionais para a vacinação gênica contra a tuberculose. Na abordagem "top-down" os lipossomas foram produzidos através da alimentação de uma dispersão de fosfolipídios em água e simultânea cominuição através de cisalhamento produzido por agitadores mecânicos dos tipos Caules (C) e Ultra-turrax® (U-T). Os lipossomas provenientes do U-T foram posteriormente submetidos a maiores níveis de cisalhamento, pela passagem através de microcanais tortuosos a pressões da ordem de 100 atm, em microfluidizador (M). A influência das variáveis operacionais sobre o diâmetro, polidispersidade e potencial zeta foi analisada através de planejamento estatístico fatorial e superfícies de resposta. Para C e U-T, os efeitos do cisalhamento prevaleceram em relação à vazão de alimentação. Para M, a pressão exerceu maior influência que o número de passagens. A taxa de cisalhamento aplicada variou na faixa de 102 a 7.106 s-1, produzindo diâmetros médios de 957 a 90 nm, polidispersidades de 0,60 a 0,25 e potenciais zeta de -60 a -44 mV. O diâmetro médio dos lipossomas variou com o inverso da raiz quadrada da taxa de cisalhamento. No processo "bottom-up" os lipossomas foram produzidos continuamente na interface etanol/fosfolipídio e água, formada por focalização hidrodinâmica em microcanal reto de 0,14 mm de largura. A velocidade de formação dos lipossomas variou com a razão água/etanol, concentração e composição lipídica. As propriedades físico-químicas originais dos lipossomas funcionais foram aproximadamente reproduzidas em ambos os processos escalonáveis. Comparativamente, o processo "top-down" é mais robusto, de fácil operação, permite utilizar altas concentrações lipídicas (400 mM), com obtenção de maior produtividade. Porém é descontínuo e requer maior consumo energético. O processo "bottom-up" é menos robusto, opera de forma estável a mais baixas concentrações lipídicas (100 mM), porém a produção é contínua e com menor consumo energético
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TESE - r d
Número de chamada: T/UNICAMP T639c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2008.
Assunto: Fermentação alcoólica
Resumo: O objetivo geral deste trabalho foi avaliar os efeitos de algumas substancias organicas presentes no melaco de cana-de-acucar sobre cepas de...
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Resumo
Resumo: O objetivo geral deste trabalho foi avaliar os efeitos de algumas substancias organicas presentes no melaco de cana-de-acucar sobre cepas de leveduras de uso industrial. O Capitulo I refere-se a uma breve introducao e historico da fermentacao alcoolica. No Capitulo II, foi analisado amostras de melacos industriais, provenientes de 10 unidades produtoras de acucar e alcool, localizadas nos estados de Sao Paulo, Minas Gerais, Goias e Parana, com a finalidade de determinar e quantificar alguns compostos organicos presentes no mesmo. Para tanto foi utilizada a tecnica de Cromatografia Liquida de Alta Eficiencia (CLAE). No Capitulo III foram realizados ensaios para escolher as cepas de melhor desempenho em condicoes de estresse, utilizando-se o planejamento fatorial 23 tipo estrela com triplicata no ponto central. Os fatores estudados foram: a pressao osmotica (utilizando KCl), temperatura e concentracao inicial de Alcool. As cepas Y904 e SA1 foram as que mais se destacaram. No Capitulo IV foram avaliados os efeitos dos compostos organicos (acidos cafeico, galico, latico, piruvico, siringico, vanilico, acetico, formico, butirico e Hidroximetilfurfural) sobre as cepas SA1 e Y904, atraves de fermentacoes em triplicata, utilizando meio sintetico controle e variando as concentracoes de cada composto. Dentro das concentracoes estudadas, apenas os acidos galico, latico, acetico, formico, butirico e Hidroximetilfurfural demonstraram influencia sobre as cepas. A avaliacao do efeito acumulativo das substancias quando se trabalha com reciclo de celulas esta descrita no Capitulo V. Todos os experimentos foram realizados em triplicata e repetidos por oito vezes consecutivas (8 ciclos). O acido latico foi a substancia que mais interferiu no rendimento em etanol (YP/S) e na produtividade, parametros estes de maior importancia nos processos industriais para producao de alcool. Por outro lado, o acido formico apresentou a menor interferencia e efeito negativo para praticamente todos os parametros estudados. Finalmente no Capitulo VI, foram analisados os efeitos dos acidos latico e formico sobre o comportamento cinetico das cepas SA1 e Y904. Os testes foram realizados em biorreator de bancada, por dez horas de fermentacao. O acido latico aumentou tanto a inibicao pelo substrato como pelo produto, mostrando-se ser uma substancia com alto grau de toxicidade para as celulas de leveduras das linhagens estudadas. " RANAXTAU/EJAXGU" / fermentacao alcoolica, cinetica, substratos industriais, compostos organicos, inibicao, levedura
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DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP H383c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2011.
