Please use this identifier to cite or link to this item: http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/335218
Type: TESE DIGITAL
Degree Level: Doutorado
Title: Ação antiangiogênica do Nintedanibe em células tumorais prostáticas e na próstata de camundongos transgênicos para o adenocarcinoma (TRAMP) em diferentes estágios de desenvolvimento do tumor   : Antiangiogenic action of Nintedanib in prostate tumor cells and in the prostate of transgenic mice for adenocarcinoma (TRAMP) in different stages of tumor development  
Title Alternative: Antiangiogenic action of Nintedanib in prostate tumor cells and in the prostate of transgenic mice for adenocarcinoma (TRAMP) in different stages of tumor development  
Author: Silva, Raquel Frenedoso, 1988-
Advisor: Cagnon, Valéria Helena Alves, 1967-
Abstract: Resumo: O câncer de próstata tem sido amplamente estudado devido ao grande número de indivíduos afetados por esse tipo de injúria, em adição à complexidade do desenvolvimento do órgão considerando a importante interação epitélio-estromal como fator principal pelas alterações prostáticas. Especial atenção tem sido dada ao estudo de inibidores das vias de FGF e VEGF como o Nintedanibe, um composto capaz de reduzir a angiogênese, prevenir a proliferação celular e diminuir o volume tumoral, usado na prevenção, intervenção e regressão do câncer de próstata. Uma vez que não há cura direta através de agentes químicos para o câncer de próstata em estágio avançado, ou mesmo terapias efetivas para o tratamento, torna-se necessário priorizar novos estudos com modelos animais que mimetizem a doença em homens. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a ação antiproliferativa do Nintedanibe em nove linhagens tumorais derivadas de diferentes tecidos, além de avaliação de proliferação e ciclo celular, motilidade, invasividade e capacidade clonogênica, bem como análise de perfil proteico e expressão gênica de células tumorais prostáticas humanas submetidas à droga. A ação antiproliferativa da droga foi avaliada também em modelo xenográfico para câncer de próstata, utilizando-se inoculação de células PC3 em camundongos nude; posteriormente, os tumores foram submetidos à análise imuno-histoquímica e de perfil proteico. Além disso, camundongos transgênicos para o adenocarcinoma de próstata (TRAMP) foram tratados com Nintedanibe (10mg/Kg/dia) em diferentes estágios do desenvolvimento tumoral, isto é, lesões malignas em estágios inicial (8 semanas), intermediário (12 semanas) e avançado (22 semanas). Após o final de tratamento, o lobo ventral da próstata foi coletado para análise do perfil estrutural e expressão de proteínas relacionadas ao desenvolvimento e progressão do câncer como receptores hormonais AR e ERalfa, FGF-2, FGF-7, FGFR-3, VEGF, VEGFR-1, HIF-1alfa, MMP-9 e vimentina, densidade de microvasos (marcação para CD31), além da avaliação da proliferação e morte celular através da marcação do PCNA e ensaio TUNEL, respectivamente. Ainda, possíveis efeitos tóxicos da droga no fígado, testículos e epidídimos foram avaliados, além de procura de focos metastáticos e ação da droga sobre os mesmos. A exposição de células tumorais prostáticas ao Nintedanibe levou à redução da viabilidade e clonogenicidade celular e do potencial móvel e invasivo, bem como afetou a expressão de moléculas cruciais para a progressão do ciclo celular, levando a uma saída do ciclo em fase G1. Além disso, a droga diminuiu o volume tumoral por interferir na proliferação celular e densidade de microvasos em tumor xenográfico, além de reduzir os níveis de moléculas pró-angiogênicas. Os resultados mostraram ainda, que a administração de Nintedanibe em camundongos TRAMP em período inicial e intermediário do desenvolvimento do carcinoma prostático exerceu efeito protetor na progressão do câncer de próstata, uma vez que atrasou a transformação neoplásica, diminuindo a vascularização tumoral e a imunolocalização e níveis de moléculas cruciais para a tumorigênese. Assim, no presente estudo pré-clínico, concluímos que a terapia antiangiogênica com Nintedanibe foi capaz de atrasar a transformação neoplásica no microambiente prostático, reduzindo a vascularização necessária à tumorigênese, impedindo que o desenvolvimento tumoral avançasse para estágios mais agressivos da doença. A terapia com Nintedanibe é promissora no tratamento do câncer de próstata, visto que no período pelo qual foi administrado não apresentou toxicidade hepática e reprodutiva

