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Type: TESE DIGITAL
Title: Avaliação de propriedades in vitro e in vivo de scaffolds de PLGA incorporados com óleo-resina de copaíba preparados por eletrofiação = In vitro and in vivo properties of PLGA scaffolds incorporated with Copaiba oil-resin prepared by electrospinning
Title Alternative: In vitro and in vivo properties of PLGA scaffolds incorporated with Copaiba oil-resin prepared by electrospinning
Author: Millás, Ana Luiza Garcia, 1983-
Advisor: Bittencourt, Edison, 1941-
Abstract: Resumo: O desenvolvimento de substitutos de tecidos para o tratamento de lesões é um desafio para a medicina regenerativa e para a engenharia de tecidos. Tem crescido a demanda por alternativas terapêuticas, bem como a análise da eficácia e segurança quanto ao estímulo à cicatrização. Utilizando a técnica de electrospinning, esta tese se concentra no desenvolvimento de um scaffold fibroso, com diâmetros uniformes e porosidade adequados ao crescimento celular tridimensional, visando à futura aplicação como substituto dérmico que auxilie na cicatrização e remodelação de tecidos danificados ou perdidos, e, que seja ainda, assimilado pelo organismo ao longo do processo de reparo tecidual. As matrizes fibrosas foram produzidas a partir de soluções do polímero poli(ácido láctico-co-glicólico) PLGA 50:50, biorreabsorvível e aprovado pela agência reguladora FDA, dissolvido em 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol (HFIP). Aos scaffolds foi incorporado o óleo-resina de copaíba da espécie Copaifera langsdorffii, um fitoterápico de origem amazônica com comprovadas propriedades terapêuticas, antiinflamatória, de analgesia e antimicrobiana. Foi realizada uma análise comparativa entre os scaffolds de PLGA sem óleo e com o óleo-resina de copaíba e investigadas as interações scaffolds/células, em ensaios in vitro, e scaffolds/tecidos em ensaios in vivo com modelo animal. Os experimentos in vitro evidenciaram a citocompatibilidade dos scaffolds sem o óleo e citotoxicidade dos scaffolds com o óleo-resina de copaíba. Nos scaffolds sem o óleo-resina foi comprovada a presença de colágeno Tipo I e Tipo III produzidos pelos fibroblastos cultivados, o que torna esse material um potencial substituto dérmico celular. As análises histopatológicas dos testes in vivo indicaram que o tecido dos ratos reagiu positivamente aos dois scaffolds, além de biocompatíveis, o material se biointegrou aos tecidos subcutâneo e intramuscular dos animais, e um novo tecido se formou no interior dos implantes. Nos scaffolds com óleo-resina de copaíba foi observada intensa angiogênese. Nos ensaios in vivo não foram observadas respostas inflamatórias crônicas, necrose, calcificação, tumorogênese ou qualquer tipo de infecção. Portanto, conclui-se que: 1) os testes in vitro isoladamente não serviram para investigar a ação do óleo-resina de copaíba; 2) a estrutura tridimensional e porosa dos scaffolds são propriedades essenciais à biocompatibilidade e à biointegração in vivo dos scaffolds; 3) o óleo-resina de copaíba promove a angiogênese; 4) as matrizes fibrosas desenvolvidas têm potencial para futura aplicação como substituto celular de tecidos

Abstract: The development of tissue substitutes for the treatment of injuries is a challenge in regenerative medicine and tissue engineering fields. There has been a growing demand for therapeutic alternatives, as well as the analysis of efficacy and stimulating healing process. Using the electrospinning technique, this thesis focuses on the development of a fibrous matrices, with uniform diameters and porosity adequate for three-dimensional cell growth, aiming to be applied as a dermal cells support, replacing or regenerating damaged or lost tissues. The scaffolds were produced using solutions of poly (lactic-co-glycolic acid) PLGA 50:50 dissolved in 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2 propanol (HFIP), a bioresorbable polymer, approved by the FDA regulatory agency. The scaffolds were incorporated with copaíba oil-resin (Copaifera langsdorffii), a phytotherapy from Amazon with proven therapeutic properties, anti-inflammatory, analgesic and antimicrobial. A comparative analysis between the scaffolds with oil and without oil-resin was performed. The interfaces scaffoldsl/cells were studied in vitro, and material/tissues was investigated in vivo. The in vitro assays showed cytocompatibility of the scaffolds without oil and cytotoxicity of the scaffolds with copaíba oil-resin. In the scaffolds without oil was proven the presence of collagen type I and type III deposited by the fibroblasts. Histopathological analyzes of the in vivo tests indicated that the rat tissues reacted positively to both scaffolds, in addition to being biocompatible, the material biointegrated to the subcutaneous and intramuscular animal tissues, and a new tissue was formed inside the implants. In the scaffolds with copaiba oil-resin intense angiogenesis was observed. No chronic inflammatory responses, necrosis, calcification, tumorogenesis or any type of infection were observed. Therefore, we conclude that: 1) the in vitro assays alone was not efficient to investigate the copaiba oil-resin action; 2) the three-dimensional pore structure of the scaffolds was essential to their biocompatibility and biointegration; 3) copaiba oil-resin promotes angiogenesis; 4) the fibrous matrices developed have potential for future application as a tissue substitute
Subject: Eletrofiação
Tissue scaffolds
In Vitro
Oleo-resina de copaiba
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2016
Appears in Collections:FEQ - Dissertação e Tese

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