Please use this identifier to cite or link to this item: http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/321064
Type: DISSERTAÇÃO DIGITAL
Degree Level: Mestrado
Title: Caracterização clínica e molecular de pacientes com a Síndrome de Wiskott-Aldrich
Title Alternative: Clinical and molecular characterization of patients with the Wiskott-Aldrich Syndrome
Author: Medina, Samuel de Souza, 1983-
Advisor: Ozelo, Margareth Castro, 1970-
Abstract: Resumo: A síndrome de Wiskott-Aldrich (WAS) é uma rara imunodeficiência primária de herança recessiva ligada ao cromossomo X, caracterizada por trombocitopenia, microplaquetas, eczema, infecções recorrentes e risco aumentado de doenças autoimunes e neoplasias. É causada por mutações no gene WAS, que codifica a proteína da síndrome de Wiskott-Aldrich (WASP), expressa predominantemente em células hematopoiéticas e responsável por desempenhar um importante papel na reorganização do citoesqueleto de actina e na sinalização celular. As mutações no gene WAS podem ter vários efeitos sobre o nível de expressão da proteína, o que, por sua vez, se correlaciona com a gravidade da doença. Algumas mutações no gene WAS podem também estar associadas a outras manifestações mais leves, como a trombocitopenia ligada ao X (XLT) e a neutropenia ligada ao X (XLN). Considerando que o único tratamento curativo disponível atualmente para a WAS é o transplante alogênico de células-tronco hematopoiéticas, que é associado a considerável morbi-mortalidade, uma melhor caracterização clínica e molecular dos pacientes portadores da WAS pode contribuir para a compreensão dos mecanismos fisiopatológicos subjacentes e para a adequada estratificação dos pacientes, possivelmente influenciando a tomada de decisões terapêuticas. Neste estudo, nós realizamos a pesquisa molecular de 16 casos com suspeita clínica da WAS ou XLT e confirmamos o diagnóstico de WAS em 7 deles. Em dois casos foi confirmado o diagnóstico de XLT. Também analisamos a expressão da WASP em leucócitos de sangue periférico nos 2 casos com o diagnóstico de XLT e em 3 dos 7 casos com o diagnóstico da WAS. Todos apresentaram expressão reduzida da WASP em relação ao controle normal. Os pacientes foram classificados com base nas informações clínicas da seguinte maneira: um recebeu escore clínico de 1; dois receberam o escore 2; três receberam escore 3 e três receberam escore 4. Foram identificadas neste grupo de pacientes um total de 9 mutações no gene WAS, sendo 3 mutações do tipo missense, 4 mutações nonsense e 2 mutações com alteração em sítio de splicing. Das 9 mutações encontradas, 4 não haviam sido descritas previamente na literatura: c.1040delA no exon 10, que resultou na alteração p.Lys336ArgfsX108 (nonsense); c.207C>T e c.233delC no exon 2, que resultaram respectivamente na troca p.Pro58Leu (missense) e na alteração do frame de leitura, com stop códon prematuro p.Asn78AsnfsX48 (nonsense); e c.743_746delAT no exon 7, que resultou na alteração p.Asp237AspfsX21 (nonsense). Nos dois pacientes que receberam o diagnóstico de XLT foram encontradas mutações missense localizadas na porção upstream do gene WAS (exon 2). Já entre os 7 pacientes com diagnóstico confirmado de WAS, apenas dois apresentaram mutações do tipo nonsense na região upstream do gene WAS, enquanto todos os outros apresentaram mutações do tipo missense, nonsense e em sítio de splicing localizadas na porção downstream do gene WAS (a partir do exon 4). Desta maneira, os achados deste estudo estão de acordo com os autores que afirmam que as manifestações mais leves da síndrome estão associadas com mutações missense nos exons 1 e 2 do gene que codifica a proteína WASP, enquanto as manifestações mais graves são causadas por mutações em outras regiões do gene, ocorrendo predominantemente na sua metade downstream

Abstract: Wiskott-Aldrich syndrome (WAS) is a rare primary immunodeficiency with X-linked recessive inheritance, characterized by thrombocytopenia, small platelets, eczema, recurrent infections and increased risk of autoimmune diseases and cancer. It is caused by mutations in the gene coding for the Wiskott-Aldrich syndrome protein (WASP), predominantly expressed in hematopoietic cells and responsible to play an important role in reorganization of actin cytoskeleton and cell signaling. Mutations in the WAS gene can alter the level of protein expression, which correlates with disease severity. Some mutations in WAS gene may also be associated with other milder manifestations, such as X-linked thrombocytopenia (XLT) and X-linked neutropenia (XLN). Whereas the only currently available curative treatment for WAS is allogeneic hematopoietic stem cells transplantation, which is associated with considerable morbidity and mortality, a better clinical and molecular characterization of patients with WAS can contribute to the understanding of the underlying pathophysiological mechanisms and for proper stratification of patients possibly influencing decision-making in the therapeutic setting. In this study, we performed molecular analysis of 16 patients with clinical suspicion of WAS or XLT and confirmed the diagnosis of WAS in 7 of them. In 2 cases the diagnosis of XLT was confirmed. We also analyzed the expression of WASP in peripheral blood leukocytes in both patients with the diagnosis XLT and in 3 out of 7 patients with the diagnosis of the WAS. All of them showed reduced expression of WASP compared to normal control. Patients were categorized based on clinical information as follows: one received clinical score 1, two received score 2, three received score 3, and three received score 4. A total of 9 mutations in the WAS gene have been identified in this group of patients: 3 missense mutations, 4 nonsense mutations and 2 splice site mutations. Among the 9 mutations found, 4 had never been previously described in literature: c.1040delA in exon 10, which resulted in a premature stop codon p.Lys336ArgfsX108 (nonsense); c.207C>T and c.233delC in exon 2, resulting respectively in an aminoacid change p.Pro58Leu (missense), and in a frameshift with a premature stop codon p.Asn78AsnfsX48 (nonsense); and c.743_746delAT in exon 7, resulting in the change p.Asp237AspfsX21 (nonsense). Both patients with XLT presented missense mutations located in the upstream portion of the WAS gene (exon 2). Among the 7 patients with confirmed diagnosis of WAS, only two of them showed nonsense mutations in the upstream region of the WAS gene, while all the others had missense, nonsense and splice site mutations located in the downstream portion of the WAS gene (from exon 4 and beyond). Thus, the findings of this study agree with the authors who claim that milder forms of the syndrome are associated with missense mutations in exons 1 and 2 of the WAS gene, while the most severe manifestations are caused by mutations in other regions of the gene, predominantly occurring in its downstream half
Subject: Trombocitopenia
Síndromes de deficiência imunológica
Síndrome de Wiskott-Aldrich
Editor: [s.n.]
Citation: MEDINA, Samuel de Souza. Caracterização clínica e molecular de pacientes com a Síndrome de Wiskott-Aldrich. 2016. 1 recurso online (60 p.). Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/321064>. Acesso em: 31 ago. 2018.
Date Issue: 2016
Appears in Collections:FCM - Tese e Dissertação

Files in This Item:
File SizeFormat 
Medina_SamueldeSouza_M.pdf1.92 MBAdobe PDFView/Open


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.