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Type: TESE
Degree Level: Doutorado
Title: Desenvolvimento de sistema in vitro e identificação de genes preferencialmente expressos no processo de lignificação em Eucalyptus globulus
Title Alternative: Development of in vitro system for identification of preferentially expressed genes during the lignification process in Eucalyptus globulus
Author: Araujo, Pedro, 1985-
Advisor: Mazzafera, Paulo, 1961-
Abstract: Resumo: Eucalyptus globulus é amplamente cultivado devido à alta produção de celulose, fibras pouco densas e flexíveis, tornando-se industrialmente vantajoso. A lignina é fundamental para o desenvolvimento das plantas superiores, pois confere resistência mecânica, hidrofobicidade do xilema e facilita o transporte de água ao longo do vegetal. A biossíntese da lignina ocorre a partir de três precursores formados na via dos fenilpropanoides e, posteriormente incorporados: p-hidroxifenil (H), guaiacil (G) e siringil (S). Na última etapa da biossíntese de lignina temos as enzimas peroxidases de classe III que exercem papel fundamental. A tese foi divida em quatro capítulos. O Capítulo I aborda a caracterização de genes de referência que podem ser utilizados para a normalização de dados de PCR em tempo real para Eucalyptus sob diferentes tipos de tratamentos ¿ estresses abióticos. Duas abordagens foram utilizadas para o cálculo do gene mais estável e, dentre as análises realizadas, três genes se destacaram aos demais, independentemente do tratamento proposto: IDH, SAND e ACT. No Capítulo II, é descrito uma condição in vitro que propicia acúmulo diferencial de lignina em Eucalyptus globulus. Desse modo, identificamos duas peroxidases de classe III que eram preferencialmente induzidas com o acúmulo de lignina¿ EglPrx121 e EglPrx122. O Capítulo III descreve parcialmente uma peroxidase de classe III induzida no escuro. Experimentos de microdisecção e hibridização in situ corroboram a hipótese de que esse gene possa estar relacionado com a deposição de lignina em Eucalyptus globulus. Por fim , o Capítulo IV descreve um abordagem inédita na utilização de espectrometria de massas acoplada a um sistema de imagem na caracterização de precursores de lignina ¿ unidades S e G que são amplamente utilizados na caracterização de plantas quanto a recalcitrância.. Esses trabalhos podem servir de base para estudos posteriores envolvendo biologia molecular básica para arbóreas e caracterização de madeira e suas propriedades

Abstract: Eucalyptus globulus is widely cultivated due pulp content, low flexible and density fibers, becoming industrially advantageous . Lignin is essential for the development of higher plants, confers mechanical strength, xylem hydrophobicity and facilitates water transport through the plant. The biosynthetic lignin pathway occurs from three precursors and subsequently incorporated as: p- hydroxyphenyl (H), guaiacyl (G), and syringyl (S). The last step have class III peroxidases playing a key role. The thesis is divided into four chapters. Chapter I, characterization of reference genes which may be used for qPCR normalization for Eucalyptus under different treatments - abiotic stresses . Two approaches were used to calculate the most stable gene and we selected three genes, regardless of the proposed treatment: IDH, SAND and ACT. In Chapter II , is described in vitro condition that promotes differential accumulation of lignin in Eucalyptus globulus. We identified two class III peroxidases that were preferentially induced with the accumulation of lignin - EglPrx121 and EglPrx122. Chapter III describes one class III peroxidase induced in the dark condition. Microdissection and in situ hybridization support the hypothesis that this gene might be related to the deposition of lignin in Eucalyptus globulus. Finally , Chapter IV describes a novel approach for mass spectrometry coupled to an imaging system for the characterization lignin precursors - S and G units which are widely used to correlate plants and their recalcitrance. These thesis can be used for further studies involving basic molecular biology to characterize tree and wood properties
Subject: Lignina
Peroxidase
Eucalyptus globulus
Language: Multilíngua
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2014
Appears in Collections:IB - Tese e Dissertação

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