Please use this identifier to cite or link to this item: http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/317556
Type: TESE DIGITAL
Degree Level: Doutorado
Title: Prospecção de substâncias bioativas em Guatteria australis e Guatteria friesiana (Annonaceae) e avaliação do efeito biológico fotoinduzido para aplicação em terapia fotodinâmica antimicrobiana
Title Alternative: Prospecting of bioactive substances in Guatteria australis and Guatteria friesiana (Annonaceae) and evaluation of the biological effect photoinduced for use in photodynamic therapy antimicrobial
Author: Siqueira, Carlos Alberto Theodoro, 1965-
Advisor: Salvador, Marcos José, 1971-
Abstract: Resumo: Neste trabalho procedeu-se o estudo para a busca de substâncias bioativas em Guatteria australis e Guatteria friesiana (Annonaceae) e a avaliação do seu efeito biológico fotoinduzido para aplicação em Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (TFDA). Foi obtido o óleo essencial das folhas de G. australis e realizou-se sua análise por CG-EM, sendo identificadas 23 substâncias (96,64% dos constituintes do óleo), com o predomínio de sesquiterpenos (79,40%) e de monoterpenos (17,24%). Este óleo essencial apresentou in vitro atividade antimicrobiana e antiproliferativa frente à linhagens de células tumorais) e anti-inflamatória in vivo em modelo de pleurisia. O estudo fitoquímico biomonitorado dos extratos metanólicos bioativos possibilitou isolar e identificar quatro substâncias de G. australis (G1: palmatina, G2: lisicamina, G3: subsessilina e G4: liriodenina) e três substâncias de G. friesiana (G1: palmatina, G5: coripalmina e G6: 7,8-diidro-8-hidroxipalmatina). A investigação fotofísica dos extratos metanólicos, frações e das substâncias isoladas G1, G2 e G3 revelou perfis de absorção entre 350 a 500 nm e de 600-800 nm compatíveis com a região de trabalho da TFD. As análises fotoquímicas com a sonda 1,3-DPBF dos extratos metanólicos e frações das duas plantas estudadas são sugestivas da produção de oxigênio singlete, quando irradiados com Laser a 660 nm, o que não foi verificado quando irradiado com Led a 420 nm. Os alcalóides G1, G2 e G3 apresentaram decaimento da absorção da sonda 1,3-DPBF quando irradiados com Laser em 660 nm e G1 e G2 também quando irradiados com Led em 420nm, sendo estes resultados indicativos de produção de oxigênio singlete. No ensaio microbiológico in vitro de TFDA com o emprego de substâncias supressoras de espécies reativas excitadas e antioxidantes e irradiação com Led em 420 nm os resultados sugerem que o efeito fotobiológico ocorre devido à formação dos dois tipos de espécies radicalares: formação de oxigênio singlete (reação fotoquímica do tipo II) e formação de outras espécies de radicais livres (reação do tipo I). Nos ensaios de TFDA os extratos metanólicos e as frações alcaloidicas, em concentração sub-inibitória, das duas plantas estudadas mostraram capacidade de desencadear efeito in vitro antibacteriano e anti-fúngico fotoinduzido quando associadas à irradiação Led em 420 nm e Laser em 660 nm. Os alcalóides G1 e G3 em concentração sub-inibitória também apresentaram efeito antimicrobiano fotoinduzido frente a bactérias e fungos quanto associado à irradiação Led em 420 nm. Os resultados da atividade antiprotozoário mostraram que G1 e G2 reduziram a viabilidade de promastigotas de Leishmania (L.) amazonensis, com efeito biológico fotoinduzido, em concentração sub-inibitória, quando associado á irradiação Led em 420 nm. Nas mesmas condições experimentais de TFD, G1 e G2 também reduziram a percentagem de sobrevida de células de tecido conectivo NCTC (Clone 929), mas com efeito citotóxico fotoinduzido em 420 nm menor para NCTC, se comparado ao efeito frente às promastigotas. Ainda, os alcalóides G3 e G4, na ausência de irradiação, apresentaram atividade antiproliferativa frente a algumas linhagens de células tumorais e não foi detectada atividade citotóxica frente à linhagem não tumoral HaCat (queratinócitos humanos) até a maior concentração avaliada. O óleo essencial e os extratos metanólicos das folhas e dos galhos de G. australis, na dose de 300 mg/kg, reduziram a migração leucocitária e o extravasamento de proteínas do lavado intrapleural em modelo de pleurisia induzida por carragenina em camundongos, sendo estes resultados sugestivos de atividade anti-inflamatória. A continuidade dos estudos se faz necessária para se confirmar o potencial terapêutico destas amostras bioativas