Assunto: Simulação (Computadores)
Resumo: Este trabalho teve como objetivo desenvolver um programa computacional capaz de auxiliar o estudo da cinética de fermentação em reator de...
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Resumo
Resumo: Este trabalho teve como objetivo desenvolver um programa computacional capaz de auxiliar o estudo da cinética de fermentação em reator de batelada alimentada ou simples. O resultado foi o programa nomeado FERMENTA, o qual simula fermentação considerando tanto um único substrato, os açúcares redutores totais (ART), como dois substratos, a glicose e a frutose. A descrição cinética resulta de um procedimento computacional de simulação que utiliza equações modelo para a estimativa da velocidade específica de crescimento da levedura ( ? ), resolvendo numericamente, por Runge-Kutta de quarta ordem, as equações diferenciais dos balanços de massa para os componentes no reator. Os dados inseridos são os parâmetros de operação do reator e os valores dos parâmetros cinéticos da equação escolhida. A resposta é apresentada como gráfico das curvas cinéticas da concentração dos componentes, informando qualquer valor em qualquer instante. Se há dados experimentais, também são calculados os desvios entre estes e os valores simulados. Uma estratégia de regressão a partir da simulação utiliza uma matriz do tipo empregado em desenho fatorial completo e permite o ajuste dos parâmetros da equação para ? ao conjunto de dados experimentais, sem o conhecimento prévio dos valores dos parâmetros cinéticos nesta equação. A resposta, ou "melhor ajuste", é o conjunto dos valores destes parâmetros que minimiza os desvios. O programa disponibiliza 28 diferentes equações para ? , todas coletadas na literatura. Quando simula ou ajusta considerando dois substratos, resolve para ? = ?G + ?F ,ou seja, estratifica a modelagem do metabolismo para cada substrato e, deste modo, tem-se 282 =784 modelos diferentes que podem ser testados. A linguagem de programação empregada foi o Object Pascal e a construção do programa utilizou o software compilador Borland® Delphi 7, o que permitiu obter-se um aplicativo de fácil utilização, orientado por eventos simples e em ambiente Windows
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Cristalização de insulina suina com dioxido de carbono como agente acidificante
Hirata, Gisele Atsuko Medeiros, 1984-
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP H613c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2009.
Assunto: Cristalização
Resumo: A cristalização é uma técnica de separação e purificação largamente utilizada na produção de produtos químicos, farmacêuticos e alimentícios....
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Resumo
Resumo: A cristalização é uma técnica de separação e purificação largamente utilizada na produção de produtos químicos, farmacêuticos e alimentícios. A maioria dos produtos sólidos é obtida por processos de cristalização/precipitação que provavelmente é a segunda mais importante tecnologia de separação em termos de capacidade, perdendo apenas para processos de destilação. Estudos sobre o uso de eletrólitos voláteis como o CO2, empregados na precipitação de proteínas, mostram que esses agentes são alternativas promissoras ao uso de ácidos convencionais, pois sua dissolução em solução aquosa gera íons com concentrações fortemente dependentes da temperatura ou pressão, o que facilita sua remoção do sistema. No entanto, não se tem relatos do uso de eletrólitos voláteis na cristalização de proteínas. Assim, o presente trabalho teve como objetivo estudar a viabilidade de cristalizar uma proteína (insulina suína) utilizando eletrólito volátil (CO2) como agente de cristalização (agente acidificante). Ensaios de cristalização exploratórios foram realizados para adequar as condições de cristalização e metodologias àquelas usadas na cristalização convencional de insulina. Cristais de formato romboédrico, comum para os cristais de insulina suína que contém zinco em sua estrutura, foram obtidos já nos primeiros ensaios após se ajustar as condições de pH, concentração inicial de insulina e concentração de zinco. Em seguida, a curva de solubilidade de insulina suína no sistema NaHCO3/ZnCl2/CO2 a 15°C foi determinada como função do pH para a faixa de 6,0 a 8,0. Nos ensaios de dissolução e cristalização pode-se observar, através de análises de DSC, que a insulina apresenta duas diferentes estruturas. A partir desses ensaios, foi possível estimar a cinética de dissolução, a cinética de crescimento e a taxa de nucleação dos cristais de insulina como função da supersaturação.
