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Type: Artigo de periódico
Title: Purification and characterization of a phytoalexin elicitor from spores of the saprobe Mucor ramosissimus
Title Alternative: Purificação e caracterização de um eliciador de fitoalexinas de esporos do fungo sapróbio Mucor ramosissimus
Author: Simões, Kelly
Dietrich, Sonia M.C.
Hahn, Michael G.
Braga, Marcia R.
Abstract: Plants accumulate antimicrobial compounds (phytoalexins) in response to a wide variety of microorganisms. Mucor ramosissimus Samutsevitsch is a saprobe capable of inducing phytoalexin production in soybean cotyledons and in the leaves of tropical Rubiaceae on whose surface it has been found. In the present study, the elicitor from M. ramosissimus was partially purified and the activity compared to that of a glucan elicitor isolated from Phytophthora sojae. Optimal isolation of the elicitor (based on fungal growth, yield of spores and elicitor activity) was achieved by autoclaving spores obtained from nine day-old cultures of the fungus. The elicitor was precipitated with ethanol and purified by chromatography on an anion exchange column, which retained the elicitor, and a Concanavalin A-affinity matrix, to which the elicitor did not bind. The purification resulted in a considerable increase (six-fold) in the specific activity of the elicitor. Neutral sugar composition, analyzed by HPLC, revealed the predominance of mannose, followed by glucose and galactose, whereas colorimetric quantification showed the presence of uronic acids. GC-MS analysis of the elicitor revealed the predominance of glucuronic acid and mannose. These results suggest that fragments of mucoran-type polysaccharides are the phytoalexin elicitors present in the spores of the saprobe M. ramosissimus. Our results also indicate for the first time that soybean cotyledon tissues can recognize fragments of glucuronic-acid heteropolymers as phytoalexin elicitors.
Plantas acumulam compostos antimicrobianos (fitoalexinas) em resposta a uma grande variedade de microorganismos. Mucor ramosissimus Samutsevitsch é um fungo sapróbio capaz de induzir a produção de fitoalexinas em soja e em Rubiaceae nativas, sobre a superfície das quais ele é encontrado. Neste estudo, o eliciador de esporos de M. ramosissimus foi parcialmente purificado e sua atividade comparada ao glucano isolado de Phytophthora sojae. O ótimo de isolamento do eliciador (baseado no crescimento do fungo, no rendimento dos esporos e na atividade eliciadora) foi obtido a partir de esporos autoclavados de culturas do fungo com nove dias de idade. O eliciador foi precipitado com etanol e purificado por cromatografia de troca iônica, a qual reteve o eliciador, e por uma matriz de afinidade em Concanavalina-A, à qual o eliciador não se ligou. A purificação resultou em considerável aumento (seis vezes) de atividade específica do eliciador. Análises de açúcares neutros por HPLC revelaram a predominância de manose, seguida de glucose e galactose, enquanto que a quantificação por colorimetria mostrou a presença de ácidos urônicos. Análises do eliciador por GC-MS indicaram a predominância de ácido glucurônico e manose. Esses resultados sugerem que fragmentos de um polissacarídeo do tipo mucorano são os eliciadores de fitoalexinas presentes nos esporos de M. ramosissimus. Os resultados também indicam, pela primeira vez, que os tecidos de cotilédones de soja reconhecem fragmentos de heteropolímeros de ácidos urônicos como eliciadores de fitoalexinas.
Subject: eliciador
fitoalexinas
fungo sapróbio
Mucor ramosissimus
mucorano
soja
elicitor
Mucor ramosissimus
mucoran
phytoalexin
saprobe fungus
soybean
Editor: Sociedade Botânica de São Paulo
Rights: aberto
Identifier DOI: 10.1590/S0100-84042005000400008
Address: http://dx.doi.org/10.1590/S0100-84042005000400008
http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-84042005000400008
Date Issue: 1-Dec-2005
Appears in Collections:Unicamp - Artigos e Outros Documentos

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