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Type: TESE DIGITAL
Degree Level: Doutorado
Title: Involvement of prolactin in the prevention of pancreatic beta cell dysfunction and death induced by proinflammatory cytokines = Envolvimento da prolactina na prevenção da disfunção e morte de células beta pancreáticas induzidas por citocinas pró-inflamatórias
Title Alternative: Envolvimento da prolactina na prevenção da disfunção e morte de células beta pancreáticas induzidas por citocinas pró-inflamatórias
Author: Nardelli, Tarlliza Romanna, 1989-
Advisor: Boschiero, Antonio Carlos, 1943-
Abstract: Resumo: Citocinas pró-inflamatórias (CYT) contribuem para a morte de célula beta, em parte, via ativação de NF-?B. A Prolactina (PRL) tem sido descrita por proteger essas células contra apoptose induzida por CYT. Portanto, nesse trabalho nós investigamos o potencial efeito protetor da PRL sobre a morte de célula beta induzida por CYT e os mecanismos envolvidos nessa proteção. Células INS-1E tratadas por 24 h com PRL (0.5 ?g/ml) ou veículo, seguida da exposição à IL-1? (10 U/ml) ou TNF-? (1600 U/ml) combinadas com IFN-? (100 U/ml) foram usadas para viabilidade celular, análise da expressão gênica e protéica e atividade de NF-?B. Análises estatísticas foram feitas por teste t ou ANOVA, seguida de Bonferroni. p< 0,05 foi adotado como critério de significância, (n=4-6). Tanto IL-1?+IFN-? quanto TNF-?+IFN-? aumentaram a apoptose em células INS-1E, o que foi parcialmente prevenido pela PRL. A proteção induzida pela PRL é, ao menos em parte, mediada pela STAT3, pois esse efeito benéfico foi perdido com a inibição dessa proteína. Além disso, a PRL promoveu a modulação diferencial das proteínas anti e pró-apoptóticas da família BCL-2, induzindo um aumento da expressão de BCL-XL e reduzindo a expressão de proteínas pró-apoptóticas PUMA e bim-s, reguladas pela via JNK/c-JUN/DP5, a qual é induzida por CYT. A ativação de NF-?B bem como a expressão de seus genes alvo foram reduzidas pela adição de PRL, indicando que a PRL tem um papel na modulação da inflamação induzida por CYT em células beta. Dessa forma, observamos que a PRL exerce um efeito protetor sobre morte de célula beta induzida por CYT. Isso é mediado, pelo menos em parte, pela ativação de STAT3, modulação de proteínas pró e anti-apoptóticas e redução da ativação de NF-?B

Abstract: Type I diabetes is caused by an autoimmune assault that induces progressive ?-cell dysfunction and apoptosis. Pro-inflammatory cytokines (CYT) such as interleukin-1? (IL-1?), tumor necrosis factor-? (TNF-?) and interferon-? (IFN-?), contribute to ?-cell death, at least partly via activation of the transcription factor nuclear factor-?B (NF-?B). Prolactin (PRL) is an important mediator for the increase of ?-cell mass and has been reported to protect insulin-producing cells against CYT-induced apoptosis. We have presently investigated the potential protective effects of PRL against cytokine-induced ?-cell death and the mechanisms involved in this protection. Cell viability, NO measurement and protein expression in INS-1E cells were performed after a 24 h pretreatment with PRL (0.5?g/mL) or vehicle and subsequent 24 h exposure to IL-1? (10 U/mL) or TNF-? (1600 U/mL) in combination with IFN-? (140 U/mL), with or without the knockdown of STAT3. INS-1E cells exposed to IL-1?+IFN-? were also used for western blot and NF-?B promoter reporter assay in time course studies. Comparisons between groups were carried out either by unpaired t test or ANOVA followed by Bonferroni correction. A P value <0.05 was considered significant (n=4-6). After 24 h exposure, both IL-1?+IFN-? and TNF-?+IFN-? increased apoptosis by 1.5-fold in INS-1E cells. This was partially prevented by PRL (30%). The protection induced by PRL is, at least partly, mediated by STAT3, since it was almost abolished when STAT3 was inhibited by two specifics siRNA. Importantly, PRL also decreases JNK phosphorylation and modulates expression of anti- and pro-apoptotic proteins involved in JNK cascade by decreasing the expression of both p-c-JUN and dp5, and increasing BCL-XL expression. These signals converge to decrease PUMA expression and potentially beta cell loss. Moreover, PRL partially prevents the activation of NF-?B, affecting the expression of its target genes, which are involved in both, beta cell death and inflammation. Thus, PRL exerts a protective effect against CYT-induced ?-cell death. This is mediated at least in part via STAT3 activation, differential modulation of anti and pro-apoptotic proteins of BCL-2 family and decreased activation of NF-?B
Subject: Diabetes Mellitus
Células secretoras de insulina
Citocinas
Prolactina
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2015
Appears in Collections:IB - Tese e Dissertação

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