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Type: DISSERTAÇÃO
Degree Level: Mestrado
Title: Ação de diferentes cimentos endodônticos sobre a citotoxicidade e a produção de gelatinases em cultura de fibroblastos
Title Alternative: Cytotoxic evaluation and up-regulation of gelatinases by root canal sealers in human fibroblast cells
Author: Silva, Emanuel João Nogueira Leal da
Advisor: Záia, Alexandre Augusto, 1968-
Abstract: Resumo: Os cimentos endodônticos podem entrar em contato com os tecidos periapicais no momento da obturação, gerando uma inflamação transitória. Esta inflamação pode estar associada a uma degradação das proteínas da matriz extracelular pelas metaloproteinases da matriz (MMPs). Dessa forma, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos de exposição de cimentos endodônticos sobre a atividade gelatinolítica das MMP-2 e -9, produzidas por fibroblastos humanos. Fibroblastos da linhagem MRC5 (3x105 células/poço) foram incubados diretamente ou indiretamente com os cimentos AH Plus, Endomethasone N, Pulp Canal Sealer EWT e Sealapex nos períodos de 1/2h, 1h, 4h e 24h. A citotoxicidade dos cimentos foi determinada pela contagem de células viáveis, utilizando para isso o teste do azul de tripan. Sobrenadantes da cultura de células incubadas com os cimentos endodônticos, nas duas formas testadas, foram coletadas após cada período de exposição, com o objetivo de determinar os níveis de atividade gelatinolítica de MMP-2 e -9, pela técnica da zimografia. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e avaliados estatisticamente através do teste t (p<0,05). Os resultados mostraram haver uma maior atividade gelatinolítica de MMP-2 após os períodos de 4 e 24 horas, sem haver diferença entre os cimentos testados. Uma maior atividade gelatinolítica pode ser observada nas células que foram expostas ao cimento de forma direta, quando comparadas com aquelas que de receberam o contato indireto com o cimento (p<0,05). Nos períodos de tempo testados nenhuma atividade gelatinolítica pode ser observada no grupo controle, que não recebeu contato com os cimentos. Os resultados de citotoxicidade mostraram que os cimentos testados foram citotóxicos em ambas as formas de contato sendo que o Sealapex apresentou menor citotoxicidade e que o AH Plus foi o cimento mais citotóxico. Pode-se concluir que todos os cimentos endodônticos podem induzir a expressão de MMP-2 em fibroblastos MRC5 e que apesar de o AH Plus possuir a maior citotoxicidade, todos os cimentos testados apresentaram efeitos citotóxicos.

Abstract: Root canal sealers might be into contact with periapical tissues during root canal filling. This inflammation can be associated with extracellular matrix proteins degradation by matrix metalloproteinases (MMPs). The aim of this study was to investigate the effects of root canal sealers on the gelatinolytic acitivity of MMP-2 and -9 produced by human fibroblast cells. Human fibroblast cells MRC5 (3x105 cells/well) were incubated directly or indirectly with AH Plus, Endomethasone N, Pulp Canal Sealer EWT or Sealapex for 1/2h, 1h, 4h or 24h (timepoints). The cytotoxicity of all root canal sealers was determined by counting viable cells using the trypan blue assay. Supernatants of cell cultures incubated with root sealers, directly or indirectly, were collected after each time point to determine the levels of MMP-2 and MMP-9 gelatinolytic activity by gelatin zymography. Data were analyzed using ANOVA and t tests (p<0.05). The results showed that the cells secreted MMP-2 after the periods of 4 and 24 hours. However, there were no statistical differences between the sealers. Secretion of gelatinases was found to be elevated by the sealers in direct contact with the cell monolayer, when compared to the indirect contact (p<0.05). In the timepoints tested no MMP activity could be detected in the control group without the sealers. The cytotoxicity results showed that all the sealers were cytotoxic in both contact forms. These results indicated that Sealapex had a lower cytotoxicity while AH Plus was the most citotoxic endodontic sealer. In conclusion all root canal sealers can induce the expression of MMP-2 in MRC5 fibroblast cells. AH Plus presented the highest cytotoxicity among the tested sealers, but all tested sealers presents citotoxic effects.
Subject: Endodontia
Células - Cultura e meios de cultura
Metaloproteases
Language: Português
Editor: [s.n.]
Citation: SILVA, Emanuel João Nogueira Leal da. Ação de diferentes cimentos endodônticos sobre a citotoxicidade e a produção de gelatinases em cultura de fibroblastos. 2011. 34 f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Piracicaba, SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/289801>. Acesso em: 17 ago. 2018.
Date Issue: 2011
Appears in Collections:FOP - Tese e Dissertação

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