Abstract: Prostate cancer has been widely studied due to the large number of individuals affected by this type of injury, in addition to the complexity of the organ development, considering the important epithelial-stromal interaction as the main factor for prostatic changes. Special attention has been given to the study of FGF- and VEGF-inhibitors such as Nintedanib, a compound capable of reduce angiogenesis, prevent cell proliferation and decrease tumor volume, used in the prevention, intervention and regression of prostate cancer. Since there is no direct cure through chemical agents for advanced prostate cancer, or even effective treatment therapies, it becomes necessary to prioritize new studies in animal models that mimic the disease in men. The objective herein was to evaluate the antiproliferative action of Nintedanibe in nine tumor cell lines from different tissues, besides evaluation of proliferation and cell cycle assays, motility, invasiveness and clonogenic capacity, as well as analysis of protein profile and gene expression of human prostate tumor cells submitted to the drug. The antiproliferative action of the drug was also evaluated in xenograft mouse model for prostate cancer by inoculating PC3 cells in nude mice; subsequently, tumors were submitted to immunohistochemistry and protein profile assays. In addition, Transgenic Adenocarcinoma of the Mouse Prostate (TRAMP) were treated with Nintedanibe (10 mg/kg/day) at different stages of tumor development, i.e., malignant lesions in the initial (8 weeks), intermediate (12 weeks) and advanced (22 weeks) stages. At the end of treatment, the ventral prostate was collected for structural profile analysis and expression of proteins related to cancer development and progression such as hormonal receptors AR and ERalpha, FGF-2, FGF-7, FGFR-3, VEGF, VEGFR-1, HIF-1alpha, MMP-9 and vimentin, microvessel density (labeling for CD31), and evaluation of proliferation and apoptosis through PCNA labeling and TUNEL assay, respectively. Also, possible toxic effects of the drug in the liver, testes and epididymis were evaluated, as well as the search for metastatic foci and drug action on them. Exposure of prostatic tumor cells to Nintedanibe led to reduced cell viability and clonogenicity as well as mobile and invasive potential, besides affecting the expression of crucial molecules to the cell cycle progression, leading to a G1 phase cycling arrest. In addition, the drug decreased tumor volume by interfering with cell proliferation and microvessel density in xenograft tumor, as well as reducing levels of pro-angiogenic molecules. The results also showed that the administration of Nintedanib in TRAMP mouse at the initial and intermediate stages of the prostatic carcinoma development exerted a protective effect on cancer progression, since it delayed the neoplastic transformation in the prostatic microenvironment, reducing tumor vascularization besides immunolocalization and the levels of crucial molecules for tumorigenesis. Thus, in the present preclinical study, we conclude that antiangiogenic therapy with Nintedanibe was able to delay the neoplastic transformation in the prostatic microenvironment, reducing the necessary vascularization for tumorigenesis, preventing the tumor development to advance to more aggressive stages of the disease. Nintedanibe therapy is promising for the treatment of prostate cancer, since in it did not show liver and reproductive toxicity
Subject: Próstata - Câncer
Inibidores da angiogênese
Quimioterapia
Nintedanibe
Camundongos transgênicos
Language: Multilíngua
Editor: [s.n.]
Citation: SILVA, Raquel Frenedoso. Ação antiangiogênica do Nintedanibe em células tumorais prostáticas e na próstata de camundongos transgênicos para o adenocarcinoma (TRAMP) em diferentes estágios de desenvolvimento do tumor  : Antiangiogenic action of Nintedanib in prostate tumor cells and in the prostate of transgenic mice for adenocarcinoma (TRAMP) in different stages of tumor development  . 2018. 1 recurso online (161 p.). Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP.
Date Issue: 2018
Appears in Collections:IB - Tese e Dissertação

Files in This Item:
File SizeFormat 
Silva_RaquelFrenedosoDa_D.pdf7.13 MBAdobe PDFView/Open


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.