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Type: DISSERTAÇÃO DIGITAL
Degree Level: Mestrado
Title: Avaliação da expressão de substância P, receptores Nk1 e citotoxicidade em cultura de fibroblastos após o contato com cimentos endodônticos
Title Alternative: Cytotoxicity evaluation of root canal sealers on fibroblast cell culture and expression of substance P and Nk-1 receptors
Author: Saavedra, Flávia Medeiros, 1990-
Advisor: Záia, Alexandre Augusto, 1968-
Abstract: Resumo: Os cimentos endodônticos são agentes de união entre a guta percha e as paredes do canal radicular. Embora fiquem na maioria dos casos contidos no interior do canal, por vezes podem ser extruídos até o ligamento periodontal e pouco se sabe sobre o potencial destes materiais de causar alguma sensação dolorosa nestas condições. Dentre os mediadores químicos inflamatórios, a substância P se destaca por estar relacionada à fisiologia da dor. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade de quatro cimentos endodônticos e se eles são capazes de elevar a produção da substância P e de seus receptores NK1 em uma cultura de fibroblastos da linhagem MRC-5. Assim, a citotoxicidade de quatro cimentos endodônticos (AH Plus, Endométhasone N, Endoseal e MTA Fillapex) foi verificada pelo ensaio de citotoxicidade 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil brometo de tetrazólio (MTT) para a aquisição da porcentagem de viabilidade celular em cada uma das diluições. As células foram então expostas aos extratos dos materiais testados em duas diluições escolhidas (1:4 e 1:8) e, após 24 horas, os sobrenadantes foram coletados para a realização do ensaio de imunoabsorção enzimática (Elisa) para substância P. Já as células tiveram o seu RNA extraído para a realização de PCR em tempo real, que quantificou a expressão dos genes TAC1 e TACR1 referente à substância P e receptor NK1, respectivamente. Observou-se que o cimento MTA Fillapex foi o mais citotóxico dentre os materiais testados e este cimento endodôntico foi o único material capaz de induzir a produção de substância P após o contato de seu extrato com a cultura celular. Além disso, todas as amostras expostas aos extratos dos cimentos endodônticos apresentaram expressão dos genes TAC1 e TACR1 aumentada, quando comparados ao grupo controle negativo. Portanto, de acordo com os resultados do presente estudo, conclui-se que todos os cimentos endodônticos são citotóxicos e que a expressão de substância P foi influenciada pelo contato da cultura de células com a elução do cimento endodôntico MTA Fillapex. Contudo, houve um aumento da expressão dos genes codificantes da substância P e do seu receptor NK1 em todas as amostras

Abstract: Root canal sealers are bond agents between gutta percha and the root canal walls. Although they are in most cases contained within the canal, they are able to be extruded into the periodontal ligament sometimes, and there isn¿t many knowledgement about the potential of these materials to cause any painful sensation under these conditions. Among the chemical mediators of inflammation, substance P stands out because it is directly related to the physiology of pain. Thus, the aim of the present study was to analyze the potential of substance P and NK1 receptors production by different endodontic root canal sealers, and their cytotoxicity, when in contact with MRC5 fibroblasts cell culture. So, the cytotoxicity of four endodontic root canal sealers (AH Plus, Endométhasone N, Endoseal and MTA Fillapex) were verified by the cell viability test 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) to gain the percentage of viable cells in each of the dilutions. The cells were then exposed to the extracts of the materials in two chosen dilutions (1:4 and 1:8). After 24 hours the supernatants were collected for the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for substance P, and the cell cultures had their RNA extracted for real-time PCR, which quantified the expression of TAC1 and TACR1 genes which encodes substance P and NK1 receptors, respectively. The results showed that MTA Fillapex was the most cytotoxic materials tested. In addition, it was the only material able to induce the production of substance P by fibroblasts. All samples showed increased TAC1 and TACR1 gene expression when compared to the negative control group. Therefore, we can conclude that all endodontic root canal sealer materials are cytotoxic, but the expression of substance P was induced only by MTA Fillapex. However, there was an increased expression of the genes TAC1 and TACR1 influenced by all root canal sealers
Subject: Ligamento periodontal
Substância P
Receptores da neurocinina-1
Editor: [s.n.]
Citation: SAAVEDRA, Flávia Medeiros. Avaliação da expressão de substância P, receptores Nk1 e citotoxicidade em cultura de fibroblastos após o contato com cimentos endodônticos. 2017. 1 recurso online (71 p.). Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Piracicaba, SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/331940>. Acesso em: 1 set. 2018.
Date Issue: 2017
Appears in Collections:FOP - Tese e Dissertação

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