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Type: TESE
Title: Correlação entre criterios morfologicos, citologicos e histologicos e presença do DNA do papilomavirus humano em biopsias cervicais uterinas detectado por meio da tecnica de reação em cadeia da polimerase
Author: Salvia, Paulo Newton Danzi
Advisor: Andrade, Liliana Aparecida Lucci de Angelo, 1951-
Abstract: Resumo: O Papilomavírus Humano (HPV) está associado à neoplasia intraepitelial cervical uterina (NIC) e desempenha importante papel na carcinogênese. Diferenças subjetivas freqüentemente levam a discordâncias entre os examinadores quanto ao diagnóstico citológico e histológico de infecção pelo HPV, o que pode resultar em mudança na conduta terapêutica. O objetivo foi testar os critérios histológicos e citológicos utilizados para diagnóstico do HPV na cérvice uterina, comparando-os à presença do DNA viral detectado por PCR. Pela triagem citológica, 107 mulheres que apresentaram atipia foram submetidas à colposcopia, quando novas amostras foram coletadas para citologia e PCR e imagens suspeitas biopsiadas. Foi realizada PCR com ¿primers¿ MY09/11 e GP05/06+ e beta-globina amplificada como controle. Foram selecionadas 101 amostras para análise citológica (excluídas seis por artefatos de fixação) e realizadas 61 biópsias. A extração do DNA não foi possível em oito casos. Os critérios estudados na histologia foram paraceratose, acantose, atipia coilocitótica, binucleação, disceratose, mitose e número de mitoses; e na citologia, halo claro perinuclear, cromatina irregularmente distribuída, hipercromatismo nuclear, perda da relação núcleo-citoplasmática, contorno nuclear irregular, bi-multinucleação (em células superficiais e imaturas), fila indiana e formação sincicial com atipia (somente em células imaturas) e disceratose. Os diagnósticos histológicos foram: 11 cervicites crônicas (CC); 36 NIC (13 NIC I ; 10 NIC II; 13 NIC III) e 14 sugestivos para HPV (SHPV). O HPV foi encontrado em 37,5% das CC, 77,4% das NIC (91,7% das NIC I, 66,7% das NIC II e 70% das NIC III) e em 64,3% dos SHPV. Dentre os critérios histológicos, os que mais se correlacionaram ao HPV foram atipia coilocitótica (VPP = 72,7%) e binucleação (VPP = 77,1%), porém, com baixa especificidade, 29,4% e 52,9% respectivamente. Em conjunto, atipia coilocitótica, disceratose e binucleação apresentaram VPP de 72,4%, podendo ser utilizadas como marcadores de infecção pelo HPV, devendo, porém, ser considerado que há uma chance aproximada de 27,6%. de um resultado falso positivo. Dentre os critérios citológicos associados a células imaturas para detectar NIC III histológica, formação sincicial com atipia obteve o maior VPP (69,2%), seguida de cromatina irregularmente distribuída (62,5%). Os VPNs para HPV-DNA dos critérios estudados das células superficiais ou imaturas foram baixos, ao redor de 40% e os VPPs, relativamente elevados, variando entre 50% e 93,9% (superficiais) e entre 76,9% e 100% (imaturas), sendo os maiores, fila indiana (VPP = 100%) e halo claro perinuclear em células superficiais (VPP = 93,9%). Portanto, diante do aparecimento de um destes critérios, pode ser inferida, razoavelmente, a infecção pelo HPV. Houve concordância intermediária na detecção do HPV-DNA entre os dois pares de ¿primers¿ (Kappa = 0,4972). O par de ¿primers¿ GP5+/GP6+ detectou DNA de HPV em 63% das amostras que permitiram amplificação. Com o par MY09/11, foram detectadas 36% de amostras positivas. Destas, destacaram-se os tipos de HPV por RFLP em 71,9% dos casos, sendo o HPV 16 o mais freqüente (40,6%)

Abstract: Human papillomavirus (HPV) is associated to uterine cervical intraepithelial neoplasia (CIN) and has an important role in cevical cancer. Subjective differences in evaluation lead to disagreement among examiners in relation to the cytological and histological diagnosis of HPV infection, which can lead to changes in clinic manegement. The aim of the present study was to test the histological and cytological criteria used for detection of HPV in uterine cervix, by comparing to the presence of viral DNA as detected by PCR. By cytological screening, 107 women with atypia were submitted to colposcopy, when new samples were collected for cytology and PCR and suspicious images were biopsied. The PCR assay was performed with primers MY09/11 and GP05/06+ and, as control, beta-globin was amplified. For cytological analysis, 101 samples were selected (6 excluded due to fixation artifacts) and 61 biopsies taken. DNA extraction was not possible in 8 cases. Parakeratosis, acanthosis, koilocytotic atypia, binucleation, dyskeratosis and number of mitoses were assessed histologically; and clear perinuclear halos, irregularly distributed chromatin, hyperchromatic nuclei, increased nuclear-cytoplasmic ratio, irregular nuclear outline, binucleation (in superficial and immature cells), indian files, formation of syncytia with atypia (in immature cells only) and dyskeratosis were examined in cytological preparations. The histological diagnoses were: 11 chronic cervicitis (CC); 36 CIN (13 CIN I; 10 CIN II; 13 CIN III) and 14 suggestive of HPV (SHPV). HPV was found in 37.5% of CC, 77.4 % of CIN (91.7% of CIN I, 66.7% of CIN II and 70% of CIN III) and 64.3% of SHPV. Among the histological criteria, the most highly correlated to HPV were koilocytotic atypia (positive predictive value or PPV = 72.7%) and binucleation (PPV = 77.1%). However, specificity was low: 29.4% and 52.9% respectively. Taken together, koilocytotic atypia, dyskeratosis and binucleation showed PPV of 72.4%. They could be used as markers of HPV infection, but false positive results were found in 27.6%. Among cytological criteria associated to immature cells for detection of CIN III, formation of syncytia with atypia had the highest PPV (69.2%), followed by irregularly distributed chromatin (62.5%). The negative predictive values (NPV) for HPV-DNA involving superficial or immature cells were low (about 40%). PPV were relatively high, ranging from 50% to 93.9% (superficial cells) and from 76.9% to 100% (immature cells). The highest were indian files (PPV=100%) and clear perinuclear halos in superficial cells (PPV=93.9%). HPV infection can be considered positive when one of these criteria is found. There was partial concordance in the detection of HPV-DNA among pair of primers (Kappa=0.4972). The pair of primers GP5+/GP6+ detected HPV-DNA in 63% of samples, in which amplification was permitted, while primers MY 09/11 detected 36%. In the latter, it was possible to identify HPV type in 71.9% of the cases using restriction fragment length polymorphisms , HPV 16 being the most frequent (40.6%)
Subject: Biópsia
Citologia
Morfologia
Reação em cadeia da polimerase
DNA
Language: Português
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2004
Appears in Collections:FCM - Tese e Dissertação

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