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Type: TESE
Degree Level: Doutorado
Title: Efeitos do consumo crônico de etanol sobre a atividade de MMP-2/MMP-9 e sobre o metabolismo do ácido retinóico nos lobos dorsais e laterais da próstata de ratos adultos = Effects of chronic ethanol consumption on the activity of MMP-2/MMP-9 and on retinoic acid metabolism in the dorsal and lateral prostate lobes of adult rats
Title Alternative: Effects of chronic ethanol consumption on the activity of MMP-2/MMP-9 and on retinoic acid metabolism in the dorsal and lateral prostate lobes of adult rats
Author: Fontanelli, Beatriz Aparecida Fioruci, 1985-
Advisor: Felisbino, Sérgio Luis
Abstract: Resumo: Pesquisadores têm mostrado que o consumo crônico de etanol altera a concentração do ácido retinóico, metabólito ativo da vitamina A, em muitos órgãos, incluindo a próstata. O ácido retinóico é essencial para o desenvolvimento normal da próstata e para a manutenção de sua homeostase. Alterações na concentração e no metabolismo do ácido retinóico estão relacionadas com o desenvolvimento de lesão na próstata. Adicionalmente, a atividade de metaloproteinases da matriz extracelular (MMPs), também está relacionada com o desenvolvimento de alterações na próstata. Assim, o presente trabalho teve por objetivo descrever os efeitos dos consumos, baixo e alto, de etanol sobre as proteínas envolvidas na síntese e no catabolismo do ácido retinóico (artigo I), bem como, sobre a atividade enzimática das MMPs (artigo II) nos lobos dorsais e laterais da próstata.Vinte ratos adultos (~ 90 dias de idade) de cada variedade, UChA e UChB, foram divididos nos grupos (n=10/grupo): UChA (consumo baixo de etanol, 0,2-2 g/kg/dia), UChAC (ratos que não consumiram etanol); UChB (consumo alto de etanol, > 2g/kg/dia), UChBC (ratos que não consumiram etanol).Após o período experimental (~ 150 dias de idade), os ratos foram eutanasiados por decapitação e os lobos dorsais e laterais das próstatas foram coletados e dissecados: (1) para avaliar os níveis e a localização das proteínas ALDH1A1, ALDH1A2, ALDH1A3, CYP26A1, CYP26B1, CYP2E1, através de western blot e imuno-histoquímica, bem como, a atividade catabólica das CYP26A1, CYP26B1, CYP2E1 por ensaio bioquímico e quantificação por HPLC-MS/MS; (2) e para avaliar a atividade da MMP-2 e da MMP-9, e os níveis dos inibidores teciduais de metaloproteinases (TIMP-1/ TIMP-2), através de zimografia e Elisa, respectivamente. No grupo UChA, a ALDH1A3 aumentou na próstata dorsal, enquanto as proteínas ALDH1A1 e ALDH1A2 diminuíram na próstata lateral. No grupo UChB, as proteínas ALDH1A1, ALDH1A2, e ALDH1A3 aumentaram na próstata dorsal, enquanto a ALDH1A3 diminuiu no lobo lateral. A concentração do ácido retinóico aumentou, indicando diminuição da atividade da CYP2E1, e diminuiu quando se avaliou a CYP26, indicando aumento de sua atividade na próstata dorsal do UChB. Além disso, o ácido retinóico diminuiu quando se avaliou a atividade de CYP total nos grupos experimentais, sendo somente aumentado na próstata lateral do UChA. O consumo baixo de etanol (grupo UChA) diminuiu a atividade das MMP-2 e MMP-9 e o nível das TIMP-2 e TIMP-1 na próstata lateral, enquanto que na próstata dorsal o etanol diminuiu a atividade de MMP-2 e o nível de TIMP-1. Por outro lado, no grupo UChB, o etanol diminuiu somente a atividade da MMP-9 na próstata lateral e não alterou os níveis de TIMP-1 e TIMP-2.Nossos resultados indicam que o etanol modula a síntese e o catabolismo do ácido retinóico na próstata do rato de modo dependente de sua concentração. Além disso, o consumo crônico e baixo de etanol diminui a atividade das metaloproteinases -2 e -9, sendo a próstata lateral o lobo afetado e, portanto, mais susceptível a estas alterações, do que o lobo prostático dorsal.