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TESE - r d
Número de chamada: T/UNICAMP V585c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2005.
Assunto: Cromatografia contracorrente
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Cromatografia IMAC : estudos de adsorção de glucagon e insulina em silica-IDA-Me2+
DISSERTAÇÃO - r d
Número de chamada: T/UNICAMP F226c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2001.
Assunto: Insulina
Resumo: Glucagon é um hormônio que aumenta o nível de glicose sanguínea e sua principal aplicação como produto farmacêutico é no tratamento de...
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Resumo
Resumo: Glucagon é um hormônio que aumenta o nível de glicose sanguínea e sua principal aplicação como produto farmacêutico é no tratamento de hipoglicemia, especialmente associada ao diabetes. Além dessa importante aplicação e sendo o glucagon um produto de custo bastante elevado, existe a necessidade de se aprimorar seu processo- de purificação. O objetivo deste trabalho foi realizar estudos de adsorção de glucagon e insulina em silica-IDA- Me2+, através da técnica de cromatografia de afinidade por íons metálicos (IMAC), visando desenvolver um processo de purificação de glucagon a partir de fração de processamento industrial de insulina de pâncreas. Na primeira etapa, realizou-se experimentos em tanques agitados para determinar a cinética, capacidade de adsorção e influência do pH, força iônica e agente competidor na eluição do glucagon adsorvido em matriz silica-IDA-Cu2. A segunda etapa consistiu em experimentos em colunas de cromatografia líquida com leito fixo, com o glucagon, a insulina e a mistura deles, utilizando os metais Cu2+, Ni2+ e Zn2+. A condição que se mostrou mais promissora na separação da insulina do glucagon foi utilizando o metal níquel e eluição com gradiente degrau de pH. Esta condição foi avaliada na purificação de glucagon presente em duas frações do processamento industrial de insulina, a primeira rica em glucagon e uma segunda rica em insulina. O resultados mostraram um enriquecimento de glucagon em ambas as frações, sendo que um fator de purificação de glucagon de cinco foi obtido para a fração rica em insulina
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Bresolin, Iara Rocha Antunes Pereira
DISSERTAÇÃO - Português
Número de chamada: T/UNICAMP B754c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2009.
Assunto: Soja
Resumo: Nos últimos tempos têm-se estudado plantas como biorreatores para a produção de proteínas recombinantes de interesse industrial e...
