Resumo: A Doença de Ménière (DM) é uma condição crônica rara do ouvido interno caracterizada pela tríade clássica de vertigem episódica, perda auditiva flutuante e zumbido, frequentemente acompanhada por plenitude auricular. A etiologia da doença permanece incerta, com evidências apontando para uma complexa interação entre predisposição genética e fatores ambientais. A prevalência da doença varia significativamente entre diferentes populações, e há uma escassez de dados epidemiológicos em coortes brasileiras. As doenças autoimunes têm fortes evidências epidemiológicas que sustentam sua associação com a DM. Foi encontrada uma variante reguladora intergênica (rs4947296) que sugere uma resposta inflamatória mediada por NF-?B. Diante do exposto, o presente estudo objetivou investigar as bases moleculares da DM, com o propósito de elucidar o perfil genético de pacientes brasileiros e, eventualmente, desenvolver biomarcadores confiáveis que aprimorem o diagnóstico e permitam abordagens terapêuticas personalizadas. Para tanto, foi adotada uma estratégia genômica integrativa. Na coorte de 26 pacientes diagnosticados com DM provenientes da Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), primeiramente foi rastreada a variante intergênica rs4947296 por meio do sequenciamento de Sanger em 26 pacientes. Em seguida, foi realizado o sequenciamento do exoma completo (WES) em 22 destes pacientes. Para as variantes de interesse identificadas, foram modeladas as estruturas 3D de proteínas-alvo para prever impactos funcionais. A partir da análise do rs4947296, foi possível identificar que a frequência alélica do alelo C foi de 32% na amostra total, valor significativamente maior que o observado na população europeia não-finlandesa (7,9%). Além disso, foi observado que, nos casos com sintomas bilaterais, a frequência alélica atingiu 28%, e, nos pacientes com comorbidades autoimunes, alcançou 33%. Os resultados das análises dos dados do WES demonstraram a presença de um espectro de variantes em genes expressos no ouvido interno e no sistema imune, incluindo OTOG, PCDH15, USH1G, ADGRV1, ESRRB, CDH23, AQP6, KCNH2, TNFRSF13B, SDHA, HRH4, ADD1, SLC25A35 e HMX2. A análise estrutural das proteínas modeladas demonstrou que variantes específicas podem alterar a conformação de domínios proteicos essenciais, o que pode comprometer sua função. A combinação desses achados com a associação da rs4947296 com bilateralidade e seu possível papel como regulador de vias TWEAK/Fn14/NF-?B posiciona esta variante e os novos genes identificados como alvos promissores para diagnóstico molecular e terapias personalizadas. No entanto, são necessários estudos funcionais e validação em coortes maiores, particularmente na população brasileira, ainda sub-representada nessas análises Ver menos

Abstract: Ménière's disease (MD) is a rare chronic condition of the inner ear characterised by the classic triad of episodic vertigo, fluctuating hearing loss, and tinnitus, often accompanied by ear fullness. The aetiology of the disease remains unclear, with evidence pointing to a complex interaction between genetic predisposition and environmental factors. The prevalence of the disease varies significantly among different populations, and there is a scarcity of epidemiological data in Brazilian cohorts. Autoimmune diseases have strong epidemiological evidence supporting their association with MD. An intergenic regulatory variant (rs4947296) was found that suggests an NF-?B-mediated inflammatory response. Given the above, the present study aimed to investigate the molecular basis of DM, with the purpose of elucidating the genetic profile of Brazilian patients and, eventually, developing reliable biomarkers that improve diagnosis and allow personalised therapeutic approaches. To this end, an integrative genomic strategy was adopted. In the cohort of 26 patients diagnosed with DM from the Federal University of São Paulo (UNIFESP), the intergenic variant rs4947296 was first screened using Sanger sequencing in 26 patients. Next, whole exome sequencing (WES) was performed in 22 of these patients. For the variants of interest identified, 3D structures of target proteins were modelled to predict functional impacts. From the analysis of rs4947296, it was possible to identify that the allele frequency of allele C was 32% in the total sample, a value significantly higher than that observed in the non-Finnish European population (7.9%). In addition, it was observed that in cases with bilateral symptoms, the allele frequency reached 28%, and in patients with autoimmune comorbidities, it reached 33%. The results of the WES data analyses demonstrated the presence of a spectrum of variants in genes expressed in the inner ear and immune system, including OTOG, PCDH15, USH1G, ADGRV1, ESRRB, CDH23, AQP6, KCNH2, TNFRSF13B, SDHA, HRH4, ADD1, SLC25A35, and HMX2. Structural analysis of the modelled proteins demonstrated that specific variants could alter the conformation of essential protein domains, which may compromise their function. The combination of these findings with the association of rs4947296 with bilateralism and its possible role as a regulator of TWEAK/Fn14/NF-?B pathways positions this variant and the newly identified genes as promising targets for molecular diagnosis and personalised therapies. However, functional studies and validation in larger cohorts are needed, particularly in the Brazilian population, which is still underrepresented in these analyses Ver menos