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Type: TESE
Title: Identificação da microbiota das lesões endo-periodontais por cultura e PCR e sua suscetibilidade ao preparo quimico-mecanico e a medicações intracanais entre sessões de atendimento
Title Alternative: Identification of endodontic-periodontal lesions microbiota by culture and PCR and their susceptibility to chemo-mechanical preparation and intracanal dressings between appointments
Author: Berber, Vanessa Bellocchio
Advisor: Gomes, Brenda Paula Figueiredo de Almeida
Abstract: Resumo: Os objetivos deste estudo foram: identificar a microbiota dos canais radiculares (CR) e bolsas periodontais (BP) de dentes com polpas necrosadas, lesões periapicais, sangramento gengival e bolsas periodontais pelos métodos de cultura microbiológica e PCR; verificar a capacidade do preparo químico-mecânico (PQM) e do uso de medicação intracanal por 7 (clorexidina gel 2%) e 14 dias (hidróxido de cálcio e associação entre hidróxido de cálcio e clorexidina gel 2%) em reduzir a contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/mL) no canal radicular e na bolsa periodontal associada e investigar possíveis associações entre as espécies bacterianas detectadas e entre microrganismos e sinais e sintomas clínicos. Amostras foram coletadas de CR (E1) e BP (P1) antes e após o PQM (E2, P2) e após o uso de medicação (E3, P3). Foram utilizados meio de transporte, cultura e incubação adequados e os microrganismos identificados por testes bioquímicos. O DNA bacteriano das amostras foi extraído e "primers" específicos para Treponema denticola, Treponema socranskii, Gemella morbillorum (Gm), Tannerella forsythia, Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Porphyromonas endodontalis, Porphyromonas gingivalis (Pg), Prevotella intermedia (Pi), Prevotella tannerae (Pt), Prevotella nigrescens (Pn), Fusobacterium nucleatum, Filifactor alocis, Parvimonas micra (Pm) foram utilizados para detecção destas espécies por PCR. Os resultados mostraram que as UFC/mL iniciais médias foram 17,33 x 10 6 nos CR e 17,93 x 108 nas BP, após o PQM foram 15,25 x 104 nos CR e 8,53 x 108 nas BP e após o uso das medicações intracanais 7,6 x 104 nos CR e de 3,88 x 108 nas BP. Pela cultura, os microrganismos mais encontrados nos CR foram Pi/Pn/Pt e Fn em 45% de E1, Pi/Pn/Pt (5%), P propionicum (5%), S salivarius (5%), M varians (5%) em E2, A naeslundii e P propionicum em 36,6% de E3. Nas BP, os mais encontrados foram Pg e Gm em 50% dos casos de P1, Pm em 62,5% de P2 e Fn em 73,3% de P3. Por PCR, nos CR e nas BP, em todos os momentos da terapia endodôntica, Pm foi o microrganismo mais frequente. Verificou-se que Pm, Td e Tf foram encontrados em maior número em P2 que em E2 e que Pe e Fn estavam mais presentes em P3 que em E3. Nas primeiras coletas não houve diferenças estatisticamente significantes. Concluiu-se que, os canais radiculares e as bolsas periodontais de dentes com comprometimento pulpar e bolsa periodontal apresentaram-se infectados com uma combinação de espécies de microrganismos formada principalmente por bactérias anaeróbias estritas e facultativas, grampositivas, o PQM foi o grande responsável pela redução dos microrganismos dos CR, correlações estatísticas positivas foram observadas entre a presença de sinais e sintomas de origem endodôntica e periodontal e algumas espécies bacterianas, e também entre as espécies, quaisquer das medicações intracanais testadas não foram capazes de alterar ou reduzir a microbiota da bolsa periodontal associada no período de 7 ou 14 dias, não houve diferenças de eficiência antimicrobiana entre as medicações intracanais utilizadas tanto no canal radicular como na bolsa periodontal no período estudado.

Abstract: The aims of this study were to investigate the microbiota of root canals (RC) and periodontal pockets (PP) from teeth with pulp necrosis, periapical lesion, gingival bleeding and periodontal pockets by culture and PCR; to verify the ability of chemo-mechanical preparation (CMP) and intracanal dressings (2% chorhexidine, calcium hydroxide and association of both medications) on reducing colony forming unit (CFU/mL) counting in the period of 7 or 14 days in the root canal and periodontal pocket; and to investigate possible associations among detected bacterial species and microorganisms and between signs and symptoms. Samples were collected from RC (E1) and PP (P1) before and after CMP (E2 and P2) and after the use of intracanal dressings (E3, P3). Adequate transport medium, culture, incubation and biochemical tests were used. DNA of samples was extracted and primers species-specific to Treponema denticola, Treponema socranskii), Gemella morbillorum (Gm), Tannerella forsythia (Tf), Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Porphyromonas endodontalis (Pe), Porphyromonas gingivalis (Pg), Prevotella intermedia (Pi), Prevotella tannerae (Pt), Prevotella nigrescens (Pn), Fusobacterium nucleatum (Fn), Filifactor alocis (Fa), Parvimonas micra (Pm) were used to detect these species by PCR. The results showed that the average of initial CFU/mL was 17.33 x 10 6 in RC and 17.93 x 108 in PP, after CMP 15.25 x 104 in RC and 8.53 x 108 in PP and after the use of intracanal medications 7.6 x 104 in RC and 3.88 x 108 in PP. By culture, the most frequent microorganisms in RC were:Pi/Pn/Pt and Fn in 45% of the E1, Pi/Pn/Pt (5%), P propionicum (5%), S salivarius (5%), M varians (5%) in E2, A naeslundii and P propionicum in 36.6% of the E3. In PP, Pg and Gm were in 50% of P1 while Pm was the most isolated in P2 (62.5%) and Fn in P3 (73.3%). By PCR, in both sites, in all moments of the endodontic therapy, Pm was the mostly found microorganism. It was verified that Pm, Td and Tf were found in greater number in P2 than in E2; and Pe and Fn were more presented in P2 than in E2. There were no statistic differences in the initial samples. It was concluded that, RC and PP from teeth with endo-perio lesion were infected with a combination of microorganisms species, mainly strict and facultative anaerobe bacteria, grampositives; CMP was responsible for the mainly microbial reduction in root canals and the use of intracanal dressings in the established time did not achieve any antimicrobial effect in adjacent periodontal pockets, positive statistic correlations were noted between detected bacterial species and microorganisms and signs and symptoms, there were no statistic differences in the antimicrobial efficacy among the intracanal dressings in RC and PP in the studied period.
Subject: Clorexidina
Hidroxido de calcio
Microorganismos
Language: Português
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2009
Appears in Collections:FOP - Tese e Dissertação

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