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Type: Artigo de periódico
Title: Light microscope observation of circulating human lymphocytes cultured in vitro
Author: Oliveira, Naila Francis Paulo de
Dolder, Mary Anne Heidi
Genari, Selma Candelária
Abstract: The purpose of this work was to study the isolation and a light microscopy technique for cultured lymphocytes. Blood samples were obtained by venipuncture with an anticoagulant added and centrifuged in a Percoll density gradient to separate the leukocytes. Lymphocytes were placed in 25 cm ³ tissue culture flasks at 37ºC. After culturing, they were fixed and stained with the methods used for blood smears. Results showed that not all fixing solutions and stains were an equally good choice for cultured lymphocytes.
Os linfócitos são células importantes do sistema imune e têm sido largamente utilizados em estudos morfológicos. Entretanto, a literatura sobre técnicas de preparação dessas células é escassa e antiga, especialmente para linfócitos cultivados in vitro. Portanto, o objetivo desse estudo foi relatar com detalhes as técnicas de isolamento e microscopia de luz de linfócitos mantidos em cultura. Amostras de sangue foram obtidas por punção venosa e centrifugadas em gradiente de densidade de Percoll, para separar os leucócitos. Os linfócitos foram mantidos em frascos de cultura de 25 cm³ a 37ºC. Após a cultura, as células foram fixadas e coradas de acordo com a metodologia utilizada para esfregaços sanguíneos. Nossos resultados mostraram que nem todos os fixadores e corantes utilizados para esfregaços sanguíneos são uma boa escolha para linfócitos cultivados in vitro.
Subject: blood
in vitro
lymphocytes
microscopy
morphology
Percoll
Editor: Instituto de Tecnologia do Paraná - Tecpar
Rights: aberto
Identifier DOI: 10.1590/S1516-89132010000500013
Address: http://dx.doi.org/10.1590/S1516-89132010000500013
http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1516-89132010000500013
Date Issue: 1-Oct-2010
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