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Type: DISSERTAÇÃO DIGITAL
Degree Level: Mestrado
Title: Envolvimento de metaloproteinases nas respostas cardiovasculares à peçonha de Bothrops alternatus em ratos anestesiados = Involvement of metalloproteinases in cardiovascular responses to the venom of Bothrops alternatus in anesthetized rats
Title Alternative: Involvement of metalloproteinases in cardiovascular responses to the venom of Bothrops alternatus in anesthetized rats
Author: Inoue, Bruna Ramos, 1982-
Advisor: Hyslop, Stephen, 1964-
Abstract: Resumo: Neste trabalho, investigamos o envolvimento de metaloproteinases nas alterações hemodinâmicas provocadas pela peçonha da serpente Bothrops alternatus (urutu) em ratos machos Wistar anestesiados. Os ratos foram injetados por via intravenosa (i.v.) com peçonha nas doses de 0,4 mg/kg (não letal) ou 0,5 mg/kg (letal) na ausência e presença de pré-tratamento com doxiciclina (DOX; 30 mg/kg, i.v., 20 min antes da peçonha); em outros protocolos, a peçonha foi pré-incubada (1 h, temperatura ambiente) com doxiciclina (10 mM), fenantrolina (20 mM ou 30 µM) ou EDTA (30 µM) antes da injeção. A peçonha sozinha causou hipotensão nos primeiros 15 min, com retorno gradual aos valores basais nos 45 min seguintes; não houve alteração nas frequências cardíaca e respiratória e todos os ratos sobreviveram até 120 min após o envenenamento. Já a dose de 0,5 mg/kg causou hipotensão acentuada irreversível, bradicardia marcante e queda na respiração, com morte em ~10 min. O pré-tratamento com DOX atenuou a hipotensão significativamente nos primeiros 15 min com a dose menor de peçonha, e protegeu completamente contra as alterações hemodinâmicas causadas pela dose maior, além de impedir a morte dos ratos. Um perfil de respostas semelhante foi observado quando a peçonha foi pré-tratada com a DOX antes de ser injetada. De modo semelhante à DOX, a pré-incubação da peçonha com fenantrolina ou EDTA protegeu os ratos contra os efeitos da dose maior (hipotensão, bradicardia e morte), porém a queda na pressão nos primeiros 15 min não foi tão atenuada quanto com a DOX. Não houve alteração na atividade plasmática das metaloproteinases de matriz (MMP) -2 e -9 nos 30 min após o envenenamento com a dose menor e nos 10 min até a morte com a dose maior. Apenas a dose maior de peçonha causou trombose intravascular pulmonar significativa (~12% dos vasos afetados), principalmente em vasos menores. Esta trombose foi significativamente inibida em ratos pré-tratados com a DOX. Em vasos isolados a peçonha causou relaxamento dependente do endotélio (83±6,7% com 15 µg/ml em artéria mesentérica superior e 41±6,8% com 50 µg/ml em artéria pulmonar esquerda). Estes resultados indicam que as metaloproteinases da peçonha exercem papel importante na hipotensão causada pela peçonha de B. alternatus. Palavras-chave: Veneno de serpente, Bothrops alternatus, metaloproteinases de matriz , metaloproteinases de veneno de serpentes, inibidores de metaloproteinases

Abstract: In this work, we investigated the involvement of metalloproteinases in the hemodynamic alterations caused by Bothrops alternatus (urutu) snake venom in anesthetized male Wistar rats. Rats were injected intravenously (i.v.) with venom doses of 0.4 mg/kg or 0.5 mg/kg with or without pre-treatment with doxycycline (DOX; 30 mg/kg, i.v., 20 min before venom). In some protocols, venom was preincubated (1 h, room temperature) with 10 mM doxycycline, 20 mM or 30 ?M phenanthroline or 30 ?M EDTA before injection. Venom (0.4 mg/kg) caused hypotension within 15 min followed by a gradual return to basal values over the next 45 min; there were no changes in heart rate or respiratory rate and all rats survived for 120 min after envenomation. A venom dose of 0.5 mg/kg caused marked irreversible hypotension, bradycardia and respiratory failure, with the rat dying within 10 min. Pre-treatment of rats with DOX attenuated the hypotension caused by the non-lethal dose of venom in the first 15 min and completely protected the rats against the hemodynamic alterations associated with the lethal dose, in addition to preventing death of the rats. A similar profile of responses was obtained when venom was pre-incubated with DOX prior to injection. As with DOX, pre-incubation of venom with phenanthroline or EDTA protected the rats against the effects (hypotension, bradycardia, respiratory failure and death) of the lethal dose of venom, although the hypotension in the first 15 min was attenuated to a lesser extent than with DOX. There were no changes in plasma activities of matrix metaloproteinases (MMP) -2 and -9 in the 30 min after the non-lethal dose of venom or in the 10 min after the lethal dose. Significant intravascular pulmonary thrombosis was seen only with the higher dose of venom (~12% of vessels affected), principally in small caliber vessels. This thrombosis was significantly attenuated in rats pre-treated with DOX. In isolated blood vessels, venom caused endothelium-dependent relaxation (83±6.7% with 15 µg/ml in superior mesenteric artery and 41±6.8% with 50 µg/ml in left pulmonary artery). These results indicate that venom metalloproteinases have an important role in the hemodynamic alterations caused by B. alternatus venom. Keyword: Snake venoms, Bothrops alternatus, matrix metalloproteinases, snake venom metalloproteinases, metalloproteinase inhibitors
Subject: Venenos de serpentes
Bothrops alternatus
Metaloproteinases da matriz
Serpentes
Inibidores de proteases
Inibidores de metaloproteinases de matriz
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2015
Appears in Collections:FCM - Tese e Dissertação

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