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Resumo
Resumo: Nos últimos tempos têm-se estudado plantas como biorreatores para a produção de proteínas recombinantes de interesse industrial e farmacêutico. Quando comparadas a outros sistemas de expressão, as plantas apresentam algumas vantagens, como a realização de modificações pós traducionais, baixo custo de produção, baixos riscos de contaminação por patógenos humanos, possibilidade das proteínas serem acumuladas em órgãos específicos que podem gerar maior estabilidade das mesmas. Visando a obtenção de conhecimento de base para posterior aplicação na purificação de proteínas recombinantes produzidas em plantas transgênicas, realizaram-se estudos de purificação por cromatografia negativa em Sepharose-TREN de proteínas contendo ampla faixa de pI (IgG humana), pI ácidos (HSA e BSA) e pI alcalinos (aprotinina e lisozima), adicionadas artificialmente ("spiking") a extrato de soja. Na cromatografia negativa, a proteína alvo é recuperada na fração não retida, enquanto as proteínas do extrato de soja permanecem adsorvidas na matriz. Visando maximizar a adsorção de proteínas do extrato de soja, avaliaram-se diferentes sistemas tamponantes, sendo que 2,8% das proteínas alimentadas foram detectadas na etapa de lavagem, quando se utilizou MES 25 mmol/L pH 6,5. Adicionandose IgG humana na forma de "spiking" ao extrato de soja na concentração de 1,0 mg/mL, recuperou-se 38% na lavagem com pureza de 86% e fator de purificação de 4,6. Por meio de experimentos de curva de ruptura, determinou-se a capacidade dinâmica de Sepharose- TREN como sendo 25,4 mg/mL de gel a uma vazão de 0,5 mL/min. Para proteínas de valores de pI ácidos, houve adsorção total das proteínas alimentadas enquanto que proteínas de pI alcalinos foram parcialmente adsorvidas, indicando que as interações que predominam entre o adsorvente Sepharose-TREN e proteínas são de natureza eletrostática. Para efeitos de comparação foram realizados experimentos de IMAC com íons Ni(II) e Cu(II) imobilizados em Sepharose-TREN alimentando-se extrato de soja com "spiking" de IgG humana. Resultados mostraram que a IgG apresentou pureza similar, porém com menor recuperação que em cromatografia negativa em Sepharose-TREN. Experimentos em Sepharose-DEAE foram realizados alimentando-se extrato de soja com "spiking" de IgG humana, possibilitando a adsorção de proteínas do extrato de soja e a purificação de IgG, porém com menor recuperação de IgG na lavagem quando comparado a Sepharose-TREN
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Número de chamada: T/UNICAMP G132c
Publicação: Campinas, SP : [s.n.], 2007.
Assunto: Drosophila melanogaster
Resumo: Células de inseto têm sido freqüentemente empregadas na obtenção de proteínas recombinantes devido a algumas vantagens em relação às células...
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Resumo
Resumo: Células de inseto têm sido freqüentemente empregadas na obtenção de proteínas recombinantes devido a algumas vantagens em relação às células de mamíferos, e a linhagem Drosophila melanogaster Schneider 2 é um dos sistemas de expressão utilizados para este propósito. Entretanto, a literatura é escassa em relação ao metabolismo e ao cultivo destas células, o que motivou o desenvolvimento deste trabalho. O objetivo deste estudo foi determinar, através da técnica estatística de planejamento fatorial de experimentos, um meio de cultura adequado ao crescimento da linhagem Drosophila melanogaster Schneider 2 transfectada para expressão da glicoproteína do vírus da raiva (GPV) e avaliar seu comportamento nos diferentes meios formulados. Para tal, no meio basal TC100, foram estudados os efeitos dos suplementos glicose, glutamina, concentrado protéico de soro de leite, yeastolate (extrato de levedura), hidrolisado de soja, lactoalbumina hidrolisada, emulsão lipídica e Pluronic F68 sobre o crescimento e a viabilidade celular, na tentativa de reduzir o percentual de soro fetal bovino do meio de cultura. A combinação de diferentes suplementos permitiu que o soro fetal bovino fosse eliminado do meio de cultura, principalmente em decorrência da adição de yeastolate, e, em várias das formulações desenvolvidas, a densidade de células foi bastante superior àquela obtida empregando o meio basal TC100 suplementado com 10% de soro fetal bovino. O meio de cultura que resultou no melhor desempenho celular foi formulado com o meio TC100 suplementado com 10 g/L de glicose e 3,5 g/L de glutamina (concentrações finais), 3 g/L de yeastolate, 1% (v/v) de emulsão lipídica e 0,1 % (m/v) de Pluronic F68. Inicialmente, os ensaios realizados em biorreator não reproduziram o crescimento celular obtido em menor escala. Porém, com o aumento da concentração de Pluronic F68 para 0,6%, tal limitação foi contornada. Glicose não foi o substrato limitante nos meios formulados e lactato foi produzido em pequenas quantidades. Apesar de produzido em elevadas concentrações, o amônio não influenciou o crescimento celular. A dosagem da glicoproteína mostrou que as células não perderam sua capacidade de expressão após a adaptação em diferentes meios de cultura e que a produção de GPV no meio formulado é superior à verificada com os meios comerciais SF900 II e TC100 suplementado com 10% de soro fetal bovino
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