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Type: TESE DIGITAL
Title: Estudo da ação da temozolamida e sulfasalazina sobre células de glioblastoma humano e de glioma de rato
Title Alternative: Study of temozolomide and sulfasalazine action on human glioblastoma and rat glioma cells
Author: Ignarro, Raffaela Silvestre, 1987-
Advisor: Rogério, Fábio, 1977-
Abstract: Resumo: Gliomas são os tumores cerebrais mais comuns em adultos. Astrocitomas são gliomas derivados de astrócitos. Temozolamida (TMZ) é um agente alquilante do DNA usado para tratamento de astrocitomas de comportamento biológico agressivo. Apesar da melhora do prognóstico, em comparação com os pacientes submetidos apenas à radioterapia, o tratamento com TMZ apresenta eficácia limitada, visto que alguns tumores apresentam resistência a esta droga. Os astrócitos neoplásicos possuem um transportador (sistema Xc-) na membrana citoplasmática, o qual importa cistina para a síntese do antioxidante glutationa. O sistema Xc- pode ser inibido farmacologicamente pela sulfasalazina (SAS). No presente estudo, avaliamos abordagem terapêutica que consiste na administração in vitro de TMZ associada com SAS em três linhagens de astrocitoma humano (U87MG, A172 e T98G) e uma linhagem de glioma de rato (C6). Os parâmetros avaliados foram viabilidade celular, morte por apoptose, capacidade de proliferação e invasão, expressão gênica, níveis de glutationa total e peroxidação lipídica. As metodologias adotadas foram, respectivamente, ensaio colorimétrico (MTT), reação de TUNEL quantificada por citometria de fluxo, Western Blotting para a proteína PCNA, atividade enzimática de metaloproteinases 2 e 9 (MMP2 e MMP9), PCR em tempo real e transcriptoma, método de reciclagem da glutationa e TBARS. Verificamos que as quatro linhagens não apresentaram alterações significativas de viabilidade após tratamento com TMZ 25 µM ou 50 µM por 1, 3 ou 5 dias. Por outro lado, a associação de TMZ 25 µM com SAS 0.5 mM após 5 dias levou à queda significativa de viabilidade tanto na linhagem U87MG, quanto nas células A172....Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital

Abstract: Gliomas are the most common brain tumors in adults. Astrocytomas are gliomas derived from astrocytes. Temozolomide (TMZ) is an alkylating agent of the DNA used for treatment of astrocytomas with aggressive behavior. Despite the improvement of prognosis compared to patients subjected to radiotherapy alone, treatment with TMZ has limited effectiveness, since some tumors are resistant to this drug. Neoplastic astrocytes have a transporter in the cytoplasmic membrane (Xc- system), which imports cystine for the synthesis of the antioxidant glutathione. The Xc- system can be inhibited pharmacologically by sulfasalazine (SAS). In the present study, we evaluated an therapeutic approach in vitro that consists in TMZ administration associated with SAS in three lineages of human astrocytoma (U87MG, T98G and A172) and a rat glioma cell line (C6). We assessed cell viability, death by apoptosis, proliferation and invasion capacity, differential gene expression, the total glutathione levels and lipid peroxidation.The adopted methodologies were, respectively, colorimetric assay (MTT), TUNEL reaction quantified by flow cytometry, Western blot for PCNA protein, enzymatic activity of metalloproteinases 2 and 9 (MMP2 and MMP9), real time PCR and transcriptome, recycling method of glutathione and TBARS. We found that the four cell lines showed no significant changes in viability after treatment with TMZ 25 µM or 50 µM for 1, 3 or 5 days. On the other hand, the combination of 25 µM TMZ with SAS 0.5 mM after 5 days led to a significant decrease in viability in both U87MG and A172 lineages...Note: The complete abstract is available with the full electronic document
Subject: Astrocitoma
Temozolamida
Sulfassalazina
Sobrevivência celular
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2016
Appears in Collections:IB - Tese e Dissertação

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