Abstract: Researchers have shown that chronic ethanol consumption alters the retinoic acid concentration, an active metabolite of vitamin A, in many organs including the prostate. The retinoic acid is essential for the normal development of prostate and for maintaining its glandular homeostasis. Changes in concentration and metabolism of retinoic acid are related to lesion development in the prostate. Additionally, the activity of matrix metalloproteinases (MMPs), also relates to development of alterations in prostate. Thus, this study aimed to describe the effects of low and high doses of ethanol consumption, on the proteins involved in the synthesis and catabolism of retinoic acid (Article I), as well as on the enzymatic activity of MMPs (Article II) the dorsal and lateral lobes of the prostate. Twenty adult rats (~ 90 days old) of each variety, UChA and UChB, were divided into groups (n = 10 / group): UChA (low ethanol consumption, 0.2-2 g /kg / day), UChAC (rats not consumed ethanol); UChB (high ethanol consumption, > 2 g/ kg/ day), UChBC (rats not consumed ethanol). After the experimental period (~ 150 days old), the rats were euthanized by decapitation and dorsal and lateral lobes of the prostates were collected and dissected: (1) for evaluate the levels and location of the proteins ALDH1A1, ALDH1A2, ALDH1A3, CYP26A1, CYP26B1, CYP2E1, by western blot and immunohistochemistry, as well as, catabolic activity of CYP26A1, CYP26B1, CYP2E1 by biochemical assay and quantification by HPLC¿MS/MS; (2) and to evaluate the activity of MMP-2 and MMP-9, and the levels of tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMP-1 / TIMP-2) using zymography and ELISA, respectively. In the UChA group, ALDH1A3 increased in dorsal prostate, while the proteins ALDH1A2 and ALDH1A1 decreased in the lateral prostate. In the UChB group, the proteins ALDH1A1, ALDH1A2 and ALDH1A3 increased in the dorsal prostate, while ALDH1A3 decreased in the lateral lobe. The concentration of retinoic acid increased, indicating a decrease in the CYP2E1 activity, and decreased when evaluated CYP26, indicating increased of CYP26 activity in the UChB dorsal prostate. Furthermore, the retinoic acid decreased when assessing the CYP total activity in the experimental groups, but only increased in the lateral prostate of UChA. The low ethanol consumption (UChA group) reduced the activities of MMP-2 and MMP-9 and the levels of TIMP-2 and TIMP-1 in the lateral prostate, while dorsal prostate the ethanol decreased the MMP-2 activity and the level of TIMP-1. On the other hand, in the UChB group, ethanol only decreased the activity of MMP-9 in the lateral prostate and did not alter the levels of TIMP-1 and TIMP-2. Our results indicate that ethanol modulates the synthesis and catabolism of retinoic acid in the rat prostate in a concentration-dependent manner. In addition, the chronic and low consumption of ethanol decreases the activity of metalloproteinases -2 and -9 in the lateral lobe prostate, showing that this organ is more susceptible to these changes than dorsal lobe prostate
Subject: Álcool
Prostata
Tretinoína
Metaloproteinases da matriz
Language: Multilíngua
Editor: [s.n.]
Citation: FONTANELLI, Beatriz Aparecida Fioruci. Efeitos do consumo crônico de etanol sobre a atividade de MMP-2/MMP-9 e sobre o metabolismo do ácido retinóico nos lobos dorsais e laterais da próstata de ratos adultos = Effects of chronic ethanol consumption on the activity of MMP-2/MMP-9 and on retinoic acid metabolism in the dorsal and lateral prostate lobes of adult rats. 2014. 61 f. Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/317953>. Acesso em: 27 ago. 2018.
Date Issue: 2014
Appears in Collections:IB - Tese e Dissertação

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