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Type: TESE DIGITAL
Title: Detecção e isolamento de norovírus em colônias de ratos de laboratório (Rattus norvergicus)
Title Alternative: Detection and isolation of norovirus in laboratory rat colonies (Rattus norvergicus)
Author: Moreira, Joselia Cristina de Oliveira, 1982-
Advisor: Costa, Fernando Ferreira, 1950-
Abstract: Resumo: Norovírus (NoV) é um agente infeccioso de amplitude mundial, sendo o principal responsável por causar surtos de gastroenterites virais em crianças, idosos e indivíduos imunocomprometidos. Assim como em humanos, a infecção por NoV também ocorre em diversos modelos animais: camundongos, cães, gatos, bovinos e suínos. Recentemente, o vírus foi identificado em ratos de laboratório (Rattus novergicus), mas até o momento, não há relatos de seu isolamento em cultura celular ou de metodologias para detecção deste vírus em amostras de ratos. Diante disso, este estudo tem por objetivo realizar o isolamento celular de NoV de colônias de ratos e implantar técnicas de diagnóstico molecular, semi-nested RT-PCR e a técnica sorológica de IFI para monitoramento sanitário deste agente. Para o isolamento do vírus, suspensões de fezes de ratos convencionais foram inoculadas em células permissivas de macrófago RAW 264.7, até a observação de efeito citopático. A reação de semi-nested RT-PCR foi estabelecida com primers específicos para a região conservada do capsídeo (VP1) e utilizada para confirmação do isolamento viral. A implantação destas metodologias auxiliou no estabelecimento de um programa de monitoramento sanitário e na determinação da prevalência molecular (12%) e sorológica (11,45%) deste vírus nas colônias de rato de biotérios brasileiros. Análises moleculares dos isolados virais demonstraram uma identidade de nucleotídeos de 98% com a mesma região das cepas padrão de rato, resultando no depósito da primeira cepa brasileira de NoV de rato no GenBank KU169124, bem como o estabelecimento das metodologias de diagnóstico para norovírus

Abstract: Norovirus (NoV) is a high prevalent viral agent of worldwide and responsable to cause outbreaks of gastroenteritis in children, elderly and immunocompromised individuals. As well as in humans the NoV infection occurs in several animal models: mice, dogs, cats, cattle and pigs. Recently, the virus was identified in laboratory rats (Rattus novergicus), so far there are no reports of its isolation or establishment of diagnostic methods for the detection of this virus in rat samples. This study aimed to isolate NoV of rat colonies and the establishment of a semi-nested RT-PCR and Indirect Immunofluorescence to monitoring this agent. For virus isolation, suspensions of feces were inoculated in a permissive cell line RAW 264.7 until presentation of citopatic effects. The semi-nested reaction was established using specifics primers to conserved region of the capside protein (VP1) and used to confirm the viral isolation. These methodologies contributed in the establishing of a health monitoring program and determining the molecular (12%) and serologic (11.45%) prevalence of this virus in the rat colonies of Brazilian animal facilities. Molecular analysis showed 98% of nucleotide identity between our isolate and the same region of rat prototype, resulting in the deposit of our isolate in the GenBank KU169124 and the establishment of diagnostic methodologies
Subject: Norovirus
Ratos
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2016
Appears in Collections:FCM - Tese e Dissertação

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