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Type: DISSERTAÇÃO DIGITAL
Degree Level: Mestrado
Title: Avaliação do envolvimento das células microgliais na indução e persistência da hipernocicepção inflamatória induzida pela artrite reumatóide na ATM de ratos : Evaluation of microglial cells involvement in induction and persistence of inlfammatory hypernociception induced by rheumatoid arthritis in rats TMJ
Title Alternative: Evaluation of microglial cells involvement in induction and persistence of inlfammatory hypernociception induced by rheumatoid arthritis in rats TMJ
Author: Bonfante, Ricardo, 1991-
Advisor: Clemente-Napimoga, Juliana Trindade, 1978-
Abstract: Resumo: A articulação temporomandibular (ATM) é afetada em 65% dos pacientes com artrite, e a dor é a queixa principal, especialmente durante o movimento e função. As células microgliais responsáveis pela imunidade inata no sistema nervoso central estão relacionadas como fator importante na indução e manutenção de distúrbios sensoriais seguidos por desordens neuronais ou lesão do tecido periférico ou provocados por doenças crónicas, tais como artrite. Este estudo padronizou um protocolo de indução de artrite induzida por albumina na ATM de ratos e avaliou as células microgliais do subnúcleo caudal trigeminal (Vc) na indução e desenvolvimento de hipernocicepção inflamatória persistente através do protocolo proposto. Ratos Wistar machos (n=40) foram sensibilizados com uma injeção subcutânea de albumina de soro bovina metilada (mBSA, 500µg) em emulsão contendo uma solução salina tamponada com fosfato (PBS) e adjuvante completo de Freund (CFA). O mBSA dissolvido em adjuvante incompleto de Freund (IFA) foi injetado em diferentes locais no dorso dos animais 7 e 14 dias após a primeira imunização. Vinte e um dias após a injeção inicial, a artrite foi induzida na ATM dos animais imunizados através de injeção intra-articular de mBSA (Desafio) (10gµ/ATM/semana) durante 3 semanas. A hipernocicepção gerada pela artrite induzida por albumina na ATM foi avaliada pelo comportamento nociceptivo dos animais através de uma injecção intra-articular de uma dose sublimiar de formalina (0,5%) 24 horas, 7 e 14 dias após a última injecção intra-articular mBSA. Após o teste comportamental, os animais foram eutanasiados e os tecidos periarticulares e Vc removidos para análises posteriores. O modelo de indução de artrite por albumina na ATM de ratos resultou em um aumento da resposta nociceptiva observada 7 e 14 dias após a última injecção intra-articular de mBSA (p<0,05: ANOVA, teste de Tukey). Foi observado que a resposta nociceptiva está associada ao aumento significativo da liberação de IL-12, IL-18 e expressão de ICAM-1 em tecidos periarticulares. Não foi observada diferença entre os grupos testados na expressão de micróglias (CD11b/c) e na ativação da p38 MAPK (p>0,05). No entanto, foi observado que houve aumento significativo na liberação da Catepsina e Fractalcina no Vc dos animais com artrite 14 dias após o protocolo experimental (p<0,05: ANOVA, teste de Bonferroni). A expressão do receptor P2X7 mostrou-se aumentada nos dias 7 e 14, quando comparados com os grupos de controle (p<0,05: ANOVA, teste de Bonferroni). Este novo protocolo de indução de artrite por albumina na ATM de ratos demonstrou-se eficaz para o estudo dos mecanismos envolvidos com a indução e manutenção da dor inflamatória na ATM. Em acréscimo, foi demonstrado que a dor persistente induzida pela artrite na ATM de ratos induz alterações na atividade das células microgliais do Vc

Abstract: The temporomandibular joint (TMJ) is affected in 65% of patients with arthritis and pain is the primary complaint, especially during movement and function. The microglial cells responsible for innate immunity in the central nervous system are related as an important factor in the induction and maintenance of sensory disturbances followed by neuronal disorders or peripheral tissue injury or caused by chronic diseases, such as arthritis. This study standardized a protocol to induce albumin induced arthritis in the TMJ of rats and evaluated microglial cells of the trigeminal subnucleus caudalis (Vc) in the induction and development of persistent inflammatory hyperalgesia by the proposed protocol. Male Wistar rats (n=40) were sensitized by a subcutaneous injection of methylated bovine serum albumin (mBSA, 500?g) in an emulsion containing a phosphate buffered saline (PBS) and complete Freund's adjuvant (CFA). The mBSA dissolved in incomplete Freund's adjuvant (IFA) was injected at different sites on the back of the animals 7 and 14 days after the first immunization. Twenty-one days after the initial injection, albumin induced arthritis was induced in the TMJ of the immunized animals by an intra-articular injection of mBSA (Challenge) (10?g/TMJ/week) during 3 weeks. The hyperalgesia generated by the albumin induced arthritis in the TMJ was assessed by the nociceptive behavior of the animals by an intra-articular injection of a low dose of formalin (0.5%) 24 hours, 7 and 14 days after the last intra-articular injection of mBSA. After the behavioral testing, animals were euthanized and periarticular tissues and Vc removed for further analysis. The model of albumin induced arthritis in the TMJ of rats resulted in an increased nociceptive response observed 7 and 14 days after the last intra-articular injection of mBSA (p<0.05: ANOVA, Tukey test). It was observed that the nociceptive response is associated with a significant increase in the release of IL-12, IL-18 and ICAM-1 expression in periarticular tissues. There was no difference for the microglial expression (CD11b/c) and in the activation of p38 MAPK (p>0.05: ANOVA, Bonferroni test) between the tested groups. However, it was observed a significant increase in the release of Cathepsin S and Fractalkine in the Vc of the immunized animals 14 days after the experimental protocol (p<0.05: ANOVA, Bonferroni test). The expression of P2X7 receptor was found significantly increased on days 7 and 14 when compared to the control group (p<0.05: ANOVA, Bonferroni test). This new protocol of albumin induced arthritis in the TMJ of rats showed to be effective for the study of the mechanisms involved in the induction and maintenance of inflammatory pain in the generates changes in the activity of microglial cells of the Vc
Subject: Dor
Articulação temporomandibular
Microglia
Artrite
Hiperalgesia
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2016
Appears in Collections:FOP - Tese e Dissertação

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