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Type: TESE DIGITAL
Degree Level: Doutorado
Title: Potencial terapêutico do ativador de guanilato ciclase solúvel, BAY 58-2667, na disfunção miccional associada a cistite intersticial experimental
Title Alternative: Therapeutic potential of soluble guanylate cyclase activator, BAY 58-2667, on voiding disfunction associated with experimental interstitial cystitis
Author: Taranto, Mariana Gonçalves de Oliveira, 1987-
Advisor: Antunes, Edson, 1960-
Abstract: Resumo: A Cistite Intersticial/Síndrome da Dor Vesical (CI/SDV) é uma doença inflamatória crônica caracterizada por dor suprapúbica, desconforto, urgência e excessiva freqüência urinária, além de prejudicar profundamente a qualidade de vida dos pacientes. A cistite induzida por ciclofosfamida (CYP) é um modelo experimental amplamente utilizado para investigação da CI/SDV devido à sua similaridade com a doença humana. Estudos mostram que o estresse oxidativo excessivo durante a inflamação pode comprometer a função da bexiga ao prejudicar a sinalização óxido nítrico (NO)/ guanilato ciclase solúvel (GCs)/GMPc. Os ativadores GCs, NO e heme-independentes, têm elevada afinidade para a forma oxidada (insensível ao NO) desta enzima, sendo capazes de elevar a produção de GMPc, restaurando a sinalização. Este estudo teve como objetivo a padronização de um modelo de cistite induzida por CYP, com ênfase em determinar o melhor modelo experimental para o estudo das disfunções miccionais observadas na cistite induzida por CYP e avaliar as alterações na via de sinalização GCs/GMPc. Avaliou-se ainda, os efeitos protetores do ativador da GCs, BAY 58-2667, na disfunção miccional e processo inflamatório associado à cistite. Utilizaram-se camundongos C57BL/6, fêmeas, com 8 a 10 semanas de idade (20-25 g). A cistite foi induzida por injeção(ões) de CYP (75-300 mg/kg, i.p) e os animais avaliados após 4, 24 horas ou 10 dias. Para avaliação da prevenção da cistite por BAY 58-2667, os animais foram pré-tratados com BAY 58-2667 (1 mg/kg) ou o seu veículo (transcutol/cremophor/água, 1:2:7, v:v), por gavagem, 1 hora antes da indução de cistite, e os estudos foram realizados 24 horas após a administração de CYP. Os padrões de micção em animal acordado (micção em papel filtro) e anestesiado (cistometria), assim como as contrações in vitro da bexiga foram determinados. Em camundongos com movimento livre, a injeção de CYP reduziu o volume da micção e aumentou o número de manchas de micção. Os registros cistométricos de camundongos injetados com CYP revelaram aumentos significativos da freqüência de micção e contrações não miccionais (CNMs), juntamente com diminuições na capacidade da bexiga, intervalos de micção e complacência. Além da disfunção miccional, observou-se o desenvolvimento de processo inflamatório, evidenciado por aumento no peso vesical, na atividade de mieloperoxidase (MPO) e na expressão de ciclooxigenase-2 (COX-2), além de alterações histológicas que indicaram infiltrado inflamatório, desorganização tecidual e denudação do urotélio. O pré-tratamento dos animais com BAY 58-2667 preveniu significativamente as alterações miccionais observadas tanto em animais com movimento livre quanto na cistometria, e normalizou a redução da contração vesical induzida por carbacol. No tecido vesical, a expressão das subunidades ?1 e ?1 da GCs e os níveis de GMPc foram significativamente reduzidos no grupo CYP, alterações prevenidas pelo tratamento com BAY 58-2667. A exposição à CYP aumentou a geração de espécies reativas de oxigênio (ERO) tanto no detrusor quanto no urotélio, sendo esta alteração normalizada pelo BAY 58-2667. Os parâmetros inflamatórios avaliados nas bexigas do grupo CYP permaneceram inalteradas pelo pré-tratamento com BAY 58-2667. Em conclusão, os ativadores da GCs podem constituir uma nova e promissora abordagem terapêutica para o tratamento da cistite intersticial

Abstract: Interstitial Cystitis/Bladder Pain Syndrome (IC/BPS) is a chronic inflammatory disease characterized by suprapubic pain, discomfort, urgency, and excessive urinary frequency, and profoundly impairs patient¿s quality of life. Cyclophosphamide (CYP)-induced cystitis is a widely used experimental model for IC/BPS research because of its similarity with the human disease. Studies show that excessive oxidative stress during inflammation affect the bladder function by impairing the nitric oxide (NO) / soluble guanylate cyclase (sGC) / cGMP signaling pathway. NO- and heme-independent sGC activators have high affinity for the oxidized, NO-insensitive, form of this enzyme, being able to raise cGMP production, restoring the signaling. This study aimed to standardize a CYP-induced cystitis animal model, with an emphasis on determining the better experimental model for the study of voiding dysfunctions observed in CYP-induced cystitis and also evaluate the changes in sGC/cGMP signaling pathway. The protective effects of BAY 58-2667 (sGC activator) on voiding dysfunction and inflammatory process associated with cystitis were also evaluated. Female C57BL/6 mice, 8-10 weeks old (20-25g) were used. Cystitis was induced by an injection(s) of CYP (75-300 mg/kg, i.p.) and the animals were evaluated after 4, 24 hours or 10 days. For evaluation of the prevention of cystitis by BAY 58-2667, the animals were pretreated with BAY 58-2667 (1 mg/kg) or its vehicle (transcutol/cremophor/water, 1:2:7, v:v) by gavage 1 hour prior cystitis induction and studies were performed 24 hours after CYP administration. The patterns of micturition in both awake (micturition in filter paper; free movement) and anesthetized (cystometry), as well as in vitro bladder contractions were determined. In mice with free movement, CYP injection reduced the volume of micturition and increased the number of micturition spots. Cystometric records of mice injected with CYP revealed significant increases in urinary frequency and non-voiding contractions (NVCs), along with decreases in bladder capacity, micturition intervals and compliance. In addition to voiding dysfunction, the development of an inflammatory process was evidenced by an increase in bladder weight, myeloperoxidase activity (MPO) and cyclooxygenase-2 (COX-2) expression, as well as histological changes, indicating inflammatory infiltrate, tissue disorganization and urothelium denudation. Pretreatment of the animals with BAY 58-2667 significantly prevented the micturition changes observed in both free-moving and cystometry, and normalized the reduction of carbachol-induced bladder contraction. In the bladder tissue, the expression of ?1 and ?1 subunits of GCs and the cGMP levels in the CYP group were marked reduced, which were all prevented by BAY 58-2667 treatment. Exposure to CYP increased the generation of reactive oxygen species (ROS) in both detrusor and urothelium, which was normalized by BAY 58-2667. The inflammatory parameters evaluated in the bladders of the CYP group remained unchanged by pre-treatment with BAY 58-2667. In conclusion, GCs activators may constitute a new and promising therapeutic approach for the treatment of interstitial cystitis
Subject: Cistite intersticial
Bexiga
GMP cíclico
Editor: [s.n.]
Citation: TARANTO, Mariana Gonçalves de Oliveira. Potencial terapêutico do ativador de guanilato ciclase solúvel, BAY 58-2667, na disfunção miccional associada a cistite intersticial experimental. 2017. 1 recurso online ( 90 p.). Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/322641>. Acesso em: 1 set. 2018.
Date Issue: 2017
Appears in Collections:FCM - Tese e Dissertação

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