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Type: TESE
Title: Alterações morfologicas e atividades e expressão de citocromos P450 no figado de ratos tratados com L-NAME
Title Alternative: Hepatic morphological alterations and cytochrome P450 activities and expression in rats treated with L-NAME
Author: Tarsitano, Christiane Aparecida Badin
Advisor: Hyslop, Stephen, 1964-
Abstract: Resumo: óxido nítrico (NO), um co-produto do metabolismo do aminoácido Larginina para L-citrulina pela NO sintase (NOS), exerce importantes funções no controle do tôno vascular, no processo inflamatório, e na modulação da expressão gênica e atividade enzimática de diversas enzimas, tais como citocromos P-450 e NOS. A inibição crônica da biossíntese de NO por NW-nitro-L-argininemetil éster (L-NAME) leva à hipertensão e produz alterações morfológicas que incluem hipertrofia e remodelamento vascular, efeitos estes que são revertidos por inibidores da enzima conversora de angiotensina I (ECA) e antagonistas dos receptores AT1 de angiotensina 11. O NO exerce papel fundamental na hemodinâmica e função celular do fígado, e pode regular a atividade dos citocromos P450 monooxigenases que são importantes na biotransformação de substâncias endógenas e exógenas. Neste trabalho, examinamos a influência do tratamento com L-NAME sobre a morfologia hepática, o conteúdo de glicogênio, colesterole triglicérides,e a atividadee expressãodas isoformasCYP1A1/2, CYP 281/2, CYP2C11 e CYP2E1de citocromoP450.No tratamentoagudo estudamos também a expressão de duas metaloproteinases de matriz (MMP-2 e MPP-9). Ratos Wistar machos foram tratados com L-NAME (20 mg/rato/dia, administrado na água de beber) por quarto e oito dias (tratamento agudo) e duas, quatro e oito semanas (tratamento crônico) e os fígados foram removidos para análise. A indução enzimática foi realizada tratando-se os ratos com fenobarbital (para induzir CYP2B1/2), p-naphthoflavone (para induzir CYP1A1/2) (80 mg/kg/dia, Lp., 4 d) ou pirazole (200 mg/kg/dia, Lp., 2 d) (para induzir CYP2E1). O tratamento com L-NAME elevou significativamente a pressão sangüínea e esta foi revertida pelo tratamento concomitante com enalapril (25 mg/kg/dia, p.o., inibidor da ECA) ou losartan (30 mg/kg/dia, p.O.,antagonista dos receptores AT1). L-NAME causou hipertrofia vascular em artérias hepáticas, com depósito de colágeno perivascular e fibrose intersticial. Houve também um aumento significativo no conteúdo de glicogênio hepático. Todas estas alterações foram completamente revertidas por enalapril ou losartan. O tratamento com L-NAME não alterou o conteúdo de colesterol e triglicérides hepáticos, e não afetou as atividades basais e induzidas ou a expressão das isoformas de citocromo P450. O tratamento agudo com LNAME aumentou a expressão de MMP-2 e MMP-9 na parede vascular e em células inflamatórias (Ieucócitos, macrófagos). Esses resultados mostram que o tratamento agudo e crônico com L-NAME produz alterações morfológicas na vasculatura hepática e aumenta o conteúdo hepático de glicogênio, sem porém alterar o metabolismo de lípides ou a atividade e expressão de citocromos P450. A ausência de um efeito sobre os citocromos P450 indica que estas enzimas, não são influenciadas por níveis baixos de NO. Já a capacidade do enalapril e losartan em proteger contra as alterações morfológicas e o aumento de glicogênio indica um papel importante para o sistema renina-angiotensina nestas respostas

Abstract: Nitric oxide (NO), a co-product of the metabolism of L-arginine to L-citrulline by NO synthases (NOS), has an important role in regulating vascular tone, inflammatory responses, and the gene expression and enzymatic activity of various proteins, including cytochrome P450 and NOS. The chronic inhibition of NOS by Nffi-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) produces sustained arterial hypertension and morphological alterations that include arterial wall hypertrophy and vascular remodeling. These changes can be prevented by concomitant treatment with angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibitors and angiotensin 11 AT1 receptor antagonists. NO is an important modulator in the hepatic vasculature and of hepatic cell function, and may regulate the activity of cytochrome P450 monooxygenases involved in the biotransformation of endogenous and exogeous substances. In this work, we examined the influence of L-NAME on rat liver morphology, hepatic glycogen, cholesterol and triglyceride content, and the activities and expression of the cytochrome P450 isoforms CYP1A1/2, CYP2B1/2, CYP2C11 and CYP2E1. We also examined the expression of two matrix metalloproteinases (MMP-2 and MPP-9) after short-term treament with L-NAME. Male Wistar rats were treated with L-NAME (20 mg/ratlday, administered in the drinking water) for four and eight days (short-term treatment) and two, four and eight weeks (chronic treatment) and the livers were then removed for analysis. Enzymatic induction was produced by treating rats with phenobarbital (to induce CYP2B1/2), ~-naphthoflavone (to induce CYP1A1/2) (80 mg/kg/day each, i.p., 4 d) or pyrazole (200 mg/kg/day, i.p., 2 d) (to induce CYP2E1). Treatment with LNAME significantly elevated the blood pressure and this was reversed by concomitant treatment with enalapril (25 mg/kg/day, p.o., ACE inhibitor) or losartan (30 mg/kg/day, p.o., angiotensin II AT1 receptor antagonist). L-NAME caused vascular hypertrophy in hepatic arteries, with perivascular and interstitial fibrosis involving collagen deposition. There was also a significant increase in the hepatic glycogen content. Ali of these changes were completely reversed by concomitant treatment with enalapril or losartan. L-NAME had no effect on the hepatic cholesterol and triglyceride content, nor did it affect the basal or drug-induced activities and protein expression of the cytochrome P450 isoforms. Short-term treatment with L-NAME enhanced the expression of MMP-2 and MMP-9 in vessel walls and inflammatory cells (mast cells, macrophages). These results show that acute or chronic treatment with L-NAME produces morphological alterations in the hepatic vasculature and increases the hepatic glycogen content without affecting lipid metabolism or the activity or expression of cytochrome P450 isoforms. The lack of effect on cytochrome P450 activities and expression indicates that these enzymes are not significantly influenced by low levels of NO. In contrast, the ability of enalapril and losartan to prevent the morphological alterations and the increase in hepatic glycogen indicates an important role for the renin-antiogensin system in these responses
Subject: Citocromo P-450
Glicogênio
Hipertrofia
Fígado
Óxido nítrico
Language: Português
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2006
Appears in Collections:IB - Tese e Dissertação

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