Abstract: In this work carried out the study for the search of bioactive substances in Guatteria australis and Guatteria friesiana (Annonaceae) and evaluation of its biological photoinduced effect for application in Antimicrobial Photodynamic Therapy (TFDA). Was obtained essential oil from leaves of G. australis and, were identified by GC-MS analysis 23 substances (96.64% of the oil constituents), with the predominance of sesquiterpenes (79.40%) and monoterpenes (17.24%). This essential oil showed in vitro antimicrobial and antiproliferative activity against the tumor cell lines) and in vivo anti-inflammatory in model of pleurisy. In bioassay guided phytochemical study of methanol extracts was possible to isolate and identify four substances of G. australis (G1: palmatine, G2: lysicamine, G3: subsessiline and G4: liriodenine) and three substances G. friesiana (G1: palmatine, G5: coripalmine and G6: 7,8-dihydro-8-hydroxypalmatine). The photophysical study of methanolic extracts, fractions and pure compounds G1, G2 and G3 showed absorption profiles from 350 to 500 nm and 600-800 nm compatible with the working region of the TFD. Photochemical analysis with 1,3-DPBF probe of methanol extracts and fractions of the two plants studied are suggestive of production of singlet oxygen when irradiated with laser at 660 nm, which was not observed when irradiated with LED at 420 nm. The alkaloids G1, G2 and G3 showed absorption decay of 1,3-DPBF probe when irradiated with laser at 660 nm and G1 and G2 even when irradiated with 420nm LED and these results are indicate the singlet oxygen production. In in vitro TFDA microbiological assay with the use of excited species suppressors and antioxidants in the presence of Led irradiation at 420 nm the results suggest that the photobiological effect occurs due to the formation of both types of radical species: formation of singlet oxygen (type II photochemical reaction) and formation of other free radical species (type I photochemical reaction). In TFDA assays the methanol extracts and alkaloid fractions in sub-inhibitory concentration of the two studied plants showed ability to trigger in vitro photoinduced antimicrobial effect against bacterial and fungal both when associated with Led irradiation in 420 nm as well as with Laser irradiation in 660 nm. The G1 and G3 alkaloids in sub-inhibitory concentration also showed photoinduced antimicrobial effect against bacteria and fungi when associated with Led irradiation at 420 nm. The results of the antiprotozoal activity showed that G1 and G2 reduced the viability of Leishmania (L.) amazonensis, with photoinduced biological effect in sub-inhibitory concentration, when associated to Led irradiation at 420 nm. In the same PDT experimental conditions, G1 and G2 also reduced the percentage of survival NCTC connective tissue cells (Clone 929), but with cytotoxic photoinduced effect less for the NCTC (clone 929) when compared to the promatigotes of L. amazonensis. Moreover, G3 and G4, in the absence of irradiation showed antiproliferative activity against some tumor cell lines, and was not detected cytotoxic activity against tumor cell line HaCat not (human keratinocytes) to the highest concentration evaluated. The essential oil and methanol extracts of leaves and twigs G. australis, at a dose of 300 mg/kg reduced the leukocyte migration and extravasation of the protein in pleural lavage in carrageenan-induced pleurisy in mice model. These results suggest possible anti-inflammatory activity for these samples. A further study is needed to confirm the therapeutic potential of these bioactive samples
Subject: Fotoquimioterapia
Guatteria
Annonaceae
Bioensaios
Fitoquímicos
Plantas - Compostos bioativos
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2015
Appears in Collections:IB - Tese e Dissertação

Files in This Item:
File SizeFormat 
Siqueira_CarlosAlbertoTheodoro_D.pdf8.81 MBAdobe PDFView/Open


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.