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Resumo: O esmalte dental é caracterizado por camadas de prismas em direções alternadas regularmente. Estas camadas sucessivas formam as Bandas de Hunter-Schreger (HSB) que aparecem como faixas claras e escuras quando vistas sob forte iluminação lateral. Neste presente trabalho avaliamos a singularidade das HSB em dentes humanos como um método biométrico para identificação pessoal, já que as diferenças no padrão das HSB em dentes ainda não foi estudada. A amostra foi composta de 274 incisivos inferiores. Os procedimentos seguintes foram executados: os dentes foram fotografados em uma lupa esteroscópica e fibra óptica acopladas. O contraste das imagens após digitalização, foi aumentado utilizando Corel Photo Paint 9® e então as mesmas imagens foram analisadas em software de identificação automatizado de base biométrica (Verifinger 4.2 SDK / Fingersec®). O software gerou uma lista de comparações de dados biométricos com uma medida de semelhança (comparações entre ¿minutias¿). As medidas de similaridade do banco de dados foram comparadas em uma matriz de semelhança. Analisamos também a variação das espessuras médias das Bandas desde que este parâmetro é muito variável e pode ser usado para confirmar a identificação. Os resultados demonstraram que o padrão de HSB é altamente variável e único para cada dente analisado. HSB não puderam ser observadas em 4,5% dos dentes examinados. Dentes sem HSB não foram incluídos no banco de dados. Dentes com 0 ou 1 minutias totalizaram 3,3% da amostra. Nestes casos, a distinção pode ser feita através de comparação visual simples. Assim, as medidas biométricas das HSB provaram ser um método com alta potencialidade para identificação pessoal, desde que o tecido do esmalte resiste condições ambientais extremas e as imagens são obtidas facilmente. Estas características fazem das HSB um modelo potencialmente útil para análise forense utilizando medidas físicas ou biológicas pessoais, dando uma descrição correta do indivíduo

Resumo: A doença periodontal (DP) é causada por interações entre fatores do hospedeiro, microrganismos específicos patogênicos e o sistema imunológico. TNF-b é um imunoregulador multifuncional que está relacionado com a patogênese de diversas desordens imunológicas, incluindo a DP. Nosso estudo analisou a associação entre DP e polimorfismo no gene TNF-b (+252 A/G). O DNA foi extraído de células da mucosa oral de 126 indivíduos brancos: 44 indivíduos controle e 82 indivíduos com DP. O polimorfismo foi analisado pela técnica de PCR, seguida pela RFLP. Os dados foram estatisticamente analisados pelo teste Exato Fisher (p<0,05) e Odds Ratio (OR). A freqüência do polimorfismo mostrou diferença estatisticamente significativa entre os grupos controle e com DP, revelando que indivíduos portadores do alelo G apresentavam 2,6 vezes mais chances de desenvolver a DP do que indivíduos saudáveis (G vs. A, p=0.0019, OR= 2.67, 95% CI 1.45 - 4.78), em relação aos genótipos a presença de pelo menos um alelo G predispõe 3,1 vezes à DP (G/G+ G/A vs. A/A, p=0,0059, OR= 3.1, 95% CI 1.45 - 6.65). Conclui-se que o TNF-b está envolvido na patogênese da periodontite crônica e pode ser utilizado como um marcador de risco para a DP na população estudada

Resumo: Estudos prévios, relatam que a exposição materna ao álcool reduz o desenvolvimento maxilo-facial, incluindo retardo na formação e na erupção do germe dental, assim como anomalias do esmalte. Os mecanismos destas ações deletérias não estão totalmente esclarecidos. O objetivo deste estudo foi avaliar usando anticorpo policlonal do Fator Epidermal de Crescimento (EGF), a imunoexpressão do EGF durante a amelogênese do 1 ° molar inferior de filhotes de ratas que ingeriram álcool em concentrações teratogênicas antes e durante a gestação. Dezoito ratas receberam uma solução de água e etanol (grupo tratado) em concentrações crescentes de 1 %,5%,10%,15%,20% e 25%: (v/v) alteradas semanalmente. Na 7a semana, estas ratas foram postas para acasalar durante uma noite e continuaram a receber a solução de 25% de álcool até ao final da gestação. Destas, somente 10 ficaram prenhas e 7 chegaram a termo. Dez ratas (grupo controle) receberam somente água durante o mesmo período, foram postas para acasalamento por uma noite e somente 6 ficaram prenhas. Nos dias O, 4° e 9° pós-natal foram sacrificados 2 filhotes de cada ninhada para a remoção das hemi-mandíbulas, as quais foram processadas e incluídas em paraplast e contracoradas em hematoxilina de Mayer. No O dia pós-natal, no grupo controle foi encontrada marcação forte para o EGF, no epitélio interno do órgão do esmalte e nos pré-ameloblastos, porém, no grupo tratado, a marcação nestas mesmas estruturas foi fraca. No 4° dia pós-natal, a marcação forte foi encontrada nos ameloblastos secretores e odontoblastos do grupo controle, enquanto que no grupo tratado, a marcação foi moderada. No 9° dia pós-natal, no grupo controle foi observada marcação de intensidade forte nos ameloblastos em maturação, sendo que no grupo tratado, a marcação foi fraca. Esses resultados sugerem que a ingestão de álcool durante a gestação, interferiu com a expressão do EGF durante os estágios iniciais da amelogênese e na secreção e maturação do esmalte

