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Type: TESE DIGITAL
Title: Investigação microbiológica, condições de crescimento e potencial metabólico para a busca de produtos naturais bioativos no fungo endofítico Cladosporium sp. (AC-1) isolado de Annona cacans (Annonaceae)
Title Alternative: Microbiological investigation, growth condition, and metabolic potential for research of biactive natural products on endophytic fungi Cladosporium sp (AC-1) isolated of Annona cacans (Annonaceae)
Author: Hernández Tasco, Alvaro José, 1991-
Advisor: Salvador, Marcos José, 1971-
Abstract: Resumo: Este trabalho teve por objetivo investigar parâmetros microbiológicos, condições de crescimento e o potencial metabólico, vizando a busca de produtos naturais bioativos do fungo endofítico AC-1 isolado de Annona Cacans (Annonaceae). O isolamento e a identificação do fungo AC-1 foram realizados empregando analises microbiológicas convencionais incluindo morfologia macroscópica e microscopica e a região do ITS do DNA ribosomal, sendo os resultados sugestivos que o fungo endofítico AC-1 pertence ao gênero Cladosporium spp., especificamente C. cladosporioides. Para a extração dos metabolitos secundários foram usadas diferentes fontes nutricional e como solvente extrator o acetato de etila (AcOEt). A produção de metabólitos micromoleculares destes extratos foi investigada por CG-MS, CLAE-UV/DAD-MS, ESI-MS/MS e UHPLC-MS e sua potencialidade em relação atividade antimicrobiana (frente a bactérias e espécies de Candida spp) e antioxidante (métodos DPPH e ORAC-FL) foi avaliada. Para a ampliação da escala, fracionamiento, isolamento e identificação de substâncias bioativas foi selecionado o extrato proveniente do meio de YM (extrato com melhores resultados em termos de atividade e de rendimento em massa). Para o isolamento e identificação, como resultado foi identificada uma substância pura o ácido trans-cinâmico (substância 1) e de duas substâncias identificadas em mistura, as dicetopiperazinas Rel.ciclo(Pro-Ile) (substância 2) e Rel.ciclo(Pro-Phe) (substância 3), sendo que outras frações purificadas ainda se encontram em analise por RMN. Ainda foram identificadas m/z que sugerem a possibilidade da presença de substâncias como a asimilobina, anonaina, liriodenina, ácido cumárico e o ácido cinâmico já reportadas em espécies de Annona spp. e cladosporol B, cladosporol D, cladosporina, recifeiolide e ácidos graxos já documentadas em fungos do gênero Cladosporium. Os extratos brutos e as frações apresentaram resultados promissores nos ensaios antimicrobiano e antioxidante, sendo identificadas substâncias com comprovada atividade antimicrobiana e antioxidante, incluindo a anonaina, asimilobina, o ácido trans-cinâmico e as dicetopiperazinas 2 e 3. A continuidade das investigações químicas e biológicas se faz necessária para se confirmar os resultados obtidos e melhor avaliar o potencial biotecnológico deste microorganismo endofítico

Abstract: This study aimed to investigate microbiological parameters, growth conditions and the metabolic potential, aiming the search for bioactive natural products of endophytic fungus AC-1 isolated from Annona Cacans (Annonaceae). The isolation and identification of fungus AC-1 were performed using conventional microbiological analysis focusing on the macroscopic and microscopic morphology and ITS region of the ribosomal DNA, being suggestive results that the fungus endophyte AC-1 belongs to the genus Cladosporium sp., specifically C. cladosporioides. For the extraction of secondary metabolites were used sources nutricionales different and as extracting solvent is ethyl acetate (EtOAc). The production micromolecular metabolites of these extracts was investigated by GC-MS, HPLC-UV/DAD, ESI-MS/MS and UHPLC-MS and evaluated their potential as the antimicrobial activity (against bacteria and species Candida spp) and antioxidant (DPPH methods and ORAC-FL) for the expansion of the scale, fraccionamiento, isolation and identification of bioactive substances is selected from the extract through YM medium (extract with the best results in terms of activity and in mass yielded). For the isolation and identification as a result a pure substance was identified trans-cinnamic acid (substance 1) and two substances identified as a mixture, the Rel.cyclediketopiperazine (Pro-Ile) (substance 2) and Rel.cycle (Pro-Phe) (substance 3), whereas other purified fractions are still being analyzed by NMR. Also were identified m/z suggesting the possibility of the presence of asimilobina, anonaina, liriodenine, coumaric acid and cinnamic acid that have been reported in species of Annona spp. and cladosporol B, cladosporol D, cladosporina, recifeiolide and fatty acids that have been documented in fungi species of the Cladosporium. The extracts and fractions showed promising results in the antimicrobial and antioxidant assays and were identified substances with proven antimicrobial and antioxidant activities, including anonaine, asimilobine, trans-cinnamic acid and the diketopiperazines 2 and 3. The continuity of chemical and biological research is necessary aiming to confirm these results and evaluate the best biotechnological potential of this endophytic microorganism
Subject: Fungo endofítico
Annona cacans
Metabolitos
Cladosporium cladosporioides
Produtos naturais
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2016
Appears in Collections:IB - Tese e Dissertação

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