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Type: DISSERTAÇÃO DIGITAL
Degree Level: Mestrado
Title: Efeito do extrato aquoso de Passiflora alata curtis na expressão de caspase 3, 9 e liberação citoplasmática de citocromo c mitocondrial em linfócitos t de camundongos Nod/ShiltJ  
Title Alternative: In vitro effect of aqueous extract from Passiflora alata curtis leaves in caspase 3, 9 expression and in cytoplasmatic release of mitochondial cytochrome c in t cells from Nod/ShiltJ Mice  
Author: Carvalho, Virginia Campos, 1987-
Advisor: Zollner, Ricardo de Lima, 1954-
Abstract: Resumo: Plantas medicinais apresentam historicamente um papel importante no desenvolvimento de medicamentos. Doenças inflamatórias e autoimunes são cada vez mais frequentes na população, como o diabetes mellitus tipo 1A (DM-1A), o que impulsiona a investigação do potencial terapêutico de compostos naturais. Modelos experimentais são utilizados para testar novos compostos com potencial efeito farmacológico e permitir melhor compreensão de seus mecanismos de ação. Os camundongos da linhagem NOD/ShiLtJ são utilizados, para estudos relacionados ao DM-1A por desenvolverem a doença espontaneamente, de maneira similar ao que ocorre nos humanos. A Farmacopeia Brasileira descreve Passiflora sp (maracujá) como fitoterápico, estando relacionado ao tratamento de diversas doenças, o maracujá possui também ação hipoglicemiante, propriedade importante no controle do diabetes. Nosso grupo investigou a atividade antioxidante do extrato aquoso das folhas do maracujá doce (Passiflora alata Curtis) e sua ação em camundongos não obesos diabéticos (NOD), modelo experimental do DM-1A, O tratamento com extrato aquoso das folhas de Passiflora alata Curtis (EAFPA), diminuiu a incidência do diabetes, possivelmente por sua ação antiproliferativa e antioxidante. Tal efeito parece estar associado com a diminuição do infiltrado de células inflamatórias, como linfócitos T CD4+ e CD8+ nas ilhotas pancreáticas (insulite). Neste contexto, investigamos o efeito in vitro do extrato aquoso liofilizado da folha de EAFPA (100, 200 e 500 µg/mL) na indução de morte celular por apoptose em linfócitos T CD4+ e CD8+ provenientes de camundongos NOD/ShiLtJ (não diabéticos). Para esta finalidade, avaliamos a frequência de células expressando caspases iniciadoras do processo apoptótico (caspase 9) e caspases efetoras (caspase-3). Adicionalmente avaliamos a liberação citoplasmática de citocromo C mitocondrial, um importante ativador da morte celular programada pela via intrínseca de apoptose. A análise das culturas tratadas na concentração de 200 ?g/mL do EAFPA, apresentou diminuição na expressão de caspase 9 ativa e maior viabilidade dos linfócitos. Por outro lado, nas analises de liberação de citocromo C, cerca de 80% das células analisadas não liberaram a proteina. Não foi observada necrose celular, indicando que outras vias de morte celular possam estar ativadas, levando-nos necessariamente a novas abordagens para caracterização destas vias

Abstract: Medicinal plants historically have an important role in drug development. Inflammatory and autoimmune disease are increasing in the population, such as diabetes mellitus type 1-A (DM-1A), that stimulates the investigation of the natural compounds therapeutic potential. Experimental models are used to test new compounds with a potential pharmacological effect and allow a better understanding of their mechanisms of action. In DM-1A the NOD/ShiLtJ mouse model is used, because it develops the disease spontaneously, similar to humans. The Brazilian Pharmacopoeia describes Passiflora sp (passion fruit) as phytotherapic, being related to the treatment of several diseases, and has hypoglycemic action, an important property in the diabetes control. Our group investigated the antioxidant activity of the aqueous extract of sweet passion fruit leaves (Passiflora alata Curtis ¿ EAFPA) and its action on diabetic non-obese mice (NOD), experimental model for DM-1A. The treatment with aqueous extract of the leaves of EAFPA, decreased the incidence of diabetes, possibly due to its antiproliferative and antioxidant action. This effect appears to be associated with a decrease in infiltrating inflammatory cells, such as T lymphocytes CD4+ and CD8+ in the pancreatic islets (insulitis). In this context, we investigated the in vitro effect of the lyophilized aqueous extract of the EAFPA leaf (100, 200 and 500 ?g/mL) on the induction of cell death by apoptosis in T lymphocytes CD4+ and CD8+ from NOD/ShiLtJ mice (nondiabetic). For this purpose, we evaluated the frequency of cells that expressed initiators of the apoptotic process caspase (caspase 9) and effector caspases (caspase-3). Furthermore we evaluated the cytoplasmic release of mitochondrial cytochrome C, an important activator of programmed cell death by the intrinsic pathway of apoptosis. Analysis of cultures treated with 200 ?g/mL of EAFPA presented a decrease in the expression of active caspase 9 and increased viability of lymphocytes. On the other hand, in the cytochrome C analyzes, about 80% of the cells analyzed did not release the protein. No cell necrosis has been observed, indicating that other cell death pathways may be activated, leading necessarily to new approaches to characterize these pathways
Subject: Passiflora alata
Diabetes Mellitus tipo 1A
Caspase 3
Caspase 9
Apoptose
Language: Português
Editor: [s.n.]
Citation: CARVALHO, Virginia Campos. Efeito do extrato aquoso de Passiflora alata curtis na expressão de caspase 3, 9 e liberação citoplasmática de citocromo c mitocondrial em linfócitos t de camundongos Nod/ShiltJ  . 2019. 1 recurso online (62 p.). Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP.
Date Issue: 2019
Appears in Collections:FCM - Tese e Dissertação

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