Resumo: Streptococcus mutans é uma espécie bacteriana comum da microbiota bucal de seres humanos envolvida na patogênese da cárie dentária e em endocardites infecciosas promovidas por bacteremias de origem bucal. Para ser transmitido e ocupar seus nichos ecológicos, S. mutans precisa persistir na saliva e se adaptar fisiologicamente a cada fase da colonização, um processo que provavelmente envolve diversas alterações do seu transcriptoma. Para isto, S. mutans utiliza sistemas reguladores de transcrição de dois componentes (SDC). O SDC SptRS foi identificado através de análises in silico do genoma da cepa S. mutans UA159, como ortólogo do sistema SptSR (Spt de Saliva persistence) de Streptococcus pyogenes. O objetivo deste trabalho foi investigar a participação do sistema SptRS de S. mutans em fenótipos importantes para a colonização bucal. Para isto, mutantes knockout dos genes sptR e sptS, SMU.927 e SMU.928 respectivamente, foram construídos a partir da cepa UA159 (UAsptR- e UAsptS-) e comparados com a cepa parental em análises de morfologia, crescimento planctônico sob diferentes condições nutricionais, persistência em saliva humana, formação de biofilme e autólise a 44oC. Além disto, genes do regulon de SptRS foram pesquisados através de ensaios da Imunoprecipitacão de Cromatina seguido de sequenciamento (ChIP-seq), RT-PCR quantitativo (RT-PCRq) e de Ensaios de Retardamento da Mobilidade Eletroforética (EMSA) com proteína recombinante SptRr de S. mutans. Os mutantes sptR e sptS mostraram crescimento planctônico lento em meios de cultura RPMI e em MQD comparados à cepa parental, além de atividade autolítica reduzida em 22,4 e 53,13%, respectivamente. Não foram observadas, entretanto, alterações significativas na morfogênese, formação de biofilmes in vitro, nem na persistência em saliva humana. Os dados de ChIP-seq e RT-qPCR indicaram que SptRS regula genes envolvidos na resposta de estringência (SMU.926), repressão catabólica (ccpA), metabolismo de múltiplos açúcares (SMU.78, SMU.137, SMU.542, SMU.1734), sistemas fosfoenolpiruvato-fosfotransferase (PTS) (SMU.2047, SMU.114, SMU.115) sistemas de transporte do tipo ABC (SMU.182, SMU.880, SMU.905, SMU.1035, SMU.1095, SMU.1178c, SMU.1939) e biogênese de parede celular (SMU.1091, SMU.2147, SMU.609, SMU.1434c, SMU.22). SptR funcionou como um regulador negativo em 86% (37/43) dos genes testados. Análises de RT-qPCR e EMSA indicaram ainda que SptR regula diretamente o regulador de transcrição CovR (SMU.1924), envolvido na repressão de genes de virulência e formação de biofilmes. Este estudo fornece evidências de que SptRS regula diversas funções de S. mutans importantes para a sobrevivência em condições nutricionalmente escassos, aparentemente coordenando o metabolismo com o crescimento bacteriano e com a expressão de genes de virulência