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Type: DISSERTAÇÃO DIGITAL
Degree Level: Mestrado
Title: Estudos fenotípicos de isolados clínicos de "Leishmania infantum"
Title Alternative: Phenotypic studies of clinical isolates of "Leishmania infantum"
Author: Araujo, Thalita Fernanda, 1989-
Advisor: Giorgio, Selma, 1962-
Abstract: Resumo: A leishmaniose visceral no Brasil é uma doença causada pelo protozoário "Leishmania infantum", afetando o homem e o cão. Os cães infectados são apontados como o principal reservatório de "L. infantum" em áreas urbanas. Devido às pressões seletivas distintas sofridas pelos isolados de "L. infantum" podem ocorrer diferentes fenótipos do parasita. A existência desses diferentes fenótipos terá consequências na resistência aos fármacos, infectividade e patogenicidade. Nesse trabalho isolamos dois parasitas provenientes de casos de leishmaniose visceral de paciente humano do Hospital das Clínicas da UNICAMP e de cão proveniente da Superintendência de Controle de Endemias ¿ SP, identificamos as espécies, comparamos a morfologia dos promastigotas, capacidade proliferativa e infectiva, e susceptibilidade a fármacos desses isolados clínicos para a análise do perfil fenotípico. Através da metodologia da PCR mostrou-se que os dois isolados clínicos de "Leishmania", pertencem a mesma espécie ("L. infantum"). Como parasita referência de todos os ensaios, utilizamos a "L. infantum" MHOM/BR/1972/LD proveniente de caso clínico humano. Na comparação morfológica do tamanho dos promastigotas não observamos diferenças significativas entre os isolados clínicos e o parasita referência. Nos ensaios de infectividade, macrófagos de origem humana da linhagem THP1 e canina da linhagem DH82 foram infectados nas proporções macrófago:parasita, 1:10 e 1:20, no período de 24 e 48 horas, e camundongos BALB/c foram inoculados com 2x106 promastigotas. Os resultados indicaram que os isolados clínicos e o parasita referência infectam macrófagos humano e canino, observando-se formas amastigotas intracelulares. Camundongos BALB/c foram igualmente infectados, analisados pela histopatologia e carga parasitária. Não há diferença significativa entre os isolados clínicos e o parasita referência no padrão histopatológico e de carga parasitária. Em relação a susceptibilidade aos fármacos analisada no modelo in vitro concluímos que os parasitas são igualmente susceptíveis a anfotericina B, miltefosina e ao antimoniato de meglumina

Abstract: Visceral leishmaniasis in Brazil is a disease caused by the protozoan "Leishmania infantum", infecting man and dog. The infected dogs are designated as the main reservoir of "L. infantum" in urban areas. Due to the different selective pressures of "L. infantum" isolates, different parasite phenotypes may occur. The existence of these different phenotypes will have consequences on drug resistance, infectivity and pathogenicity. In this work, we isolated two parasites from cases of visceral leishmaniasis one of them was isolated from a human patient of the Clinicals Hospital of UNICAMP and another clinical isolate was obtained from a dog of Endemics Control Superintendence - SP, identified the species, compared the morphology of promastigotes, proliferative and infective capacity, and susceptibility to drugs of these clinical isolates for the analysis of the phenotypic profile. With the methodology of the PCR it was shown that the two clinical isolates of "Leishmania" are "L. infantum". As a reference parasite of all the trials, we used "L. infantum" MHOM/BR/1972/LD from a human clinical case. In the morphological comparison of promastigote size, we did not observe significant differences between clinical isolates and reference parasite. In the infectivity assays, human macrophages THP1 and canine macrophages DH82 were infected in the macrophage:parasite, 1:10 and 1:20 ratios in the 24 and 48 hour period, and BALB/c mice were inoculated with 2x106 promastigotes. The results indicated that the clinical isolates and the reference parasite infect human and canine macrophages, observing intracellular amastigote forms. BALB/c mice were also infected, analyzed by histopathology and parasite load. Was evaluated no significant difference between clinical isolates and the reference parasite in the histopathological and parasitic load pattern. Regarding drug susceptibility, we conclude that the parasites are similarly susceptible to drugs used (amphotericin B, miltefosine and meglumine antimoniate)
Subject: Leishmania infantum
Leishmaniose visceral
Leishmaniose visceral canina
Language: Português
Editor: [s.n.]
Citation: ARAUJO, Thalita Fernanda. Estudos fenotípicos de isolados clínicos de "Leishmania infantum". 2019. 1 recurso online (85 p.). Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP.
Date Issue: 2019
Appears in Collections:IB - Tese e Dissertação

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