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Type: DISSERTAÇÃO DIGITAL
Degree Level: Mestrado
Title: Avaliação das atividades antioxidante, cicatrizante e anticâncer de araticum (Annona crassiflora Mart.) in vitro
Title Alternative: Evaluation of antioxidant, wound healing and anticancer activities of araticum (Annona crassiflora Mart.) in vitro
Author: Prado, Lívia Garcia, 1993-
Advisor: Pastore, Glaucia Maria, 1953-
Abstract: Resumo: O presente trabalho teve por objetivo a caracterização dos extratos brutos da casca e das sementes de Annona crassiflora Mart., a quantificação de compostos fenólicos totais, flavonoides e taninos condensados e a análise das atividades antioxidante, anticâncer e cicatrizante in vitro destes extratos. A caracterização dos extratos brutos foi feita por meio da análise por UHPLC-ESI-MS/MS. A quantificação de compostos fenólicos totais, flavonoides e taninos presentes nas amostras, bem como a capacidade antioxidante avaliada pelos ensaios de DPPH e TEAC foram efetuadas utilizando o espectrofotômetro e a avaliação da capacidade antioxidante por ORAC foi realizada em leitor de microplacas. Um ensaio antiproliferativo foi realizado com oito linhagens tumorais (U251, MCF-7, NCI-ADR/RES, NCI-H460, PC-3, OVCAR-3, HT-29 e K562) e duas linhagens não tumorais (HaCaT e 3T3) por meio da coloração de proteínas viáveis com sulforrodamina B. Ensaio de migração celular foi realizado com queratinócitos humanos imortalizados (HaCaT) e fibroblastos murinos (3T3) e a análise do ciclo celular com células de glioma (U251). Os compostos epicatequina (6221,63 µg/g) e catequina (579,40 µg/g) foram identificados como compostos majoritários do extrato da casca. Este extrato também apresentou 311,03 mg/g de fenóis totais, 117,12 mg/g de flavonoides, 179,94 mg/g de taninos e atividade antioxidante comprovada pelos ensaios DPPH (1065 µmol TE/g), TEAC (2022,13 µmol TE/g), ORAC hidrofílico (1302,68 µmol TE/g) e ORAC lipofílico (4643,78 µmol TE/g). No extrato das sementes, os compostos majoritários identificados foram a quercetina (21,11 µg/g) e o ácido clorogênico (16,41 µg/g). Foram quantificados 214,04 mg/g de fenóis totais, 23,74 mg/g de flavonoides, 3,27 mg/g de taninos e atividade antioxidante comprovada pelos ensaios DPPH (917 µmol TE/g), TEAC (190,54 µmol TE/g), ORAC hidrofílico (557,10 µmol TE/g) e ORAC lipofílico (5166,31 µmol TE/g). No ensaio antiproliferativo o extrato bruto da casca apresentou valor de TGI mais significativo como inibidor para a linhagem tumoral de glioma (U251 ¿ TGI = 37,64 µg/mL), ao passo que, o extrato bruto das sementes apresentou atividade antiproliferativa para as linhagens tumorais de ovário com fenótipo de resistência (NCI-ADR/RES ¿ TGI = 5,36 µg/mL) e próstata (PC-3 ¿ TGI = 16,60 µg/mL). O extrato das sementes induziu parada do ciclo celular nas fases G1 e G2/M de células de glioma (U251), apresentando potencial como inibidor mitótico, enquanto a casca induziu parada na fase G1. No ensaio de migração realizado com queratinócitos (HaCat), o extrato das sementes induziu 73% de fechamento da ranhura na sua maior concentração (3,6 µg/mL) e o extrato da casca inibiu a migração, permitindo que apenas 3,8% da ranhura fosse fechada em sua maior concentração (36 µg/mL). Já no ensaio com fibroblastos murinos (3T3), o extrato da casca induziu 34% de fechamento (3,1 µg/mL) e o das sementes 28% (1,5 µg/mL). Ambos os extratos de araticum apresentaram atividades antioxidante e anticâncer, e o extrato das sementes ação cicatrizante. Estes resultados sugerem um potencial no uso dos extratos de araticum como fonte de novos fármacos ou no enriquecimento de alimentos processados

