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dc.contributor.CRUESPUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASpt_BR
dc.descriptionOrientador: Marcelo Menossi Teixeirapt_BR
dc.descriptionTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologiapt_BR
dc.format.extent1 recurso online ( p.) : il., digital, arquivo PDF.pt_BR
dc.format.mimetypeapplication/pdfpt_BR
dc.languageMultilínguapt_BR
dc.relation.requiresRequisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDFpt_BR
dc.typeTESE DIGITALpt_BR
dc.titlePromotores induzidos por seca em raízes de cana-de-açúcar ("Saccharum" spp.) : Drought-inducible promoters in sugarcane roots ("Saccharum" spp.)pt_BR
dc.title.alternativeDrought-inducible promoters in sugarcane roots ("Saccharum" spp.)pt_BR
dc.contributor.authorTsunada, Max Seiji, 1991-pt_BR
dc.contributor.advisorMenossi, Marcelo, 1968-pt_BR
dc.contributor.institutionUniversidade Estadual de Campinas. Instituto de Biologiapt_BR
dc.contributor.nameofprogramPrograma de Pós-Graduação em Genética e Biologia Molecularpt_BR
dc.subjectMonocotiledoneapt_BR
dc.subjectBiocombustíveispt_BR
dc.subjectRegulação da expressão gênicapt_BR
dc.subjectPlantas transgênicaspt_BR
dc.subjectBiotecnologiapt_BR
dc.subject.otherlanguageMonocotyledonsen
dc.subject.otherlanguageBiomass energyen
dc.subject.otherlanguageGene expression regulationen
dc.subject.otherlanguageTransgenic plantsen
dc.subject.otherlanguageBiotechnologyen
dc.description.abstractResumo: A seca é um dos principais fatores limitantes na produtividade de espécies agrícolas e seus efeitos tendem a ser mais intensos em algumas áreas atualmente utilizadas pela agricultura, segundo previsões climáticas. Nesse contexto, a compreensão dos mecanismos de resposta ao déficit hídrico apresenta grande importância para o desenvolvimento de cultivares mais produtivos e tolerantes a condições climáticas adversas. Recentemente, a manipulação de características do sistema radicular tem ganhado destaque como oportunidade para o melhoramento genético vegetal. Em paralelo, é sabido que o uso de promotores induzidos ou órgão específicos é uma estratégia interessante para um controle mais fino da expressão de transgenes. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi caracterizar a atividade de promotores de seis genes induzidos por seca e/ou raiz-específicos e seu potencial biotecnológico utilizando plantas transgênicas de cana-de-açúcar. Construções contendo as sequências promotoras fusionadas ao gene "GUS" foram utilizadas para rastrear sua atividade regulatória. Perfis de indução por seca e expressão preferencial em raízes foram detecados nos eventos transgenicos via qPCR do gene "GUS". Entretanto, a atividade enzimática da proteína repórter não foi observada em plantas submetidas ao ensaio histoquímico do GUS, indicando um provável mecanismo de silenciamento pós-transcricional. Para testar essa hipótese e propor uma solução, uma nova construção foi gerada contendo o promotor "ScDehydrin1" ("ScDHN1") controlando a transcrição do gene "scoGUS", uma versão codificante do gene "GUS" com otimização de códons para cana-de-açúcar. O uso do gene repórter "scoGUS" levou a detecção do atividade do promotor "ScDHN1" em condições de estresse osmótico enquanto que, nas mesmas condições, não houve atividade em plantas contendo a sequência GUS nativa de Escherichia coli. Associado a caracterização do promotor "ScDHN1", realizamos a identificação genômica da família deidrina em cana além da caracterização do perfil transcricional de seus membros em resposta a seca. Os dados indicam que membros da familiam deidrinas devem exercer funções protetivas em cana durante deficit hidrico. Por fim, novas sequências promotoras de cana-de-açúcar com perfil de indução por seca e/ou preferencial em raízes foram caracterizados visando seu uso biotecnológico. Os dados gerados nesse trabalho também serão úteis para estudos básicos com sequências regulatórias em cana, em que a otimização de códons de genes repórteres parece exercer papel fundamentalpt
dc.description.abstractAbstract: Drought is one of the main limiting factors for agricultural productivity and its effects are likely to be more intense in some land areas, according to climate change models. In this context, the understanding of regulatory mechanisms activated by plants in response to adverse environmental conditions may help to develop stress tolerant crops. Recently, genetic changes in the root system have been highlighted as an opportunity for plant breeding. Additionally, the use of inducible and organ specific promoters may help in the fine tuning of transgene expression. Therefore, the aim of this study was to characterize the regulatory activity of promoters from genes induced by drought and/or root-specific and their biotechnological potential in sugarcane transgenic plants. The promoter sequences were fused to "GUS" gene reporter to track their regulatory activity. Induction by drought and root-preferential regulation were detected in transgenic events via qPCR of the GUS transcript. However, no GUS activity was detected in plants submitted to GUS histochemical assay, indicating a probable post-transcriptional silencing event. In order to test this hypothesis and solve this issue, we generated a new construction composed by the promoter "ScDHN1" controlling the transcription of "scoGUS" gene, a codon-optimized GUS sequence for sugarcane. The use of "scoGUS" enabled to detect the promoter "ScDHN1" activity in plantlets under osmotic stress in vitro, while in the same conditions no activity was detected for plantlets harboring the native "GUS" gene from Escherichia coli. We also performed a genomic identification of the dehydrin family in sugarcane, and the influence of drought on the transcriptional regulation of "ScDHN" genes. Our data support that dehydrin members might play protective roles in sugarcane under hydric deficit. Lastly, new sugarcane promoter sequences displaying drought-inducible and/or root-preferential profile were characterized aiming biotechnology applications. The data provided in this work will also be useful for basic studies with regulatory sequence in sugarcane, in which the use of codon-optimized reporter genes is essentialen
dc.publisher[s.n.]pt_BR
dc.date.issued2018pt_BR
dc.identifier.citationTSUNADA, Max Seiji. Promotores induzidos por seca em raízes de cana-de-açúcar ("Saccharum" spp.): Drought-inducible promoters in sugarcane roots ("Saccharum" spp.). 2018. 1 recurso online ( p.) Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/341568. Acesso em: 15 May. 2020.pt_BR
dc.description.degreelevelDoutoradopt_BR
dc.description.degreedisciplineGenetica Vegetal e Melhoramentopt_BR
dc.description.degreenameDoutor em Genetica e Biologia Molecularpt_BR
dc.contributor.committeepersonalnameSouza, Alessandra Alves dept_BR
dc.contributor.committeepersonalnameHotta, Carlos Takeshipt_BR
dc.contributor.committeepersonalnameCesarino, Igorpt_BR
dc.contributor.committeepersonalnameCarneiro, Monalisa Sampaiopt_BR
dc.date.defense2018-08-28T00:00:00Zpt_BR
dc.description.sponsordocumentnumber2016/05501-6pt_BR
dc.date.available2020-05-15T21:51:51Z-
dc.date.accessioned2020-05-15T21:51:51Z-
dc.description.provenanceMade available in DSpace on 2020-05-15T21:51:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tsunada_MaxSeiji_D.pdf: 8747049 bytes, checksum: 80abd16d722dbf338ee1768aaa610b43 (MD5) Previous issue date: 2018en
dc.identifier.urihttp://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/341568-
dc.description.sponsorFAPESPpt_BR
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