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Type: DISSERTAÇÃO
Degree Level: Mestrado
Title: Avaliação da influência do tratamento endodôntico em pacientes com doença periodontal crônica através da análise microbiológica por PCR e quantificação de endotoxinas e citocinas pró-inflamatórias
Title Alternative: Evaluation of the influence of influence of endodontic treatment in patients with periodontal chronic disease through microbiological analysis by PCR quantification of endotoxin and proinflammatory cytokines
Author: Duque, Thais Mageste, 1984-
Advisor: Gomes, Brenda Paula Figueiredo de Almeida
Abstract: Resumo: A doença periodontal crônica atinge as estruturas de suporte dos dentes e é uma das causas mais importantes da perda dos dentes em adultos. Essa doença de longa duração que não regride com a terapia, já pode ter causado uma alteração irreversível na polpa, mesmo quando clinicamente, responde de forma positiva aos testes de sensibilidade pulpar. Os lipopolissacarideos (LPS) presente nas paredes das bactérias Gram negativas e citocinas pró inflamatórias funcionam como fatores estimulantes para a resposta imune, causando destruição óssea e exacerbando o processo inflamatório. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar a influência do tratamento endodôntico em pacientes com doença periodontal crônica, através da análise microbiológica por pcr, quantificação de endotoxinas e monitoramento de citocinas pró inflamatórias em bolsas periodontais e canais radiculares. Foram selecionados 15 dentes com envolvimento periodontal crônico e sensibilidade pulpar positiva. Após o preparo químico mecânico (PQM), os dentes foram divididos em três grupos: G1- sessão única (n=5); GII - Ca(OH)2 associado à clorexidina gel 2% (CHX-gel) (n=5); GIII - Ca(OH)2 + Solução salina (SS). Amostras foram coletadas em três diferentes momentos da terapia endodôntica: inicial, após PQM e após medicação intracanal (MIC) por 30 dias, através de cones de papéis apirogênicos/estéreis. Os microrganismos foram identificados através da técnica molecular do PCR simples (16S rDNA) com o uso de primers específicos para Fusobacterium nucleatum, Prevotella intermédia, complexo vermelho (Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia e Treponema denticola), Gemella morbillorum e Parvimonas micra. Para quantificação de endotoxina foi realizado o teste Lisado de Amebócito Limulus (LAL) e, para a quantificação de citocinas IL1 ?, IL1 ?, TNF ? e PGE2, foi utilizado o ensaio imunoenzimático ELISA. Os resultados mostraram que após 1 ano, dos 15 dentes tratados, 5 foram extraídos. Os outros 10 dentes apresentaram melhora no quadro clínico relacionada à profundidade de sondagem e mobilidade. Nas bolsas periodontais iniciais, pelo menos um dos microrganismos do complexo vermelho estiveram presentes em 12/15 amostras e os 3 juntos estiveram presentes em 6/15. Amostras do canal inicial mostraram a presença de Parvimonas micra e Fusobaterium nucleatum detectadas em 80% dos casos. Não houve associação entre as bactérias encontradas inicialmente nas bolsas e nos canais radiculares. Após o PQM e uso de MIC por 30 dias, houve redução do conteúdo microbiano em ambos os sítios. A concentração de endotoxinas nas bolsas periodontais iniciais foram altas (192,81 EU/mL), mas após o PQM, uma redução (19,65 EU/mL) significativamente estatística foi observada. Os canais radiculares apresentaram concentrações de endotoxinas quase nulas (0,1 EU/mL), sendo compatível com o estado pulpar e assim se manteve durante as outras coletas. Avaliando as medicações testadas, a redução de LPS nas bolsas apresentou melhores resultados com o uso do Ca(OH)2 associado à solução salina (p< 0,05). Houve redução de todas as citocinas pró inflamatórias, quando comparadas às coletas iniciais e após o uso da medicação das bolsas e dos canais, sendo esta estatisticamente significativa em relação a IL1? e TNF?. Não houve correlação positiva entre citocinas e endotoxinas nas bolsas periodontais. Conclui-se que o complexo vermelho está presente na doença periodontal e que a presença de uma medicação intracanal diminui a concentração do LPS e de citocinas inflamátorias nos canais radiculares e bolsas periodontais

Abstract: The chronic periodontal disease affects the supporting structures of the teeth and is a major cause of tooth loss in adults. This long-term illness that does not regress with therapy, may have already caused an irreversible change in the pulp, even when clinically responds to pulp sensitivity tests. The lipopolysaccharide (LPS) present in the walls of gram negative bacteria and inflammatory cytokines act as factors for stimulating the immune response, causing bone destruction and increasing inflammation. The objective of this study was to evaluate the influence of endodontic treatment in patients with chronic periodontitis using microbiological analysis by pcr, endotoxin quantification and monitoring of inflammatory cytokines in periodontal pockets and root canals. Samples were taken from 15 teeth with chronic periodontal involvement and positive pulp sensitivity was selected. After chemical mechanical preparation (MCP), the teeth were divided into three groups: G1- one visit (n = 5), GII - Ca(OH)2 associated with chlorhexidine gel 2% (CHX-gel) (n = 5) ; GIII - Ca(OH)2 + saline solution (SS). Samples were collected at three different times in endodontic therapy: initial, after MCP and after intracanal medication (ICM) for 30 days, through paper cones apirogênics / sterile. The microorganisms were identified by PCR simple molecular technique (16S rDNA) by using specific primers for Fusobacterium nucleatum, Prevotella intermédia, red complex (Porphyromonas gingivalis, Treponema denticola and Tannerella forsythia), and Parvimonas micras. For quantification of endotoxin was performed the Limulus Amebocyte Lysate (LAL) test and for the quantification of cytokines IL-1 ?, IL-1 ?, TNF ? and PGE2 was used ELISA immunoenzymatic assay. The results showed that after 1 year, 15 of the treated teeth, 5 were extracted. The other 10 teeth showed improvement related to probing depth and mobility. In the initial periodontal pockets, at least one of the microorganisms of the red complex were present in 12/15 samples and 3 together were present in 6/15. Canals samples showed the presence of Parvimonas micra and Fusobaterium nucleatum detected in 80% of cases. There was no association between the bacteria found in the pockets and root canals. After the CMP and use of ICM for 30 days, there was reduction of microbial content in both places. The initial endotoxin concentration in periodontal pockets were high (192.81 EU / ml), but after the CMP the reduction (19.65 EU / ml) was statistically significantly observed. Root canals showed low concentrations of endotoxin (0.1 EU / mL), being compatible with state of the pulp and maintained for other samples. Accordin the tested medications, reduction of LPS in the pockets showed better results with the use of Ca(OH)2 associated to saline solution (p <0.05). There was a reduction of all inflammatory cytokines when compared to the initial samples and after use of the dressing in pocktes and canals, being statistically significant in relation to IL1? and TNFa. There was no positive correlation between endotoxin and cytokines in periodontal pockets. In conclusion the red complex is present in the periodontal disease and that the presence of dressing decreases the concentration of inflammatory cytokines and LPS in root canals and periodontal pockets
Subject: Bactérias
Toxinas
Inflamação
Periodontite
Language: Português
Editor: [s.n.]
Date Issue: 2013
Appears in Collections:FOP - Tese e Dissertação

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