Resumo: Células bucais são fontes convenientes de DNA para diagnóstico e estudos epidemiológicos. O presente estudo teve como objetivo desenvolver um método simples e prático para obter células epiteliais, através de bochechos, a fim de serem usadas como fonte de DNA, avaliar a estabilidade do DNA na solução de bochecho no decorrer do tempo e analisar a eficácia deste método na amplificação por PCR de fragmentos de diferentes comprimentos. Os procedimentos usados neste estudo evitam o uso de solventes orgânicos permitindo uma prática laboratorial mais segura. Isto é alcançado pela remoção das proteínas celulares por desidratação e precipitação com uma solução de acetato de amônio 8 M. Bochechos com 5 mL de dextrose 3% foram coletados de 65 indivíduos. Adicionados a cada amostra 3 mL de solução TNE [17 mM Tris-HCL (pH 8,0), 50 mM NaCl, 7 mM EDTA] diluído em etanol 66%. O conteúdo das amostras de bochechos de 20 indivíduos foi dividido em 4 tubos. Um tubo foi usado para extração imediata (igualmente às demais 45 amostras) e os três tubos restantes foram mantidos em temperatura ambiente por períodos de 2, 15 e 30 dias, seguidos pela extração do DNA. As células bucais foram centrifugadas e ressuspendidas em solução contendo 10 mM Tris (pH 8.0), 0.5% SDS, 5 mM EDTA e proteinase K (20 mg/mL). Após incubação a 55ºC durante toda a noite as proteínas foram removidas pela adição de acetato de amônio 8 M seguida por centrifugação. O DNA foi precipitado com isopropanol e ressuspendido em 10 mM Tris (pH 7.8) e 1 mM EDTA. Foram realizadas reações de PCR com primers específicos para fragmentos dos seguintes genes: PAX9 (202 pb); KLK (555 pb); MMP20 (1434 pb). Nossas análises fornecem evidências consistentes de que o produto de DNA extraído por esta metodologia é suficiente para diversas amplificações por PCR. Fragmentos grandes de DNA (1434 pb) puderam ser obtidos com sucesso. Além disso, com a adição de TNE/Etanol o DNA é eficientemente preservado na solução de bochecho, a qual pode ser estocada em temperatura ambiente por até trinta dias, o que possibilita a coleta em campo e contribui para o aumento da amostragem. Este protocolo permite a extração de maneira rápida, simples, econômica e garante o processamento de várias amostras ao mesmo tempo

Resumo: O órgão do esmalte de incisivos de ratos no estágio de maturação da amelogênese (região em que os prismas de esmalte são visíveis e o esmalte é completamente solúvel em ácido) foi removido, e os limites desta remoção (região cirúrgica) foram demarcados por marcas feitas na face labial do esmalte. O órgão do esmalte, da região acima da marca incisal até a crista alveolar, foi danificado utilizando-se uma lima endodôntica e foi feita a ressecção do órgão odontogênico na extremidade basal do incisivo. Os ratos foram divididos em dois grupos: I ¿ quando a marca incisal e II ¿ quando a marca basal apareceu na coroa clínica. Os incisivos experimentais erupcionaram em uma taxa variável e mais lenta que os dentes contralaterais controles. O aspecto histológico do esmalte na região cirúrgica dos ratos do grupo I variou de um esmalte completamente removido pelo descalcificador a resquícios de esmalte com prismas visíveis. Nessa mesma região no grupo II, todo o esmalte estava completamente solúvel em ácido. A microdureza do esmalte na região cirúrgica foi menor nos incisivos experimentais, enquanto o conteúdo mineral (Ca e P) não apresentou diferença em relação ao dente controle. A análise protéica do esmalte dos incisivos, uma semana após a cirurgia, revelou uma quantidade e um padrão de eletroforese similar entre os dentes controle e experimental na região cirúrgica. Na região pós-cirúrgica, o conteúdo protéico do esmalte do dente experimental foi muito menor e mostrou proteínas de baixo peso molecular em relação à região correspondente nos incisivos controles. Os resultados são consistentes com a hipótese de que o ameloblasto no estágio da maturação não interfere no influxo de minerais no esmalte