Abstract: This study aimed to characterize the crude extracts of araticum peel and seed, the quantification of phenolic compounds, flavonoids and condensed tannins and the analysis of the antioxidant, wound healing and anticancer activities in vitro of these extracts. The characterization of the crude extracts was performed by UHPLC-ESI-MS/MS analysis. The quantification of total phenolic compounds, flavonoids and tannins present in the samples, as well as the antioxidant capacity evaluated by the DPPH and TEAC assays were performed by spectrophotometer analysis and the evaluation of the antioxidant capacity by ORAC was performed in a microplate reader. Antiproliferative assay was performed with eight tumor lines (U251, MCF-7, NCI-ADR/RES, NCI-H460, PC-3, OVCAR-3, HT-29 e K562) and two non-tumoral lines (HaCaT e 3T3) by staining viable proteins with sulforhodamine B. Cell migration experiment was performed with immortalized human keratinocytes (HaCat) and murine fibroblasts (3T3) and the analysis of cell cycle with glioma cells (U251). The compounds epicatechin (6221.63 µg/g) and catechin (579.40 µg/g) were identified as major compounds of the peel extract. This extract also showed 311.03 mg/g phenolic compounds, 117.12 mg/g flavonoids, 179.94 mg/g tannins and antioxidant activity proven by the DPPH (1065 µmolTE/g), TEAC (2022.13 µmolTE/g), hydrophilic ORAC (1302.68 µmolTE/g) and lipophilic ORAC (4643.78 µmolTE/g) assays, respectively. In the seed extract, the major compounds identified were quercetin (21.11 µg/g) and chlorogenic acid (16.41 µg/g). A total of 214.04 mg/g phenolic compounds, 23.74 mg/g flavonoids and 3.27 mg/g tannins was quantified and the antioxidant activity was proven by the DPPH (917 µmolTE/g), TEAC (190.54 µmolTE/g), hydrophilic ORAC (557.10 µmolTE/g) and lipophilic ORAC (5166.31 µmolTE/g) assays. In the antiproliferative assay the crude peel extract presented TGI significant value for glioma (U251 ¿ TGI = 37.64 µg/mL) tumor line. While the crude extract of the seeds presented antiproliferative activity especially in ovary strains with resistance phenotype (NCI-ADR/RES ¿ TGI = 5.36 µg/mL) and prostate (PC-3 ¿ TGI = 16.60 µg/mL). Seed extract arrest the cell cycle in the G1 and G2/M stages of glioma cells (U251), presenting potential as a mitotic inhibitor, while the peel extract arrest the G1 stage. In the migration test performed with keratinocytes (HaCaT), the seed extract induced 73% slot closure at its highest concentration (3.6 µg/mL) and the peel extract inhibited the migration, allowing only 3,8% slot closure at its highest concentration, (36 µg/mL). In the murine fibroblast (3T3) assay, the peel extract induced 34% closure (3.1 µg/mL) and the seed 28% (1.5 µg/mL). Both extracts of araticum presented antioxidant and anticancer activities, and the seed extract presented a healing action. These results suggest a potential in the use of araticum as a source of new drugs or in the enrichment of processed foods
Subject: Annona crassiflora Mart.
Antioxidantes
Compostos bioativos
Cicatrização de feridas
Atividade antiproliferativa
Language: Português
Editor: [s.n.]
Citation: PRADO, Lívia Garcia. Avaliação das atividades antioxidante, cicatrizante e anticâncer de araticum (Annona crassiflora Mart.) in vitro. 2018. 1 recurso online (86 p.). Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos, Campinas, SP.
Date Issue: 2018
Appears in Collections:FEA - Tese e Dissertação

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